人基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子3(TIMP-3)ELISA試劑盒
產(chǎn)品簡介:
人基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子3(TIMP-3)ELISA試劑盒用于定量檢測人體樣本（如血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液等）中的TIMP-3水平。TIMP-3是基質(zhì)金屬蛋白酶（MMPs）的天然抑制劑，參與調(diào)控細胞外基質(zhì)的降解，在組織重塑、炎癥反應、腫瘤侵襲和血管生成等生理和病理過程中發(fā)揮重要作用。
英文名稱 | Human TIMP-3 ELISA Kit | 產(chǎn)品類別 | Human/人Elisa試劑盒 |
貨號 | A113974 | 規(guī)格 | 48T/96T |
靈敏度 | 62.5pg/mL | 檢測范圍 | 125pg/mL-4000pg/mL |
檢測原理
雙抗體夾心法ELISA：微孔板預包被抗TIMP-3抗體，樣本中的TIMP-3與生物素化的檢測抗體結(jié)合，再與HRP標記的鏈霉親和素反應，加入TMB底物后顯色，顏色深淺與TIMP-3濃度呈正相關(guān)，酶標儀在450 nm波長處讀數(shù)。
主要組成
預包被酶標板（96/48孔）
TIMP-3標準品（多個濃度梯度）
生物素化檢測抗體
HRP標記鏈霉親和素
底物溶液（TMB）、終止液（硫酸）
洗滌緩沖液、樣本稀釋液、封板膜等輔助試劑
檢測流程
加樣：標準品/樣本+生物素化檢測抗體+HRP標記鏈霉親和素
洗滌：每孔加滿洗滌液，重復5次
顯色：加入底物溶液，避光反應10-15分鐘
終止：加入終止液
讀數(shù)：酶標儀450 nm波長測定OD值
性能指標
檢測范圍：通常為62.50-4000 pg/mL（具體以說明書為準）
靈敏度：低檢出限小于37.50 pg/mL
特異性：僅與人類TIMP-3反應，不與其他相關(guān)蛋白交叉反應
重復性：板內(nèi)變異系數(shù)≤10%，板間變異系數(shù)≤15%
臨床與研究意義
腫瘤研究：TIMP-3通過抑制MMPs活性，調(diào)控腫瘤細胞侵襲和轉(zhuǎn)移，其表達水平與腫瘤進展和預后相關(guān)。
炎癥與纖維化研究：TIMP-3參與調(diào)控炎癥反應和組織纖維化過程，可作為相關(guān)疾病機制研究的潛在標志物。
血管生成研究：TIMP-3具有抗血管生成作用，在眼科疾病（如脈絡膜新生血管）等研究中具有重要意義。
樣本要求
血清/血漿：避免溶血和反復凍融。
其他樣本：如細胞培養(yǎng)上清液，需經(jīng)適當處理和稀釋。
注意事項
試劑盒需2-8℃保存，有效期一般為6個月。
實驗前平衡至室溫，嚴格按照說明書操作。
建議設空白對照、標準曲線和樣本復孔，確保結(jié)果準確可靠。
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如何驗證試劑盒的特異性？（實操建議）：稀釋線性實驗 (Linearity)：
操作： 將高濃度的陽性樣本用稀釋液進行梯度稀釋（如1:2, 1:4, 1:8...）。
預期： 測得的濃度值與稀釋倍數(shù)應呈良好的線性關(guān)系（相關(guān)系數(shù) R2 ≥ 0.98）。如果線性不好，說明樣本基質(zhì)中有干擾物影響了特異性結(jié)合。
干擾實驗 (Interference Test)：
操作： 在已知濃度的目標抗原溶液中，加入高濃度的潛在干擾物（如高濃度的脂質(zhì)或結(jié)構(gòu)類似物），檢測其對結(jié)果的影響。
預期： 若檢測值與理論值偏差在±10%以內(nèi)，說明抗干擾能力強，特異性好。
回收實驗 (Recovery Test)：
操作： 在樣本中加入已知量的標準品，檢測總含量，計算回收率。
預期： 回收率在80%-120%之間，說明試劑盒能準確識別目標，不受樣本背景干擾。
關(guān)鍵字： 人基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子3 ;TIMP-3;ELISA試劑盒;
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