大鼠AXL受體酪氨酸激酶(AXL)ELISA試劑盒
產品簡介:
英文名稱 | Rat AXL ELISA Kit | 產品類別 | Rat/大鼠Elisa試劑盒 |
貨號 | A116896 | 規(guī)格 | 48T/96T |
靈敏度 | 1.2ng/mL | 檢測范圍 | 2.4ng/mL-150ng/mL |
檢測目標
特異性定量檢測大鼠血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清或組織勻漿中的 AXL受體酪氨酸激酶（一種與細胞增殖、遷移、免疫調節(jié)和腫瘤進展相關的關鍵蛋白）。
檢測原理
雙抗體夾心ELISA法：
預包被抗大鼠AXL抗體捕獲樣本中的AXL；
生物素標記的二抗與AXL結合；
HRP-鏈霉親和素系統(tǒng)催化TMB顯色，OD值（450nm）與AXL濃度正相關。
二、核心組分與規(guī)格（以主流品牌為例）
組分 說明
預包被96孔微孔板 抗大鼠AXL單克隆/多克隆抗體
重組大鼠AXL標準品 濃度梯度（通常0-1000 pg/mL）
生物素化檢測抗體 高特異性，避免交叉反應
HRP-鏈霉親和素濃縮液 信號放大系統(tǒng)
TMB顯色底物 & 終止液 終止后黃色，450nm讀數
樣本稀釋液 & 洗滌液 優(yōu)化緩沖體系，減少非特異性結合
三、技術特點與優(yōu)勢
高靈敏度
最低檢測限可達 5-10 pg/mL，適合低豐度AXL檢測（如早期腫瘤或炎癥模型）。
高特異性
經交叉實驗驗證，不與大鼠Tyro3、MerTK等其他TAM家族受體交叉反應。
寬動態(tài)范圍
標準曲線范圍通常為 31.2-2000 pg/mL，覆蓋生理和病理濃度。
重復性好
板內和板間變異系數（CV）＜10%，數據可靠性高。
四、典型應用場景
腫瘤研究
AXL在腫瘤轉移、耐藥性（如肺癌、乳腺癌）中的作用機制分析。
免疫與炎癥
膿毒癥、自身免疫性疾病中AXL對巨噬細胞極化的調控。
藥物開發(fā)
AXL抑制劑或靶向療法的藥效評價（如Bemcentinib類似物）。
五、操作關鍵注意事項
樣本處理
血清/血漿：建議使用肝素抗凝，避免反復凍融（≤3次）；
組織樣本：需加入蛋白酶抑制劑，勻漿后離心（10,000×g, 10min）取上清。
標準曲線擬合
推薦使用四參數邏輯（4-PL）曲線擬合，尤其適用于寬濃度范圍。
干擾因素控制
高脂血癥樣本可能干擾檢測，需稀釋后復測。
七、常見問題與解決方案
背景值高：延長洗滌時間（建議每孔300μL洗滌液，洗5次）。
標準曲線異常：檢查標準品稀釋是否準確，避免孔間污染。
樣本濃度超出范圍：稀釋后復測，確保落在標準曲線線性區(qū)間內。
如何驗證試劑盒的特異性？（實操建議）：
稀釋線性實驗 (Linearity)：
操作： 將高濃度的陽性樣本用稀釋液進行梯度稀釋（如1:2, 1:4, 1:8...）。
預期： 測得的濃度值與稀釋倍數應呈良好的線性關系（相關系數 R2 ≥ 0.98）。如果線性不好，說明樣本基質中有干擾物影響了特異性結合。
干擾實驗 (Interference Test)：
操作： 在已知濃度的目標抗原溶液中，加入高濃度的潛在干擾物（如高濃度的脂質或結構類似物），檢測其對結果的影響。
預期： 若檢測值與理論值偏差在±10%以內，說明抗干擾能力強，特異性好。
回收實驗 (Recovery Test)：
操作： 在樣本中加入已知量的標準品，檢測總含量，計算回收率。
預期： 回收率在80%-120%之間，說明試劑盒能準確識別目標，不受樣本背景干擾。
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注意事項
試劑盒組分應按說明儲存，使用前平衡至室溫。
實驗中需避免交叉污染，建議使用一次性吸頭。
充分混勻對實驗結果至關重要。
試劑盒僅供研究使用，不可用于臨床診斷。
關鍵字： 大鼠AXL受體酪氨酸激酶 ;AXL;ELISA試劑盒;
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