溶血性曼氏桿菌染料法熒光定量PCR試劑盒
商品屬性
產(chǎn)品名稱 | 溶血性曼氏桿菌染料法熒光定量PCR試劑盒 | 英文名稱 | Mannheimia haemolytica Dye-based qPCR Kit |
規(guī)格 | 50T | 貨號 | PR3588 |
產(chǎn)品概述
本試劑盒為染料法熒光定量PCR檢測試劑，專用于溶血性曼氏桿菌（Mannheimia haemolytica）的核酸定性或定量分析。采用SYBR Green等染料法檢測原理，通過特異性引物擴增靶標DNA序列，結合實時熒光信號監(jiān)測，實現(xiàn)高靈敏度、高特異性的檢測。適用于科研用途，不可用于臨床診斷。
產(chǎn)品參數(shù)
規(guī)格：50T/盒（20μL反應體系/次）
檢測方法：染料法熒光定量PCR
靈敏度：可達100拷貝/反應
線性范圍：定量檢測時覆蓋至少5個數(shù)量級（如10^1–10^6拷貝/μL）
保存條件：-20℃避光保存，有效期12個月
運輸條件：低溫運輸
產(chǎn)品特點
即開即用：預混優(yōu)化試劑，僅需提供樣品DNA模板。
高特異性：引物基于溶血性曼氏桿菌保守序列設計，避免與其他微生物交叉反應。
靈敏度高：可檢測低至數(shù)百拷貝的靶標DNA。
雙重功能：支持定性與定量分析，標準曲線需用戶自行稀釋制備。
防污染設計：一管式閉管檢測，減少氣溶膠污染風險。
試劑盒組成
2×qPCR MagicMix：含DNA聚合酶、dNTPs、緩沖液及熒光染料（棕色管，500μL）。
熒光PCR專用模板稀釋液（黃蓋，1mL）。
溶血性曼氏桿菌特異性引物混合物（白蓋，100μL）。
陽性對照：非傳染性DNA片段（需按說明書稀釋）。
使用方法
標準曲線制備（示例：10^1–10^6拷貝/μL）
標記6支離心管（1–6號），每管加入45μL模板稀釋液。
取5μL陽性對照（初始濃度10^8拷貝/μL）加入6號管，震蕩混勻，得到10^7拷貝/μL標準品。
依次10倍梯度稀釋至10^1拷貝/μL（操作需在獨立區(qū)域，避免污染）。
PCR反應體系（20μL/反應）
| 組分 | 體積（μL） |
| 2×qPCR MagicMix | 10 |
| 引物混合物 | 2 |
| 模板DNA | 2 |
| 無核酸酶水 | 6 |
擴增程序
預變性：95℃, 3分鐘；
循環(huán)：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（采集熒光信號），共40個循環(huán)；
溶解曲線分析（可選）：60–95℃，每0.5℃遞增。
注意事項
實驗分區(qū)操作，避免交叉污染。
陽性對照需單獨稀釋，嚴禁直接加入反應體系。
若需定量檢測，需同步運行標準曲線。
廢棄物需按生物安全規(guī)范處理。
質量控制
陰性對照：建議設置無模板對照（NTC）以監(jiān)測污染。
重復性：建議每個樣品至少重復2次。
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關鍵字： 溶血性曼氏桿菌;染料法熒光定量;PCR試劑盒;
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