產(chǎn)品介紹:

小鼠乙型肝炎E抗原(HBeAg)ELISA試劑盒是一種用于定量檢測小鼠血清、血漿或其他體液樣本中HBeAg含量的科研工具,廣泛應用于乙型肝炎病毒(HBV)感染機制研究、疫苗效力評估及抗病毒藥物篩選等領域。該試劑盒基于雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)原理,具有高靈敏度、高特異性和操作簡便等優(yōu)點。
產(chǎn)品名稱 | 小鼠乙型肝炎E抗原(HBeAg)ELISA試劑盒 | 英文名稱 | Mouse HBeAg ELISA Kit |
規(guī)格 | 48T/96T | 貨號 | A104787 |

主要特點

檢測原理:采用雙抗體夾心法,以抗HBeAg捕獲抗體包被微孔板,加入樣本后,HBeAg與酶標檢測抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,加入TMB底物顯色,顏色深淺與HBeAg濃度呈正相關。
檢測范圍:通常為2.5 IU/L至80 IU/L,可滿足不同濃度樣本的檢測需求。
靈敏度:最低檢測限可達0.1 IU/L,能夠準確反映低濃度HBeAg水平。
樣本類型:適用于血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養(yǎng)上清液等多種樣本類型。
保存條件:2-8℃保存,有效期一般為6個月。
操作步驟簡述

準備試劑與樣本:平衡試劑至室溫,準備標準品和待測樣本。
加樣:在酶標板中加入標準品或樣本,每孔50μL。
加入酶標抗體:每孔加入HRP標記的檢測抗體,37℃溫育60分鐘。
洗滌:棄去液體,用洗滌液洗板5次,拍干。
顯色:每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光顯色15分鐘。
終止反應:每孔加入50μL終止液,立即測定。
讀數(shù)與計算:在450nm波長下測定OD值,通過標準曲線計算樣本中HBeAg濃度。
注意事項

試劑盒僅用于科研用途,不適用于臨床診斷。
實驗過程中需避免交叉污染,確保結果準確性。
樣本應避免溶血和反復凍融,以防止HBeAg降解或失活。
試劑與樣本準備階段:

溫度平衡(最容易被忽視的點)
操作: 從冰箱取出的試劑盒(包括標準品、酶標試劑、樣品等)必須在室溫(18-25℃)下平衡 30 分鐘。
后果: 冷試劑直接使用會導致孔內(nèi)溫差,產(chǎn)生冷凝水或非特異性背景,嚴重影響 OD 值。
試劑配制
洗滌液: 濃縮洗滌液如果在低溫下保存可能會有結晶析出。配制時必須確保結晶完全溶解并混勻。
現(xiàn)用現(xiàn)配: 酶標試劑和顯色液(如 TMB)對光和熱敏感,建議在使用前配制工作液,避免失效。
樣本處理
避免溶血: 血清樣本如果發(fā)生溶血(紅細胞破裂),會釋放過氧化物酶,導致假陽性或背景過高。
離心去雜質(zhì): 血液或細胞上清樣本在加樣前最好進行離心,去除沉淀和懸浮物,防止堵塞孔底或干擾讀數(shù)。
稀釋倍數(shù): 如果樣本濃度過高,超出標準曲線范圍,必須進行預實驗確定稀釋倍數(shù)。計算結果時記得乘以稀釋倍數(shù)。
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關鍵字: 小鼠乙型肝炎E抗原 ;HBeAg;ELISA試劑盒;
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