重組表達原理:
基因克隆?:從?;蚪M中獲取CST3基因的編碼序列(對應(yīng)氨基酸31–148),插入含有啟動子、篩選標(biāo)記和His標(biāo)簽序列的質(zhì)粒載體。
宿主表達?:將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化至E. coli(如BL21菌株),在IPTG誘導(dǎo)下啟動蛋白表達。該系統(tǒng)成本低、表達效率高,適合大規(guī)模生產(chǎn)。
蛋白純化?:利用His標(biāo)簽與鎳柱親和層析結(jié)合,實現(xiàn)高純度(>95%)蛋白回收,再經(jīng)透析或凝膠過濾去除雜質(zhì)。
凍干保存?:加入海藻糖作為保護劑,凍干后可長期穩(wěn)定儲存,復(fù)溶后保持天然構(gòu)象和生物活性。
產(chǎn)品概述:
Recombinant Human GATM(重組人甘氨酸脒基轉(zhuǎn)移酶)是一種通過基因重組技術(shù)在體外表達和純化的關(guān)鍵代謝酶。作為肌酸生物合成的限速酶,它在能量代謝穩(wěn)態(tài)維持、腫瘤轉(zhuǎn)移調(diào)控以及遺傳性代謝疾病中扮演著核心角色。
產(chǎn)品名稱; Recombinant Human GATM
別名; AGAT, AT, GATM, GATM_HUMAN, Glycine amidinotransferase, Glycine amidinotransferase, mitochondrial, L-arginine:glycine amidinotransferase, mitochondrial, Transamidinase
宿主; E.Coli
表達區(qū)間; 38-423
分子量; 42.4 kDa
標(biāo)簽; N-terminal His Tag
純度; Greater than 95% as determined by SDS-PAGE
應(yīng)用; Western Blot, ELISA
性狀; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存儲; The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.
使用前準(zhǔn)備:
離心處理?
凍干粉在運輸過程中可能附著于管壁或管蓋,開蓋前應(yīng)先進行離心,確保粉末沉降至管底。
建議條件:3000–3500 rpm 離心 5 分鐘
若無高速離心機,可適當(dāng)延長低速離心時間
平衡溫度?
將凍干粉緩慢恢復(fù)至室溫(避免加熱加速溶解),防止因溫差導(dǎo)致管內(nèi)冷凝水影響蛋白穩(wěn)定性
溶解(Reconstitution)
溶解液選擇?
推薦使用無菌蒸餾水或 PBS(pH 7.4)進行復(fù)溶
若用于細胞實驗,可選用含 0.1% BSA 的緩沖液以增強穩(wěn)定性
配制濃度?
將凍干粉溶解至終濃度 ?0.1–1.0 mg/mL?,此范圍適用于大多數(shù)實驗場景
濃度過高可能導(dǎo)致蛋白聚集,過低則易失活
混勻方式?
使用移液槍頭輕輕吹打數(shù)次,或上下輕柔顛倒混勻
嚴(yán)禁使用渦旋振蕩器?,以免破壞蛋白空間結(jié)構(gòu),導(dǎo)致活性喪失
公司正在出售的產(chǎn)品:
酸性線粒體肌酸激酶 | 質(zhì)粒/蛋白制備樣品內(nèi)毒素比色法定量酶聯(lián)免疫試劑盒 |
跨膜蛋白超家族9-1 | 組蛋白H2B-K5乙?;嘎?lián)免疫試劑盒 |
50毫升玻璃勻漿器 | 石蠟切片組織RHO 蛋白表達NBT顯色光學(xué)顯微鏡酶聯(lián)免疫試劑盒 |
細胞ROCK-I激酶活性定量pcr檢測試劑盒(A/B/C) | 血液過氧化氫(HYDROGEN PEROXIDE)活性熒光定量酶聯(lián)免疫試劑盒 |
通用型維生素A含量比色法定量pcr檢測試劑盒 | TATA盒結(jié)合蛋白相關(guān)因子TAF1B抗體 |
鈣/鈣調(diào)素依賴蛋白激酶2b/2γ | G蛋白修補結(jié)構(gòu)域蛋白3抗體 |
細胞CASPASE-1蛋白表達流式細胞儀pcr檢測試劑盒 | 體液血管緊張素Ⅰ轉(zhuǎn)化酶1(ACE1)活性比色法定量pcr檢測試劑盒 |
脂肪酸β氧化檢測試劑專題 | 超氧化物歧化酶(SOD)紅細胞裂解樣品制備試劑盒 |
腫瘤壞死因子配體超家族成員13 | EFCAB1蛋白抗體 |
肌動蛋白抑制因子1 | 免疫調(diào)節(jié)蛋白AIRE抗體 |
PDZ連接激酶/T-LAK細胞源蛋白激酶 | 促性腺激素釋放激素2抗體 |
簡單細菌甲基藍染色試劑盒 | Recombinant Human GATM胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白6抗體 |
神經(jīng)細胞分化因子1重組兔單克隆抗體 | ATP依賴解旋酶DDX1抗體 |
注意事項:
安全提示:僅限研究使用,避免接觸臨床樣本;操作時需佩戴防護裝備。
質(zhì)量控制:產(chǎn)品純度通過SDS-PAGE驗證,確保生物活性穩(wěn)定;避免使用含硫柳汞等有毒物質(zhì)的試劑。
兼容性:適用于多種實驗體系,但需優(yōu)化濃度以避免非特異性結(jié)合。
關(guān)鍵字: GATM;42.4 kDa; 38-423;
上海西格生物有限公司于2019年6月18日成立。
西格生物專注于實驗室和公共衛(wèi)生領(lǐng)域,利用互聯(lián)網(wǎng)、數(shù)據(jù)分析及自動化技術(shù),包括實驗室固定資產(chǎn)、儀器設(shè)備、生物樣本、化學(xué)品、試劑、配件耗材、環(huán)境、儀器自動化和高通量篩選等一體化綜合管理平臺。不斷為各行業(yè)實驗室細胞生命學(xué)產(chǎn)品、技術(shù)服務(wù)、免疫學(xué)和分子學(xué)產(chǎn)品,截止至2024年5月,西格生物已為生命科學(xué)、檢驗檢測、化工材料、科研院所、政府機構(gòu)多行業(yè)300余家知名客戶提供實驗室完整解決方案。本著幫助用戶實現(xiàn)“讓科研場所更智能、讓科研人員更專注、讓科學(xué)服務(wù)更高效“的愿景,西格生物將繼續(xù)在實驗室科研產(chǎn)品領(lǐng)域持續(xù)發(fā)力,更加重視本土化,建構(gòu)通用性高、適應(yīng)性好、模塊搭配靈活,能快速響應(yīng)客戶需求的產(chǎn)品。