操作要點：
電泳條件?：使用15% SDS-PAGE凝膠，以提高對小分子量蛋白（~13.4 kDa）的分辨率。
?轉(zhuǎn)膜參數(shù)?：采用濕轉(zhuǎn)法，100 V、60–90分鐘（4°C），使用PVDF膜（需甲醇預(yù)活化）。
?抗體選擇?：
一抗：抗CST3多克隆抗體（如兔源抗體），推薦稀釋比為1:1000。
二抗：HRP標(biāo)記的山羊抗兔IgG，稀釋比1:10,000。
?顯色方式?：ECL化學(xué)發(fā)光法，預(yù)期條帶位于?~13.4 kDa?處。
?內(nèi)參建議?：由于CST3分子量較小，可選用GAPDH（~37 kDa）或β-actin（~42 kDa）作為內(nèi)參，避免條帶重疊。
產(chǎn)品概述：
Recombinant Human EIF2AK1（真核翻譯起始因子2-α激酶1），也稱為HRI（血紅素調(diào)節(jié)抑制因子），是一種通過基因重組技術(shù)在體外表達和純化的關(guān)鍵應(yīng)激感應(yīng)蛋白激酶。該蛋白作為細胞內(nèi)血紅素水平的“傳感器”，在調(diào)控蛋白質(zhì)合成、應(yīng)對環(huán)境應(yīng)激及紅細胞生成中扮演著核心角色。
產(chǎn)品名稱; Recombinant Human EIF2AK1
別名; HCR; HRI; KIAA1369
宿主; E.Coli
表達區(qū)間; 1-194
分子量; 42.4 KDa
標(biāo)簽; N-terminal His-IF2DI Tag
純度; Greater than 95% as determined by SDS-PAGE
應(yīng)用; Western Blot, ELISA
性狀; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存儲; The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.
使用說明：
復(fù)溶方法?: 使用無菌蒸餾水或PBS緩沖液（pH 7.4）溶解凍干粉，輕輕混勻至完全溶解。
?應(yīng)用建議?:
?實驗用途?: 適用于Western Blot、ELISA等檢測，作為抗原或標(biāo)準(zhǔn)品。
?濃度調(diào)整?: 根據(jù)實驗需求稀釋，避免高濃度導(dǎo)致非特異性結(jié)合。
?安全提示?: 操作時需佩戴手套和護目鏡，遵循實驗室生物安全規(guī)范。
重組表達原理：
基因克隆?：從?；蚪M中獲取CST3基因的編碼序列（對應(yīng)氨基酸31–148），插入含有啟動子、篩選標(biāo)記和His標(biāo)簽序列的質(zhì)粒載體。
?宿主表達?：將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化至E. coli（如BL21菌株），在IPTG誘導(dǎo)下啟動蛋白表達。該系統(tǒng)成本低、表達效率高，適合大規(guī)模生產(chǎn)。
?蛋白純化?：利用His標(biāo)簽與鎳柱親和層析結(jié)合，實現(xiàn)高純度（>95%）蛋白回收，再經(jīng)透析或凝膠過濾去除雜質(zhì)。
?凍干保存?：加入海藻糖作為保護劑，凍干后可長期穩(wěn)定儲存，復(fù)溶后保持天然構(gòu)象和生物活性。
公司正在出售的產(chǎn)品：
同源三聚體鋅指蛋白ZHX3 | 細胞花生四烯酸（arachidonic acid）高效液相色譜法定量酶聯(lián)免疫試劑盒 |
磷酸化MDM2樣P53結(jié)合蛋白 | 組織高密度脂蛋白（HDL-Cholesterol）酶連續(xù)循環(huán)比色法定量酶聯(lián)免疫試劑盒 |
免疫組化AP－BCIP/NBT底物顯色試劑盒 | CDK4蛋白表達ELISA定量酶聯(lián)免疫試劑盒 |
動物組織總ATP酶（total ATPase）活性比色法定量pcr檢測試劑盒 | 石蠟切片磷脂尼羅紅（Nile Red）直接熒光染色試劑盒 |
動物細胞N-乙酰轉(zhuǎn)移酶1（NAT1）活性比色法定量pcr檢測試劑盒 | γ谷氨酰半胱氨酸合成酶抗體 |
高分子量激肽原輕鏈 | JDP2蛋白抗體 |
冰凍切片組織GSK-3BETA蛋白表達熒光顯微鏡pcr檢測試劑盒 | 組織SRCN2激酶活性定量pcr檢測試劑盒（A/B/C） |
組織半胱（cysteine）含量高效液相色譜法定量pcr檢測試劑盒 | 真菌/酵母細胞線粒體可溶性總蛋白制備試劑盒 |
轉(zhuǎn)錄因子HELT蛋白 | FAM149B1蛋白抗體 |
甲狀腺受體相互作用蛋白6 | 莫洛尼白血病病毒10樣蛋白1抗體 |
PSPC1蛋白 | 電壓門控性鉀通道蛋白亞基kv6.1抗體 |
組織HPV6（HUMAN PAPILLOMAVIRUS-6）病毒定性pcr檢測試劑盒 | Recombinant Human EIF2AK1異質(zhì)核核糖核蛋白R抗體 |
AF680標(biāo)記的整合素αVβ5抗體 | APC標(biāo)記小鼠CD107a單克隆抗體 |
重組蛋白生產(chǎn)流程：
通常包括以下幾個核心步驟：
基因克隆：首先，科學(xué)家需要獲取編碼目標(biāo)蛋白的特定基因序列（目的基因）。
構(gòu)建載體：將目的基因插入到一個被稱為“載體”的DNA分子中，這個載體就像是一個運輸工具，
能將目的基因送入宿主細胞并指導(dǎo)其表達。
轉(zhuǎn)入宿主：將構(gòu)建好的重組載體導(dǎo)入選定的宿主細胞中，這個過程稱為“轉(zhuǎn)化”或“轉(zhuǎn)染”。
表達與培養(yǎng)：宿主細胞在適宜的條件下進行大規(guī)模培養(yǎng)，其自身的遺傳系統(tǒng)會讀取重組載體上的基因信息，開始大量生產(chǎn)目標(biāo)蛋白。
純化：通過一系列復(fù)雜的生物化學(xué)方法（如層析技術(shù)），將目標(biāo)重組蛋白從宿主細胞的眾多混合物中分離出來，以獲得高純度的產(chǎn)品。
關(guān)鍵字： EIF2AK1;42.4 KDa; 1-194;
上海西格生物有限公司于2019年6月18日成立。
西格生物專注于實驗室和公共衛(wèi)生領(lǐng)域，利用互聯(lián)網(wǎng)、數(shù)據(jù)分析及自動化技術(shù)，包括實驗室固定資產(chǎn)、儀器設(shè)備、生物樣本、化學(xué)品、試劑、配件耗材、環(huán)境、儀器自動化和高通量篩選等一體化綜合管理平臺。不斷為各行業(yè)實驗室細胞生命學(xué)產(chǎn)品、技術(shù)服務(wù)、免疫學(xué)和分子學(xué)產(chǎn)品，截止至2024年5月，西格生物已為生命科學(xué)、檢驗檢測、化工材料、科研院所、政府機構(gòu)多行業(yè)300余家知名客戶提供實驗室完整解決方案。本著幫助用戶實現(xiàn)“讓科研場所更智能、讓科研人員更專注、讓科學(xué)服務(wù)更高效“的愿景，西格生物將繼續(xù)在實驗室科研產(chǎn)品領(lǐng)域持續(xù)發(fā)力，更加重視本土化，建構(gòu)通用性高、適應(yīng)性好、模塊搭配靈活，能快速響應(yīng)客戶需求的產(chǎn)品。