產(chǎn)品概述
本試劑盒專用于環(huán)紋背帶線蟲（Teladorsagia circumcincta）的快速、高特異性熒光定量PCR檢測，采用染料法（如SYBR Green）實時監(jiān)測擴增過程。適用于科研、臨床及獸醫(yī)領(lǐng)域?qū)€蟲DNA的定性與定量分析。
產(chǎn)品名稱 | 環(huán)紋背帶線蟲染料法熒光定量PCR試劑盒 | 英文名稱 | Teladorsagia circumcincta Dye-based qPCR Kit |
產(chǎn)品規(guī)格 | 50T | 產(chǎn)品分類 | 熒光定量PCR |
檢測類型 | PCR檢測 | 產(chǎn)品貨號 | PR3354 |
產(chǎn)品組成
預混PCR試劑：含優(yōu)化緩沖液、dNTPs、熱啟動Taq DNA聚合酶及熒光染料。
引物對：針對環(huán)紋背帶線蟲特異性基因設(shè)計，預期產(chǎn)物長度560 bp。
陽性對照：含靶基因片段的標準品。
陰性對照：無核酸酶水。
實驗流程
樣本制備：提取待測樣本DNA，建議濃度≥10 ng/μL。
反應體系配制（50 μL體系）：
預混試劑：25 μL
模板DNA：5 μL
引物：各1 μL（終濃度0.2 μM）
無核酸酶水：補至50 μL
PCR擴增程序：
預變性：95℃ 5分鐘
循環(huán)階段（40 cycles）：95℃ 30秒 → 60℃ 30秒 → 72℃ 30秒
熔解曲線分析：65℃~95℃，每0.5℃遞增
數(shù)據(jù)分析
定量檢測：以陽性對照log濃度為橫軸、Ct值為縱軸繪制標準曲線，計算待測樣本濃度。
定性判定：
陽性：Ct≤35，且擴增曲線呈典型指數(shù)增長。
陰性：Ct≥40或無擴增。
可疑（Ct 35~40）：需重復檢測，若Ct仍<40判為陽性。
注意事項
操作需在無菌環(huán)境下進行，避免交叉污染。
試劑保存于2~8℃，避免反復凍融。
熔解曲線需呈現(xiàn)單一峰以確保特異性。
建議使用ROX染料校正孔間熒光偏差（視儀器需求）。
性能參數(shù)
靈敏度：可檢測低至1拷貝/μL的靶基因。
特異性：不與常見寄生蟲（如捻轉(zhuǎn)血矛線蟲）發(fā)生交叉反應。
保質(zhì)期：6個月（生產(chǎn)日期見包裝）。
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關(guān)鍵字： 環(huán)紋背帶線蟲;染料法熒光定量;PCR試劑盒;
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