重組表達原理:
基因克隆?:從牛基因組中獲取CST3基因的編碼序列(對應氨基酸31–148),插入含有啟動子、篩選標記和His標簽序列的質(zhì)粒載體。
宿主表達?:將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化至E. coli(如BL21菌株),在IPTG誘導下啟動蛋白表達。該系統(tǒng)成本低、表達效率高,適合大規(guī)模生產(chǎn)。
蛋白純化?:利用His標簽與鎳柱親和層析結(jié)合,實現(xiàn)高純度(>95%)蛋白回收,再經(jīng)透析或凝膠過濾去除雜質(zhì)。
凍干保存?:加入海藻糖作為保護劑,凍干后可長期穩(wěn)定儲存,復溶后保持天然構(gòu)象和生物活性。
產(chǎn)品概述:
人源重組ECSIT蛋白(Recombinant Human ECSIT)是一種在免疫信號轉(zhuǎn)導、線粒體代謝及腫瘤發(fā)生發(fā)展中具有關鍵調(diào)控作用的重組蛋白。它對應于人體內(nèi)的 ECSIT 基因(Evolutionarily Conserved Signaling Intermediate in Toll pathways)所編碼的蛋白質(zhì)。
產(chǎn)品名稱; Recombinant Human ECSIT
別名; Ecsit, ECSIT homolog, ECSIT protein, ECSIT_HUMAN, Evolutionarily conserved signaling intermediate in Toll pathway, mitochondrial, Evolutionarily conserved signaling intermediate in Toll pathways, Likely ortholog of mouse signaling intermediate in Toll pathway evolutionarily conserved, Protein SITPEC, Signaling intermediate in Toll pathway evolutionarily conserved, SITPEC, SITPEC protein
宿主; E.Coli
表達區(qū)間; 19-217
分子量; 21.8 kDa
標簽; N-terminal His Tag
純度; Greater than 95% as determined by SDS-PAGE
應用; Western Blot, ELISA
性狀; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存儲; The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.
使用前準備:
離心處理?
凍干粉在運輸過程中可能附著于管壁或管蓋,開蓋前應先進行離心,確保粉末沉降至管底。
建議條件:3000–3500 rpm 離心 5 分鐘
若無高速離心機,可適當延長低速離心時間
平衡溫度?
將凍干粉緩慢恢復至室溫(避免加熱加速溶解),防止因溫差導致管內(nèi)冷凝水影響蛋白穩(wěn)定性
溶解(Reconstitution)
溶解液選擇?
推薦使用無菌蒸餾水或 PBS(pH 7.4)進行復溶
若用于細胞實驗,可選用含 0.1% BSA 的緩沖液以增強穩(wěn)定性
配制濃度?
將凍干粉溶解至終濃度 ?0.1–1.0 mg/mL?,此范圍適用于大多數(shù)實驗場景
濃度過高可能導致蛋白聚集,過低則易失活
混勻方式?
使用移液槍頭輕輕吹打數(shù)次,或上下輕柔顛倒混勻
嚴禁使用渦旋振蕩器?,以免破壞蛋白空間結(jié)構(gòu),導致活性喪失
公司正在出售的產(chǎn)品:
同源盒蛋白PKNOX1 | 染色試劑盒 |
FITC標記小鼠CD47單克隆 | 活化蛋白C(APC)活性熒光定量酶聯(lián)免疫試劑盒 |
飲料D-葡萄糖酸鹽比色法定量pcr檢測試劑盒 | 冰凍切片組織EGFR 蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡酶聯(lián)免疫試劑盒 |
組織ERK1/2激酶活性定量pcr檢測試劑盒(A/B/C) | 半胱-7(CASPASE-7) |
細胞GSK3α激酶活性定量pcr檢測試劑盒(A/B/C) | 末端多聚腺苷酸2蛋白抗體 |
含錨蛋白重復序列-細胞因子信號抑制物盒蛋白家族7 | 蛋白質(zhì)酪氨酸激酶JAK2抗體 |
細胞P27蛋白表達流式細胞儀pcr檢測試劑盒 | 細胞GSK3α激酶活性定量pcr檢測試劑盒(A/B/C) |
組織可溶性總核蛋白制備試劑盒 | 血液亞硝酸鹽含量熒光定量pcr檢測試劑盒 |
轉(zhuǎn)錄因子ELF1 | EGF蛋白樣3抗體 |
己糖激酶結(jié)構(gòu)域蛋白1 | 磷脂酰肌醇-5-磷酸鹽-4激酶2型β抗體 |
RNA結(jié)合蛋白38 | 蛋氨酸亞砜還原酶B3抗體 |
細菌茁糖酵解溴百里酚藍(BTB)瓊脂平板 | Recombinant Human ECSIT血小板源性生長因子受體A/PDGFRα抗體 |
環(huán)指蛋白210抗體 | 2號染色體開放閱讀框55抗體 |
注意事項:
安全提示:僅限研究使用,避免接觸臨床樣本;操作時需佩戴防護裝備。
質(zhì)量控制:產(chǎn)品純度通過SDS-PAGE驗證,確保生物活性穩(wěn)定;避免使用含硫柳汞等有毒物質(zhì)的試劑。
兼容性:適用于多種實驗體系,但需優(yōu)化濃度以避免非特異性結(jié)合。
關鍵字: ECSIT;21.8 kDa; 19-217;
上海西格生物有限公司于2019年6月18日成立。
西格生物專注于實驗室和公共衛(wèi)生領域,利用互聯(lián)網(wǎng)、數(shù)據(jù)分析及自動化技術,包括實驗室固定資產(chǎn)、儀器設備、生物樣本、化學品、試劑、配件耗材、環(huán)境、儀器自動化和高通量篩選等一體化綜合管理平臺。不斷為各行業(yè)實驗室細胞生命學產(chǎn)品、技術服務、免疫學和分子學產(chǎn)品,截止至2024年5月,西格生物已為生命科學、檢驗檢測、化工材料、科研院所、政府機構(gòu)多行業(yè)300余家知名客戶提供實驗室完整解決方案。本著幫助用戶實現(xiàn)“讓科研場所更智能、讓科研人員更專注、讓科學服務更高效“的愿景,西格生物將繼續(xù)在實驗室科研產(chǎn)品領域持續(xù)發(fā)力,更加重視本土化,建構(gòu)通用性高、適應性好、模塊搭配靈活,能快速響應客戶需求的產(chǎn)品。