人半乳糖缺乏IgA1(GD-IgA1)ELISA試劑盒
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
人半乳糖缺乏IgA1（Gd-IgA1）ELISA試劑盒用于定量檢測(cè)樣本中半乳糖缺陷型IgA1的含量，主要用于IgA腎病等相關(guān)研究。
英文名稱 | Human GD-IgA1 ELISA Kit | 產(chǎn)品類別 | Human/人Elisa試劑盒 |
貨號(hào) | A115248 | 規(guī)格 | 48T/96T |
靈敏度 | 1.5625ng/ml | 檢測(cè)范圍 | 3.125ng/ml-200ng/ml |
核心功能與原理
檢測(cè)目標(biāo)：Gd-IgA1是IgA1分子鉸鏈區(qū)O-糖鏈末端半乳糖缺失的異常形式，與IgA腎病等疾病密切相關(guān)1
檢測(cè)原理：采用雙抗體夾心法ELISA，通過(guò)特異性抗體捕獲和識(shí)別Gd-IgA1，結(jié)合HRP酶標(biāo)抗體和TMB底物顯色，利用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值），從而定量樣本中Gd-IgA1的含量。
主要組成與規(guī)格
微孔酶標(biāo)板：預(yù)包被抗人IgA抗體，用于捕獲樣本中的Gd-IgA。
標(biāo)準(zhǔn)品：含已知濃度的Gd-IgA1，用于繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，濃度范圍通常為62.5-2000 U/mL。
試劑組分：
檢測(cè)抗體-HRP：用于識(shí)別結(jié)合Gd-IgA。
20×洗滌緩沖液：用于洗滌反應(yīng)板，去除未結(jié)合物質(zhì)。
底物液A&B：TMB底物，與HRP反應(yīng)產(chǎn)生顏色變化。
終止液：用于終止底物反應(yīng)，穩(wěn)定顏色。
規(guī)格：常見(jiàn)規(guī)格為48T或96T，滿足不同實(shí)驗(yàn)需求。
操作步驟
準(zhǔn)備：從冰箱取出試劑盒平衡至室溫，準(zhǔn)備所需器材（酶標(biāo)儀、加樣器、恒溫箱等）。
加樣：設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，加入相應(yīng)濃度的標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣本（通常50μL/孔）。
溫育：加入HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體，37℃溫育60分鐘，使抗體與Gd-IgA1充分反應(yīng)。
洗滌：棄去液體，用洗滌液洗板5次，去除未結(jié)合物質(zhì)。
顯色：加入底物液A&B，37℃避光孵育15分鐘，觀察顏色變化。
終止與讀數(shù)：加入終止液，15分鐘內(nèi)在酶標(biāo)儀450nm波長(zhǎng)下測(cè)定各孔OD值。
結(jié)果計(jì)算：根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品OD值繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算樣本中Gd-IgA1的濃度。
性能特點(diǎn)
高靈敏度與特異性：可準(zhǔn)確檢測(cè)低濃度Gd-IgA1，且不與其他可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。
重復(fù)性好：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%，確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性。
穩(wěn)定性強(qiáng)：試劑盒在2-8℃保存條件下有效期可達(dá)6個(gè)月。
應(yīng)用領(lǐng)域
IgA腎病研究：Gd-IgA1是IgA腎病的重要生物標(biāo)志物，可用于疾病診斷、病情評(píng)估及治療監(jiān)測(cè)
免疫相關(guān)疾病研究：探索Gd-IgA1在其他免疫相關(guān)疾病中的作用機(jī)制
注意事項(xiàng)
樣本處理：確保樣本無(wú)溶血、無(wú)脂血，避免使用含的樣本。
操作規(guī)范：嚴(yán)格按照說(shuō)明書操作，控制加樣量、溫育時(shí)間和洗滌次數(shù)，避免交叉污染。
試劑保存：未用完的試劑應(yīng)密封保存于2-8℃，避免反復(fù)凍融。
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如何驗(yàn)證試劑盒的特異性？（實(shí)操建議）：稀釋線性實(shí)驗(yàn) (Linearity)：
操作： 將高濃度的陽(yáng)性樣本用稀釋液進(jìn)行梯度稀釋（如1:2, 1:4, 1:8...）。
預(yù)期： 測(cè)得的濃度值與稀釋倍數(shù)應(yīng)呈良好的線性關(guān)系（相關(guān)系數(shù) R2 ≥ 0.98）。如果線性不好，說(shuō)明樣本基質(zhì)中有干擾物影響了特異性結(jié)合。
干擾實(shí)驗(yàn) (Interference Test)：
操作： 在已知濃度的目標(biāo)抗原溶液中，加入高濃度的潛在干擾物（如高濃度的脂質(zhì)或結(jié)構(gòu)類似物），檢測(cè)其對(duì)結(jié)果的影響。
預(yù)期： 若檢測(cè)值與理論值偏差在±10%以內(nèi)，說(shuō)明抗干擾能力強(qiáng)，特異性好。
回收實(shí)驗(yàn) (Recovery Test)：
操作： 在樣本中加入已知量的標(biāo)準(zhǔn)品，檢測(cè)總含量，計(jì)算回收率。
預(yù)期： 回收率在80%-120%之間，說(shuō)明試劑盒能準(zhǔn)確識(shí)別目標(biāo)，不受樣本背景干擾。
關(guān)鍵字： 人半乳糖缺乏IgA1 ;GD-IgA1;ELISA試劑盒;
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