重組表達(dá)原理:
基因克隆?:從牛基因組中獲取CST3基因的編碼序列(對應(yīng)氨基酸31–148),插入含有啟動子、篩選標(biāo)記和His標(biāo)簽序列的質(zhì)粒載體。
宿主表達(dá)?:將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化至E. coli(如BL21菌株),在IPTG誘導(dǎo)下啟動蛋白表達(dá)。該系統(tǒng)成本低、表達(dá)效率高,適合大規(guī)模生產(chǎn)。
蛋白純化?:利用His標(biāo)簽與鎳柱親和層析結(jié)合,實(shí)現(xiàn)高純度(>95%)蛋白回收,再經(jīng)透析或凝膠過濾去除雜質(zhì)。
凍干保存?:加入海藻糖作為保護(hù)劑,凍干后可長期穩(wěn)定儲存,復(fù)溶后保持天然構(gòu)象和生物活性。
產(chǎn)品概述:
Recombinant Human EMG1(重組人核仁蛋白EMG1)是一種通過基因重組技術(shù)在體外表達(dá)和純化的關(guān)鍵核糖體生物合成因子。該蛋白在核糖體小亞基的組裝和rRNA修飾中發(fā)揮核心作用,其功能異常與一種嚴(yán)重的遺傳性疾病——鮑文-康拉迪綜合征(Bowen-Conradi Syndrome)密切相關(guān)。
產(chǎn)品名稱; Recombinant Human EMG1
別名; 18S rRNA (pseudouridine(1248)-N1)-methyltransferase, 18S rRNA Psi1248 methyltransferase, C2F, C2f protein, EMG 1, EMG1, EMG1 N1 specific pseudouridine methyltransferase, EMG1 nucleolar protein homolog, EMG1 nucleolar protein homolog (S cerevisiae), essential for mitotic growth 1, FLJ60792, Grcc2f, NEP1, NEP1_HUMAN, Nucleolar protein EMG1 homolog, Protein C2f
宿主; E.Coli
表達(dá)區(qū)間; 2-244
分子量; 47.2 kDa
標(biāo)簽; N-terminal His-IF2DI Tag
純度; Greater than 95% as determined by SDS-PAGE
應(yīng)用; Western Blot, ELISA
性狀; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存儲; The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.
使用前準(zhǔn)備:
離心處理?
凍干粉在運(yùn)輸過程中可能附著于管壁或管蓋,開蓋前應(yīng)先進(jìn)行離心,確保粉末沉降至管底。
建議條件:3000–3500 rpm 離心 5 分鐘
若無高速離心機(jī),可適當(dāng)延長低速離心時(shí)間
平衡溫度?
將凍干粉緩慢恢復(fù)至室溫(避免加熱加速溶解),防止因溫差導(dǎo)致管內(nèi)冷凝水影響蛋白穩(wěn)定性
溶解(Reconstitution)
溶解液選擇?
推薦使用無菌蒸餾水或 PBS(pH 7.4)進(jìn)行復(fù)溶
若用于細(xì)胞實(shí)驗(yàn),可選用含 0.1% BSA 的緩沖液以增強(qiáng)穩(wěn)定性
配制濃度?
將凍干粉溶解至終濃度 ?0.1–1.0 mg/mL?,此范圍適用于大多數(shù)實(shí)驗(yàn)場景
濃度過高可能導(dǎo)致蛋白聚集,過低則易失活
混勻方式?
使用移液槍頭輕輕吹打數(shù)次,或上下輕柔顛倒混勻
嚴(yán)禁使用渦旋振蕩器?,以免破壞蛋白空間結(jié)構(gòu),導(dǎo)致活性喪失
公司正在出售的產(chǎn)品:
突觸富含脯氨酸膜蛋白7 | 細(xì)胞蘇木素伊紅染色試劑盒 |
FITC標(biāo)記小鼠CD38單克隆 | 冰凍切片組織AKT蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡酶聯(lián)免疫試劑盒 |
果菜D-葡萄糖激酶法定量pcr檢測試劑盒 | IP3R受體蛋白免疫共沉淀分析試劑盒 |
細(xì)胞人體腺病毒(adenovirus)定性pcr檢測試劑盒 | 咖啡糖精(saccharin)含量薄層色譜法定性酶聯(lián)免疫試劑盒 |
組織IKKβ激酶活性定量pcr檢測試劑盒(A/B/C) | 囊泡轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白SFT2B抗體 |
含亮氨酸神經(jīng)膠質(zhì)瘤失活蛋白4 | 蛋白質(zhì)二硫鍵異構(gòu)酶抗體 |
細(xì)胞/組織高爾基體粗提分離試劑盒 | 細(xì)胞/組織白蛋白載玻片制備試劑盒 |
組蛋白H3-S31磷酸化pcr檢測試劑盒 | 動物細(xì)胞鈉/鉀ATP酶(Na+/K+ -ATPase)活性比色法 |
自水解酶結(jié)構(gòu)域5蛋白 | 異質(zhì)性核糖核蛋白M抗體 |
甲狀腺激素反應(yīng)蛋白 | APC-Cy7標(biāo)記人/小鼠CD11b單克隆抗體 |
RNA結(jié)合蛋白23 | 連接粘附分子2抗體 |
AF680標(biāo)記的乳鐵蛋白 | Recombinant Human EMG1α-1抗胰糜蛋白酶/SERPINA3抗體 |
細(xì)菌異化型硝酸鹽還原酶活性比色法定量檢測試劑盒 | JNK/ SAPK抑制激酶抗體 |
注意事項(xiàng):
安全提示:僅限研究使用,避免接觸臨床樣本;操作時(shí)需佩戴防護(hù)裝備。
質(zhì)量控制:產(chǎn)品純度通過SDS-PAGE驗(yàn)證,確保生物活性穩(wěn)定;避免使用含硫柳汞等有毒物質(zhì)的試劑。
兼容性:適用于多種實(shí)驗(yàn)體系,但需優(yōu)化濃度以避免非特異性結(jié)合。
關(guān)鍵字: EMG1;47.2 kDa; 2-244;
上海西格生物有限公司于2019年6月18日成立。
西格生物專注于實(shí)驗(yàn)室和公共衛(wèi)生領(lǐng)域,利用互聯(lián)網(wǎng)、數(shù)據(jù)分析及自動化技術(shù),包括實(shí)驗(yàn)室固定資產(chǎn)、儀器設(shè)備、生物樣本、化學(xué)品、試劑、配件耗材、環(huán)境、儀器自動化和高通量篩選等一體化綜合管理平臺。不斷為各行業(yè)實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞生命學(xué)產(chǎn)品、技術(shù)服務(wù)、免疫學(xué)和分子學(xué)產(chǎn)品,截止至2024年5月,西格生物已為生命科學(xué)、檢驗(yàn)檢測、化工材料、科研院所、政府機(jī)構(gòu)多行業(yè)300余家知名客戶提供實(shí)驗(yàn)室完整解決方案。本著幫助用戶實(shí)現(xiàn)“讓科研場所更智能、讓科研人員更專注、讓科學(xué)服務(wù)更高效“的愿景,西格生物將繼續(xù)在實(shí)驗(yàn)室科研產(chǎn)品領(lǐng)域持續(xù)發(fā)力,更加重視本土化,建構(gòu)通用性高、適應(yīng)性好、模塊搭配靈活,能快速響應(yīng)客戶需求的產(chǎn)品。