重組表達(dá)原理:
基因克隆?:從?;蚪M中獲取CST3基因的編碼序列(對(duì)應(yīng)氨基酸31–148),插入含有啟動(dòng)子、篩選標(biāo)記和His標(biāo)簽序列的質(zhì)粒載體。
宿主表達(dá)?:將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化至E. coli(如BL21菌株),在IPTG誘導(dǎo)下啟動(dòng)蛋白表達(dá)。該系統(tǒng)成本低、表達(dá)效率高,適合大規(guī)模生產(chǎn)。
蛋白純化?:利用His標(biāo)簽與鎳柱親和層析結(jié)合,實(shí)現(xiàn)高純度(>95%)蛋白回收,再經(jīng)透析或凝膠過(guò)濾去除雜質(zhì)。
凍干保存?:加入海藻糖作為保護(hù)劑,凍干后可長(zhǎng)期穩(wěn)定儲(chǔ)存,復(fù)溶后保持天然構(gòu)象和生物活性。
產(chǎn)品概述:
人源重組叉頭框蛋白P3(Recombinant Human Forkhead box P3,簡(jiǎn)稱 rhFOXP3)是一種在免疫學(xué)、腫瘤學(xué)及自身免疫疾病研究中具有核心地位的重組蛋白。它對(duì)應(yīng)于人體內(nèi)的 FOXP3 基因所編碼的蛋白質(zhì),是調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(Treg)的“譜系特異性主控轉(zhuǎn)錄因子”。
產(chǎn)品名稱; Recombinant Human FOXP3
別名; AIID, DIETER, Forkhead box P3, Forkhead box protein P3, FOXP3, FOXP3_HUMAN, FOXP3delta7, Immune dysregulation polyendocrinopathy enteropathy X linked, Immunodeficiency polyendocrinopathy enteropathy X linked, IPEX, JM2, MGC141961, MGC141963, OTTHUMP00000025832, OTTHUMP00000025833, OTTHUMP00000226737, PIDX, Scurfin, XPID
宿主; E.Coli
表達(dá)區(qū)間; 2-249
分子量; 47 KDa
標(biāo)簽; N-terminal His-IF2DI Tag
純度; Greater than 95% by SDS-PAGE gel analyses
應(yīng)用; Western Blot, ELISA
性狀; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存儲(chǔ); The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.
使用前準(zhǔn)備:
離心處理?
凍干粉在運(yùn)輸過(guò)程中可能附著于管壁或管蓋,開(kāi)蓋前應(yīng)先進(jìn)行離心,確保粉末沉降至管底。
建議條件:3000–3500 rpm 離心 5 分鐘
若無(wú)高速離心機(jī),可適當(dāng)延長(zhǎng)低速離心時(shí)間
平衡溫度?
將凍干粉緩慢恢復(fù)至室溫(避免加熱加速溶解),防止因溫差導(dǎo)致管內(nèi)冷凝水影響蛋白穩(wěn)定性
溶解(Reconstitution)
溶解液選擇?
推薦使用無(wú)菌蒸餾水或 PBS(pH 7.4)進(jìn)行復(fù)溶
若用于細(xì)胞實(shí)驗(yàn),可選用含 0.1% BSA 的緩沖液以增強(qiáng)穩(wěn)定性
配制濃度?
將凍干粉溶解至終濃度 ?0.1–1.0 mg/mL?,此范圍適用于大多數(shù)實(shí)驗(yàn)場(chǎng)景
濃度過(guò)高可能導(dǎo)致蛋白聚集,過(guò)低則易失活
混勻方式?
使用移液槍頭輕輕吹打數(shù)次,或上下輕柔顛倒混勻
嚴(yán)禁使用渦旋振蕩器?,以免破壞蛋白空間結(jié)構(gòu),導(dǎo)致活性喪失
公司正在出售的產(chǎn)品:
絲氨酸/蘇氨酸蛋白磷酸酶1調(diào)節(jié)亞基10 | 非同位素HRP-DAB顯色法DNA斑點(diǎn)雜交試劑盒 |
DMRTA2蛋白 | 冰凍切片組織INSULIN R-ALPHA 蛋白表達(dá)熒光顯微鏡酶聯(lián)免疫試劑盒 |
植物源性食品腰果(cashew)基因pcr檢測(cè)試劑盒 | 細(xì)胞P38蛋白表達(dá)熒光定量酶聯(lián)免疫試劑盒 |
羥脯(HYP)含量高效液相色譜定量pcr檢測(cè)試劑盒 | 30%ACRYLAMIDE-BIS(19:1)溶液 |
細(xì)菌鈉/鉀ATP酶(Na+/K+ -ATPase)活性比色法定量檢測(cè)試劑 | 磷酸化真核啟動(dòng)因子2α抗體 |
富含亮氨酸重復(fù)蛋白38 | 促代謝型谷氨酸受體4抗體 |
食物總抗氧化能力(TAC)比色法(DDPH)定量pcr檢測(cè)試劑盒 | 植物a-(a-AMYLASE)活性比色法定量pcr檢測(cè)試劑盒 |
植物賴(lysine)含量高效液相色譜法定量pcr檢測(cè)試劑盒 | 體液肌酸激酶(CK)總活性比色法定量pcr檢測(cè)試劑盒 |
中性鞘磷脂2 | 血管緊張素I抗體 |
環(huán)指蛋白185 | 2號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框54抗體 |
ORC3蛋白 | 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白CHCHD3抗體 |
磷酸化原癌基因c-Jun重組兔單克隆 | Recombinant Human FOXP3SRPX2蛋白抗體 |
鈣轉(zhuǎn)感受態(tài)細(xì)菌制備試劑盒 | G蛋白偶聯(lián)受體14抗體 |
注意事項(xiàng):
安全提示:僅限研究使用,避免接觸臨床樣本;操作時(shí)需佩戴防護(hù)裝備。
質(zhì)量控制:產(chǎn)品純度通過(guò)SDS-PAGE驗(yàn)證,確保生物活性穩(wěn)定;避免使用含硫柳汞等有毒物質(zhì)的試劑。
兼容性:適用于多種實(shí)驗(yàn)體系,但需優(yōu)化濃度以避免非特異性結(jié)合。
關(guān)鍵字: FOXP3;47 KDa; 2-249;
上海西格生物有限公司于2019年6月18日成立。
西格生物專注于實(shí)驗(yàn)室和公共衛(wèi)生領(lǐng)域,利用互聯(lián)網(wǎng)、數(shù)據(jù)分析及自動(dòng)化技術(shù),包括實(shí)驗(yàn)室固定資產(chǎn)、儀器設(shè)備、生物樣本、化學(xué)品、試劑、配件耗材、環(huán)境、儀器自動(dòng)化和高通量篩選等一體化綜合管理平臺(tái)。不斷為各行業(yè)實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞生命學(xué)產(chǎn)品、技術(shù)服務(wù)、免疫學(xué)和分子學(xué)產(chǎn)品,截止至2024年5月,西格生物已為生命科學(xué)、檢驗(yàn)檢測(cè)、化工材料、科研院所、政府機(jī)構(gòu)多行業(yè)300余家知名客戶提供實(shí)驗(yàn)室完整解決方案。本著幫助用戶實(shí)現(xiàn)“讓科研場(chǎng)所更智能、讓科研人員更專注、讓科學(xué)服務(wù)更高效“的愿景,西格生物將繼續(xù)在實(shí)驗(yàn)室科研產(chǎn)品領(lǐng)域持續(xù)發(fā)力,更加重視本土化,建構(gòu)通用性高、適應(yīng)性好、模塊搭配靈活,能快速響應(yīng)客戶需求的產(chǎn)品。