重組表達原理:
基因克隆?:從?;蚪M中獲取CST3基因的編碼序列(對應(yīng)氨基酸31–148),插入含有啟動子、篩選標(biāo)記和His標(biāo)簽序列的質(zhì)粒載體。
宿主表達?:將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化至E. coli(如BL21菌株),在IPTG誘導(dǎo)下啟動蛋白表達。該系統(tǒng)成本低、表達效率高,適合大規(guī)模生產(chǎn)。
蛋白純化?:利用His標(biāo)簽與鎳柱親和層析結(jié)合,實現(xiàn)高純度(>95%)蛋白回收,再經(jīng)透析或凝膠過濾去除雜質(zhì)。
凍干保存?:加入海藻糖作為保護劑,凍干后可長期穩(wěn)定儲存,復(fù)溶后保持天然構(gòu)象和生物活性。
產(chǎn)品概述:
Recombinant Human ECHS1(重組人短鏈烯酰輔酶A水合酶1)是一種通過基因重組技術(shù)在體外表達和純化的關(guān)鍵代謝酶。該蛋白在脂肪酸β-氧化和支鏈氨基酸代謝中扮演核心角色,其功能異常與多種嚴重的遺傳性代謝疾病密切相關(guān)。
產(chǎn)品名稱; Recombinant Human ECHS1
別名; C80529, EC 4.2.1.17, ECHS 1, Enoyl CoA hydratase 1, Enoyl CoA hydratase mitochondrial, Enoyl CoA hydratase short chain 1 mitochondrial, Enoyl Coenzyme A hydratase short chain 1, Enoyl Coenzyme A hydratase short chain 1 mitochondrial, Mitochondrial short chain enoyl coenzyme A hydratase 1, OTTHUMP00000020811, SCEH, Short chain enoyl CoA hydratase
宿主; E.Coli
表達區(qū)間; 28-290
分子量; 49.0 kDa
標(biāo)簽; N-terminal His-IF2DI Tag
純度; Greater than 90% by SDS-PAGE gel analyses
應(yīng)用; Western Blot, ELISA
性狀; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存儲; The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.
使用前準(zhǔn)備:
離心處理?
凍干粉在運輸過程中可能附著于管壁或管蓋,開蓋前應(yīng)先進行離心,確保粉末沉降至管底。
建議條件:3000–3500 rpm 離心 5 分鐘
若無高速離心機,可適當(dāng)延長低速離心時間
平衡溫度?
將凍干粉緩慢恢復(fù)至室溫(避免加熱加速溶解),防止因溫差導(dǎo)致管內(nèi)冷凝水影響蛋白穩(wěn)定性
溶解(Reconstitution)
溶解液選擇?
推薦使用無菌蒸餾水或 PBS(pH 7.4)進行復(fù)溶
若用于細胞實驗,可選用含 0.1% BSA 的緩沖液以增強穩(wěn)定性
配制濃度?
將凍干粉溶解至終濃度 ?0.1–1.0 mg/mL?,此范圍適用于大多數(shù)實驗場景
濃度過高可能導(dǎo)致蛋白聚集,過低則易失活
混勻方式?
使用移液槍頭輕輕吹打數(shù)次,或上下輕柔顛倒混勻
嚴禁使用渦旋振蕩器?,以免破壞蛋白空間結(jié)構(gòu),導(dǎo)致活性喪失
公司正在出售的產(chǎn)品:
脫碘酶2 | 組織糖類總量鐵氰化物比色法定量酶聯(lián)免疫試劑盒 |
磷酸化14-3-3 β/ζ | 冰凍切片制片處理OCT包埋液 |
細胞可溶性膜蛋白(純提)制備試劑盒 | 載玻片細胞PARP蛋白表達NBT顯色光學(xué)顯微鏡酶聯(lián)免疫試劑盒 |
組織沉默調(diào)節(jié)蛋白1(SIRT1)活性熒光定量pcr檢測試劑盒 | 冰凍切片神經(jīng)組織固藍(FAST BLUE)染色試劑盒 |
水中腸球菌(Enterococci)熒光定量pcr檢測試劑盒 | α輔助因子44抗體 |
感光視覺蛋白ECPN | KIAA0240蛋白抗體 |
細胞CASPASE-7蛋白表達流式細胞儀pcr檢測試劑盒 | 細胞基質(zhì)金屬(MMP-12)活性熒光定量pcr檢測試劑盒 |
組織賴(lysine)含量化學(xué)比色法定量pcr檢測試劑盒 | 血影細胞(GHOST)制備試劑盒 |
轉(zhuǎn)移生長因子誘導(dǎo)核蛋白1 | FAM78B蛋白抗體 |
脊髓小腦性共濟失調(diào)蛋白3 | 鈉鈣交換蛋白2抗體 |
PTCD1蛋白 | 電壓依賴性鈣通道Cav1.1抗體 |
細菌菌落直接PCR檢測法 | Recombinant Human ECHS1原癌基因AF4蛋白抗體 |
AF750標(biāo)記的細胞色素c氧化酶IV亞型1單克隆抗體 | 9號染色體開放閱讀框91抗體 |
注意事項:
安全提示:僅限研究使用,避免接觸臨床樣本;操作時需佩戴防護裝備。
質(zhì)量控制:產(chǎn)品純度通過SDS-PAGE驗證,確保生物活性穩(wěn)定;避免使用含硫柳汞等有毒物質(zhì)的試劑。
兼容性:適用于多種實驗體系,但需優(yōu)化濃度以避免非特異性結(jié)合。
關(guān)鍵字: ECHS1;49.0 kDa; 28-290;
上海西格生物有限公司于2019年6月18日成立。
西格生物專注于實驗室和公共衛(wèi)生領(lǐng)域,利用互聯(lián)網(wǎng)、數(shù)據(jù)分析及自動化技術(shù),包括實驗室固定資產(chǎn)、儀器設(shè)備、生物樣本、化學(xué)品、試劑、配件耗材、環(huán)境、儀器自動化和高通量篩選等一體化綜合管理平臺。不斷為各行業(yè)實驗室細胞生命學(xué)產(chǎn)品、技術(shù)服務(wù)、免疫學(xué)和分子學(xué)產(chǎn)品,截止至2024年5月,西格生物已為生命科學(xué)、檢驗檢測、化工材料、科研院所、政府機構(gòu)多行業(yè)300余家知名客戶提供實驗室完整解決方案。本著幫助用戶實現(xiàn)“讓科研場所更智能、讓科研人員更專注、讓科學(xué)服務(wù)更高效“的愿景,西格生物將繼續(xù)在實驗室科研產(chǎn)品領(lǐng)域持續(xù)發(fā)力,更加重視本土化,建構(gòu)通用性高、適應(yīng)性好、模塊搭配靈活,能快速響應(yīng)客戶需求的產(chǎn)品。