兔心肌成纖維細胞
產(chǎn)品信息：
產(chǎn)品名稱 兔心肌成纖維細胞
組織來源 心臟組織
種屬 兔
產(chǎn)品規(guī)格 5×10^5Cells/T25
英文名稱 | Rabbit Cardiac Fibroblast Cells | 規(guī)格 | 5×105 |
細胞形態(tài) | 成纖維細胞樣 | 貨號 | P-X2021 |
培養(yǎng)信息：
方法簡介：實驗室分離的兔心肌成纖維細胞采用膠原酶-胰蛋白酶聯(lián)合消化結(jié)合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測：實驗室分離的兔心肌成纖維細胞經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱：兔心肌成纖維細胞
組織來源：心臟組織
產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息：包被條件
培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細胞形態(tài)：成纖維細胞樣
傳代特性：可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)最佳
消化液：0.25%胰蛋白酶兔心肌成纖維細胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細胞簡介 ：
兔心肌成纖維細胞分離自心臟組織；心臟由心肌細胞和非心肌細胞組成，非心肌細胞占細胞總數(shù)的70%，其中90%以上的非心肌細胞由心肌成纖維細胞組成。成纖維細胞（Fibroblast）是疏松結(jié)締組織的主要細胞成分，由胚胎時期的間充質(zhì)細胞分化而來。成纖維細胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu)，其細胞核呈規(guī)則的卵圓形，核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛，細胞質(zhì)嗜弱堿性，具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動，在一定條件下，它可以實現(xiàn)跟纖維細胞的互相轉(zhuǎn)化；成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的心肌成纖維細胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養(yǎng)基中。30min細胞貼壁，其中部分開始伸出偽足，表現(xiàn)為小的突起；6h后細胞基本貼壁完全，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長，不聚集成團；細胞生長迅速，5-7天即呈融合狀態(tài)，細胞排列緊密，有的交叉重疊生長，平坦、胞體較大，細胞質(zhì)透明，細胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細胞融合，并彼此連接成網(wǎng)狀；細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。近年來，人們逐漸了解到非心肌細胞不僅對心肌細胞具有結(jié)構(gòu)上的支持、保護作用，而且還具有自分泌和旁分泌功能，影響心肌細胞的結(jié)構(gòu)和生理功能；心肌成纖維細胞主要功能為對心肌細胞起結(jié)構(gòu)支持作用并負責(zé)細胞基質(zhì)外的合成，當(dāng)心肌損傷時能產(chǎn)生旁分泌生長因子。心肌成纖維細胞是心臟結(jié)締組織中最常見的細胞，可合成和分泌膠原纖維、彈性纖維、網(wǎng)狀纖維及有機基質(zhì)，并且在外傷等因素刺激下，部分纖維細胞可重新轉(zhuǎn)變?yōu)橛字傻某衫w維細胞，其功能活動也得以恢復(fù)，參與組織損傷后的修復(fù)。因此，對心肌成纖維細胞的生理學(xué)研究成為現(xiàn)代心血管領(lǐng)域研究的一個重點。
原代細胞實驗要點：
一、取材與分離
新鮮、無菌：組織離體越快越好，全程冰上操作。
去除雜質(zhì)：剔除脂肪、結(jié)締組織、血污，減少污染和消化干擾。
溫和消化：
控制酶濃度、溫度、時間
及時終止消化，避免細胞過度損傷
過篩過濾：去除組織塊，獲得單細胞懸液。
二、接種與培養(yǎng)
密度關(guān)鍵：原代細胞普遍怕稀，密度太低不貼壁、不長。
完全貼壁后再換液：剛接種別亂動。
專用培養(yǎng)基：
內(nèi)皮、上皮、平滑肌、神經(jīng)元等盡量用專用原代培養(yǎng)基
血清質(zhì)量影響極大，建議批次驗證
CO?、濕度、溫度嚴格穩(wěn)定，避免頻繁開關(guān)門。
三、傳代與凍存
不要等太滿：匯合度 70%–80% 就傳，不要等到堆積。
消化監(jiān)控：鏡下觀察細胞變圓、間隙變大立即終止。
凍存保護：
標(biāo)準：90% 血清 + 10% DMSO
程序降溫，盡快轉(zhuǎn)入液氮
原代細胞凍存復(fù)蘇能力弱，盡量早凍、多凍。
四、污染與狀態(tài)判斷
一旦渾濁、pH 驟變、有顆粒：直接丟棄，不要救。
細胞狀態(tài)好：
形態(tài)均一、輪廓清晰
生長均勻、無局部堆積
出現(xiàn)分化、拉長、多核、空泡多：說明老化 / 狀態(tài)差，不建議繼續(xù)實驗。
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實驗后處理：
廢棄樣本處理：
細胞廢棄物消毒：實驗后的培養(yǎng)基、細胞懸液需用含有效氯的消毒液處理30分鐘后再排放，培養(yǎng)瓶、吸管等耗材需高壓滅菌后丟棄。
動物組織處理：剩余的動物組織需放入專用的生物危害垃圾袋，由專業(yè)機構(gòu)進行無害化處理，避免生物污染。
實驗設(shè)備清潔：
超凈工作臺清潔：實驗結(jié)束后用75%酒精擦拭臺面，打開紫外燈照射30分鐘，關(guān)閉風(fēng)機。
培養(yǎng)箱定期清潔：每周用75%酒精擦拭培養(yǎng)箱內(nèi)壁和隔板，每2周更換一次培養(yǎng)箱內(nèi)的水盤，避免滋生細菌。
關(guān)鍵字： 兔心肌成纖維細胞;成纖維細胞樣; 貼壁;
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