KASUMI-1細胞（紅白血病細胞）
| 一、細胞基本屬性 |
細胞名稱 | KASUMI-1細胞（紅白血病細胞） |
細胞別稱 | KASUMI-1; Kasumi 1; KASUMI1; Kasumi1；人急性淋巴白血病細胞；人急性原粒細胞白血病細胞；人急性髓母白血病細胞 |
商品貨號 | LM8C1200 |
種屬來源 | 人 |
年齡性別 | 7歲，男 |
組織來源 | 外周血，急性原粒細胞白血病 |
生長特性 | 懸浮生長 |
細胞形態(tài) | 原粒細胞 |
背景簡介 | Kasumi-1細胞具有人急性淋巴白血病細胞的典型特征，是研究人急性淋巴白血病的極佳材料。Kasumi-1細胞是一個帶有8：21號染色體轉(zhuǎn)位的白血病細胞株，這個轉(zhuǎn)位使得AML1基因和ETO(或稱MTG8)基因串聯(lián)，使融合基因AML1-ETO(也稱作AML1-MTG或RUNX1-CBF2T1)的表達升高，因而細胞產(chǎn)生嵌合的AML1-ETO蛋白。這個蛋白下調(diào)CEBPA mRNA、蛋白和DNA的結(jié)合活性，而這種結(jié)合對粒性白細胞的分化是極端重要的。Kasumi-1細胞建立于一位急性白血病患者的外周血，Kasumi-1細胞髓過氧化物酶陽性，顯示其髓性成熟的形態(tài)。增生試驗顯示，培養(yǎng)的Kasumi-1細胞對IL-3、IL-6、G-CSF(粒細胞集落刺激因子)、GM-CS(粒細胞-巨噬細胞集落刺激因子)有響應(yīng)，但對IL-1和IL-5沒有響應(yīng)。在體外液體培養(yǎng)中分別加入二甲亞砜、G-CSF、IL-5，也沒有觀察到粒性或嗜酸性細胞的成熟。Kasumi-1細胞培養(yǎng)過程中，加入佛波酯可以看到誘導(dǎo)出的巨噬細胞樣細胞。 |
生物安全等級 | 1 |
細胞規(guī)格 | 1×106cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝 |
支原體檢測 | 無 |
基因表達情況 |
|
保藏機構(gòu) | ATCC; CRL-2724 DSMZ; ACC-220 |
培養(yǎng)基 | RPMI-1640+20% FBS+1%GlutaMAX-1谷氨酰胺+1%Sodium Pyruvate丙酮酸鈉+PS |
培養(yǎng)條件 | 氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃ |
凍存條件 | 無血清凍存液，液氮儲存 |
倍增時間 | ~48-72 hours |
STR鑒定位點 | Amelogenin：X，Y；D5S818: 9,11；D13S317: 11,13；D7S820: 8,11；D16S539: 9,12；vWA: 14；THO1: 6,9；Amelogenin: X；TPOX: 8,9；CSF1PO: 10,12 |
二、細胞培養(yǎng)操作
1) 復(fù)蘇細胞：以下細胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。
將含有1 mL細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min，棄去上清液，加1-2 mL培養(yǎng)基后輕輕吹勻。然后將所有細胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤? cm皿中，加入約4 mL培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2) 細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心3-5min分鐘，棄去上清液，補加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1:2到1:4的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3) 細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為例；
a、收集細胞及細胞培養(yǎng)液，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進行細胞計數(shù)。
b、根據(jù)細胞數(shù)量加入無血清細胞凍存液，使細胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細胞懸液，注意凍存管做好標識。
c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
三、培養(yǎng)注意事項
1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象 發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。
2. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關(guān)信息，如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需 細胞因子等，確保細胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細胞出現(xiàn)問題，責任由 客戶自行承擔。
3. 用 75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題，部分細胞由于溫度 變化及劇烈碰撞死亡破碎形成碎片，是正常現(xiàn)象。觀察好細胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置 2-4h。
4. 貼壁細胞可以消化，懸浮細胞直接混勻收集細胞，900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細胞，再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，，用新鮮的完全培養(yǎng)基重懸 細胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。
5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。
6. 建議客戶收到細胞后前 3 天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和我司技術(shù)部溝通 交流。由于運輸?shù)脑颍瑐€別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系，告知細胞 的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。
7. 該細胞僅供科研使用。
8. 備注：運輸用的培養(yǎng)基 (灌液培養(yǎng)基) 不能再用來培養(yǎng)細胞，請換用按照說明書細胞培 養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。 收到細胞后第一次傳代建議 1：2 傳代 。
9. 注意： 1:2 傳代就是 1 個 T25 瓶傳 2 個 T25 瓶或者 2 個 6cm 皿。不是 1 個 T25 瓶傳 2 個10cm 皿。
關(guān)鍵字： KASUMI-1;人紅白血病細胞;Kasumi 1細胞;KASUMI1細胞;Kasumi1細胞;
上海聯(lián)邁生物工程有限公司（LMAIBio)是一家經(jīng)營生物、儀器、試劑、耗材等科研產(chǎn)品的研發(fā)以及銷售一體的高科技生物公司，公司的服務(wù)和業(yè)務(wù)網(wǎng)絡(luò)遍及全國，在同行獲得一致好評。特別是生物試劑和細胞產(chǎn)品更是種類齊全、價格實惠，美國原裝進口原代細胞，專業(yè)培養(yǎng)基，常用傳統(tǒng)培養(yǎng)基，細胞培養(yǎng)用的相關(guān)試劑，氨基酸，抗生素，維他命類產(chǎn)品品種齊全，試劑耗材種類繁多。公司的規(guī)模和產(chǎn)品種類日益擴大和更新，我們一直秉承著代理良好的品牌產(chǎn)品，服務(wù)好每一位顧客，將好的科學技術(shù)和方法推薦顧客的服務(wù)宗旨為廣大客戶提供各類服務(wù)，產(chǎn)品、技術(shù)咨詢。聯(lián)邁生物（LMAIBio)不僅為客戶提供“高質(zhì)量的產(chǎn)品”，同時也提供“良好的
服務(wù)”，公司擁有一批基礎(chǔ)知識扎實、產(chǎn)品知識豐富的銷售人員，以及在生命科學領(lǐng)域經(jīng)驗豐富并且十分專業(yè)的技術(shù)支持團隊，隨時為客戶提供技術(shù)咨詢和售后服務(wù)。主營產(chǎn)品/服務(wù)：試劑盒：ELISA試劑盒、免疫組化試劑盒、分子生物學試劑盒、細胞凋亡試劑盒。細胞培養(yǎng)：血清，專業(yè)培養(yǎng)基，常用傳統(tǒng)培養(yǎng)基。耗材：進口、國產(chǎn)細胞培養(yǎng)耗材、普通實驗耗材。生化試劑：原裝進口生化試劑、國產(chǎn)生化試劑?？贵w：進口原裝抗體、單克隆抗體、多克隆抗體、一抗、二抗等等。蛋白/抗原：重組蛋白，多肽合成，天然蛋白，細胞因子。