大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶12(MMP-12)ELISA試劑盒
產(chǎn)品簡介:
大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶12(MMP-12)ELISA試劑盒是專為體外定量檢測大鼠血清、血漿、組織勻漿、細胞上清等樣本中MMP-12濃度設計的科研工具,廣泛應用于炎癥、腫瘤、心血管疾病和組織重塑等相關(guān)疾病機制研究。
英文名稱 | Rat MMP-12 ELISA Kit | 產(chǎn)品類別 | Rat/大鼠Elisa試劑盒 |
貨號 | A116452 | 規(guī)格 | 48T/96T |
靈敏度 | 78.125pg/mL | 檢測范圍 | 156.25pg/mL-5000pg/mL |
檢測原理
試劑盒采用雙抗體夾心法ELISA原理:
預包被抗大鼠MMP-12特異性抗體,樣本中MMP-12與抗體結(jié)合;
加入酶標檢測抗體,形成抗體-抗原-抗體復合物;
經(jīng)洗滌后,加入底物(如TMB),酶催化產(chǎn)生顏色;
顏色深淺與樣本中MMP-12濃度正相關(guān),通過酶標儀在450nm波長測定OD值,計算濃度。

主要參數(shù)
檢測范圍:常見為78.13-5000 pg/mL,靈敏度可達46.88 pg/mL以下
樣本類型:血清、血漿(EDTA/檸檬酸鈉)、組織勻漿、細胞培養(yǎng)上清等
種屬反應性:特異性針對大鼠,部分試劑盒也適用于人、小鼠等物種MMP-12檢測
精密度:批內(nèi)和批間變異系數(shù)通常<10%-12%,確保數(shù)據(jù)準確性
保存條件:2-8℃冷藏保存,避免反復凍融,有效期一般為6個月
操作流程(簡要)
平衡試劑盒與樣本至室溫
加入標準品和待測樣本,37℃溫育1-2小時
洗滌酶標板去除未結(jié)合物質(zhì)
加酶標檢測抗體,37℃溫育30-60分鐘
洗滌后加入顯色液,避光反應10-15分鐘
加終止液,酶標儀450nm讀數(shù),依據(jù)標準曲線計算濃度
注意事項
樣本避免反復凍融,血漿推薦使用EDTA或檸檬酸鈉抗凝
試劑盒僅供科研使用,不用于臨床診斷
不同批號試劑不可混用,加樣前需搖勻
洗滌過程需充分,避免交叉污染
TMB顯色底物需避光保存,現(xiàn)配現(xiàn)用
如何驗證試劑盒的特異性?(實操建議):
稀釋線性實驗 (Linearity):
操作: 將高濃度的陽性樣本用稀釋液進行梯度稀釋(如1:2, 1:4, 1:8...)。
預期: 測得的濃度值與稀釋倍數(shù)應呈良好的線性關(guān)系(相關(guān)系數(shù) R2 ≥ 0.98)。如果線性不好,說明樣本基質(zhì)中有干擾物影響了特異性結(jié)合。
干擾實驗 (Interference Test):
操作: 在已知濃度的目標抗原溶液中,加入高濃度的潛在干擾物(如高濃度的脂質(zhì)或結(jié)構(gòu)類似物),檢測其對結(jié)果的影響。
預期: 若檢測值與理論值偏差在±10%以內(nèi),說明抗干擾能力強,特異性好。
回收實驗 (Recovery Test):
操作: 在樣本中加入已知量的標準品,檢測總含量,計算回收率。
預期: 回收率在80%-120%之間,說明試劑盒能準確識別目標,不受樣本背景干擾。
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注意事項
試劑盒組分應按說明儲存,使用前平衡至室溫。
實驗中需避免交叉污染,建議使用一次性吸頭。
充分混勻?qū)嶒灲Y(jié)果至關(guān)重要。
試劑盒僅供研究使用,不可用于臨床診斷。
關(guān)鍵字: 大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶12 ;MMP-12;ELISA試劑盒;
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