交鏈孢霉屬通用染料法熒光定量PCR試劑盒
商品屬性
產(chǎn)品名稱 | 交鏈孢霉屬通用染料法熒光定量PCR試劑盒 | 英文名稱 | Alternaria spp. Universal Dye-based qPCR Kit |
規(guī)格 | 50T | 貨號(hào) | PR3474 |
預(yù)期用途
本試劑盒基于實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)，通過(guò)特異性引物和熒光染料（如SYBR Green）對(duì)交鏈孢霉屬病原體的保守基因組區(qū)域進(jìn)行擴(kuò)增檢測(cè)，適用于環(huán)境樣本、臨床標(biāo)本或食品中交鏈孢霉屬的定性篩查及療效評(píng)估。
檢驗(yàn)原理
染料法原理：SYBR Green等熒光染料可非特異性嵌入雙鏈DNA中，在PCR擴(kuò)增過(guò)程中隨產(chǎn)物積累釋放熒光信號(hào)，通過(guò)實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)熒光強(qiáng)度變化實(shí)現(xiàn)靶標(biāo)核酸的定性與半定量分析。
高特異性：針對(duì)交鏈孢霉屬基因組保守序列設(shè)計(jì)引物，確保檢測(cè)特異性。
靈敏度：可檢測(cè)低至單拷貝的靶標(biāo)分子，擴(kuò)增效率達(dá)10^9–10^10。
試劑盒組成
預(yù)混液：含DNA聚合酶、dNTPs、緩沖液及優(yōu)化劑（即開(kāi)即用）。
陽(yáng)性對(duì)照：滅活交鏈孢霉屬cDNA。
陰性對(duì)照：無(wú)靶標(biāo)基因組DNA。
熒光染料：SYBR Green或其他等效染料。
注：具體組分可能因批次調(diào)整，以實(shí)際包裝清單為準(zhǔn)。
操作步驟
樣本制備：按標(biāo)準(zhǔn)方法提取待測(cè)樣本DNA。
反應(yīng)體系配制：將模板DNA、預(yù)混液、引物及染料按比例混合。
PCR擴(kuò)增：
程序設(shè)置：預(yù)變性（95℃, 5min）→ 循環(huán)擴(kuò)增（95℃ 15s, 60℃ 30s, 40個(gè)循環(huán)）。
熒光信號(hào)采集：于60℃延伸階段讀取熒光值。
結(jié)果分析：通過(guò)擴(kuò)增曲線和Ct值判定樣本中交鏈孢霉屬核酸的存在及相對(duì)含量。
性能參數(shù)
特異性：不與常見(jiàn)相近真菌（如曲霉、青霉）交叉反應(yīng)。
靈敏度：檢測(cè)下限≤10 copies/μL。
重復(fù)性：批內(nèi)/批間變異系數(shù)（CV）<5%。
注意事項(xiàng)
避免反復(fù)凍融試劑，解凍后需充分混勻。
實(shí)驗(yàn)需在無(wú)菌環(huán)境下操作，防止污染。
建議使用專用熒光定量PCR儀，確保數(shù)據(jù)準(zhǔn)確性。
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關(guān)鍵字： 交鏈孢霉屬通用;染料法熒光定量;PCR試劑盒;
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