彎曲桿菌染料法熒光定量PCR試劑盒
商品屬性
產品名稱
英文名稱
Campylobacter spp. Dye-based qPCR Kit
規(guī)格
50T
貨號
PR3840
預期用途
本試劑盒用于體外定性檢測臨床樣本(如糞便、食品樣本等)中的彎曲桿菌(Campylobacter spp.)核酸，適用于臨床輔助診斷、食品安全檢測等領域。
檢驗原理
本試劑盒采用TaqMan熒光探針技術，針對彎曲桿菌特異性基因序列設計引物和探針。PCR擴增過程中，Taq酶5'→3'外切酶活性將探針水解，使報告基團與淬滅基團分離產生熒光信號，通過實時監(jiān)測熒光信號變化實現(xiàn)對靶基因的定量檢測。
主要組成成分
PCR反應液(含dNTPs、Mg2?、緩沖液等)
熱啟動Taq DNA聚合酶
彎曲桿菌特異性引物探針混合液
陽性對照(彎曲桿菌DNA)
陰性對照(無核酸酶水)
ROX參比染料(部分機型需要)
儲存條件及有效期
-20℃避光保存，避免反復凍融，有效期12個月。
適用儀器
ABI 7500、Bio-Rad CFX96、Roche LightCycler 480等常見實時熒光定量PCR儀。
樣本要求
糞便樣本：取新鮮糞便約1g，加入適量PBS緩沖液混勻后離心取上清
食品樣本：25g樣品加入225mL緩沖蛋白胨水均質后增菌培養(yǎng)
DNA提取建議使用商品化核酸提取試劑盒
檢驗方法
反應體系配制(20μL)：
PCR反應液 10μL
酶混合液 2μL
引物探針混合液 3μL
模板DNA 5μL
PCR反應程序：
預變性：95℃ 5min
擴增：95℃ 15sec → 60℃ 1min，45個循環(huán)
結果判讀
Ct值≤35且擴增曲線呈S型：陽性
Ct值>35或無擴增曲線：陰性
陽性對照Ct值應在20-30之間，陰性對照無擴增
性能指標
靈敏度：≤100拷貝/反應
特異性：不與沙門氏菌、志賀氏菌、大腸桿菌等常見腸道菌交叉反應
重復性：CV≤5%
注意事項
本試劑僅用于體外診斷
實驗分區(qū)操作，避免污染
廢棄物需按生物危險品處理
不同批次試劑組分不可混用
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