產(chǎn)品介紹:

實(shí)驗(yàn)原理
試劑盒采用雙抗體夾心法。用抗小鼠CLU抗體包被于酶標(biāo)板上,實(shí)驗(yàn)時(shí)樣品(或標(biāo)準(zhǔn)品)中的小鼠CLU會(huì)與包被抗體結(jié)合。后依次加入生物素化的抗小鼠CLU抗體和辣根過氧化物酶標(biāo)記的親和素,抗小鼠CLU抗體與結(jié)合在包被抗體上的小鼠CLU結(jié)合,生物素與親和素特異性結(jié)合而形成免疫復(fù)合物,游離的成分被洗去。加入顯色底物(TMB),TMB在辣根過氧化物酶的催化下呈現(xiàn)藍(lán)色,加終止液后變成黃色。用酶標(biāo)儀在450 nm波長(zhǎng)處測(cè)OD值,CLU濃度與OD450值之間呈正比,通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出樣品中CLU的濃度。
產(chǎn)品名稱 | 小鼠叢生蛋白(CLU)ELISA試劑盒 | 英文名稱 | Mouse CLU ELISA Kit |
規(guī)格 | 48T/96T | 貨號(hào) | A115382 |

試劑盒組成

預(yù)包被抗體的酶標(biāo)板:用于固相抗體的固定。
標(biāo)準(zhǔn)品:已知濃度的CLU溶液,用于繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
生物素標(biāo)記的檢測(cè)抗體:與CLU結(jié)合。
HRP標(biāo)記的鏈霉親和素:催化顯色反應(yīng)。
顯色底物(TMB):在HRP作用下顯色。
終止液:終止顯色反應(yīng)。
洗滌液:用于洗滌未結(jié)合的試劑。
樣本稀釋液:用于稀釋待測(cè)樣本。
檢測(cè)范圍與靈敏度
檢測(cè)范圍:通常為0.156-10ng/mL或15.63-1000pg/mL。
靈敏度:最低檢測(cè)濃度為12.8pg/mL或9.38pg/mL。
操作步驟

準(zhǔn)備試劑和樣本:按說明書準(zhǔn)備試劑,處理樣本。
加樣:將標(biāo)準(zhǔn)品和樣本加入酶標(biāo)板孔中。
溫育:在指定溫度下孵育,使抗體-抗原充分結(jié)合。
洗滌:洗去未結(jié)合的試劑,減少背景干擾。
加酶標(biāo)抗體:加入生物素標(biāo)記的檢測(cè)抗體和HRP標(biāo)記的鏈霉親和素。
顯色:加入TMB底物,避光孵育顯色。
終止反應(yīng):加入終止液,終止顯色。
讀數(shù):使用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定OD值。
計(jì)算:根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣本中的CLU濃度。
注意事項(xiàng)

樣本處理:血清、血漿需離心處理,避免反復(fù)凍融。
試劑保存:試劑盒需按說明書保存,避免失效。
操作規(guī)范:使用一次性吸頭,避免交叉污染;嚴(yán)格按步驟操作,確保結(jié)果準(zhǔn)確性。
適用范圍
本試劑盒適用于科研領(lǐng)域,用于檢測(cè)小鼠血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液及相關(guān)生物液體中的CLU濃度,不適用于臨床診斷
試劑與樣本準(zhǔn)備階段:

溫度平衡(最容易被忽視的點(diǎn))
操作: 從冰箱取出的試劑盒(包括標(biāo)準(zhǔn)品、酶標(biāo)試劑、樣品等)必須在室溫(18-25℃)下平衡 30 分鐘。
后果: 冷試劑直接使用會(huì)導(dǎo)致孔內(nèi)溫差,產(chǎn)生冷凝水或非特異性背景,嚴(yán)重影響 OD 值。
試劑配制
洗滌液: 濃縮洗滌液如果在低溫下保存可能會(huì)有結(jié)晶析出。配制時(shí)必須確保結(jié)晶完全溶解并混勻。
現(xiàn)用現(xiàn)配: 酶標(biāo)試劑和顯色液(如 TMB)對(duì)光和熱敏感,建議在使用前配制工作液,避免失效。
樣本處理
避免溶血: 血清樣本如果發(fā)生溶血(紅細(xì)胞破裂),會(huì)釋放過氧化物酶,導(dǎo)致假陽(yáng)性或背景過高。
離心去雜質(zhì): 血液或細(xì)胞上清樣本在加樣前最好進(jìn)行離心,去除沉淀和懸浮物,防止堵塞孔底或干擾讀數(shù)。
稀釋倍數(shù): 如果樣本濃度過高,超出標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍,必須進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)確定稀釋倍數(shù)。計(jì)算結(jié)果時(shí)記得乘以稀釋倍數(shù)。
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注意事項(xiàng)
科研用途:僅供科研實(shí)驗(yàn)使用,不可用于臨床診斷。
操作規(guī)范:嚴(yán)格按照說明書操作,避免交叉污染,確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確。
關(guān)鍵字: 小鼠叢生蛋白 ;CLU;ELISA試劑盒;
上海撫生實(shí)業(yè)有限公司(Shanghai Fusheng Industrial Co., Ltd.,China)是一家化學(xué)、生化和材料科學(xué)等領(lǐng)域的科研用研發(fā)產(chǎn)品的制造商和供應(yīng)商, 我們的產(chǎn)品在相當(dāng)寬的基礎(chǔ)科學(xué)領(lǐng)域得到廣泛的應(yīng)用??蛻舭▽W(xué)術(shù)界、工業(yè)界和政府的研究和開發(fā)實(shí)驗(yàn)室以及制藥,生物技術(shù),化工/石化行業(yè)等具商業(yè)規(guī)模的企業(yè)。
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