兔脂肪細(xì)胞
產(chǎn)品信息：
產(chǎn)品名稱 兔脂肪細(xì)胞
組織來源 脂肪組織
種屬 兔
產(chǎn)品規(guī)格 5×10^5Cells/T25
英文名稱 | Rabbit Adipocyte Cells | 規(guī)格 | 5×105 |
細(xì)胞形態(tài) | 梭形、多角形、圓形 | 貨號 | P-X2162 |
培養(yǎng)信息：
方法簡介：實驗室分離的兔脂肪細(xì)胞采用膠原酶-胰酶聯(lián)合消化法獲得前脂肪細(xì)胞，經(jīng)成脂誘導(dǎo)培養(yǎng)基誘導(dǎo)培養(yǎng)制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測：實驗室分離的兔脂肪細(xì)胞經(jīng)油紅O染色檢測，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱：兔脂肪細(xì)胞
組織來源：脂肪組織
產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息：包被條件PLL(0.1mg/ml)
培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)：梭形、多角形、圓形
傳代特性：屬于終末分化細(xì)胞；屬于不增殖細(xì)胞群
消化液：0.25%胰蛋白酶兔脂肪細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細(xì)胞簡介 ：
兔脂肪細(xì)胞分離自脂肪組織；脂肪組織主要由大量群集的脂肪細(xì)胞構(gòu)成，聚集成團(tuán)的脂肪細(xì)胞由薄層疏松結(jié)締組織分隔成小葉；貯存的脂肪，在需要時可迅速分解成甘油和脂肪酸，經(jīng)血液輸送到各組織以供利用。它們影響胰島素敏感性、血壓水平、內(nèi)皮功能、纖溶活動及炎癥反應(yīng)，參與多種重要病理生理過程；脂肪組織已由過去單純作為能量儲存的器官而成為一個極其重要的內(nèi)分泌系統(tǒng)。脂肪細(xì)胞分為白色脂肪細(xì)胞和褐色（棕色）脂肪細(xì)胞，常呈白色，在嬰幼兒期大量增殖，到青春期數(shù)量達(dá)到巔峰，此后數(shù)量一般不再增加。細(xì)胞內(nèi)含有大量富含脂肪的小泡，稱為脂質(zhì)泡，富含光面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)。此外，還有一種褐色脂肪細(xì)胞，在動物體內(nèi)主要存在于肩胛骨間、頸背部、腋窩、縱隔及腎臟周圍，含有高度團(tuán)縮的褐色脂肪，作用是將脂質(zhì)分解產(chǎn)熱，調(diào)節(jié)體內(nèi)脂質(zhì)比例。
原代細(xì)胞傳代：
傳代時機(jī)判斷
細(xì)胞匯合度達(dá)到80%-90%時進(jìn)行傳代，避免細(xì)胞過度匯合導(dǎo)致接觸抑制，影響增殖能力
觀察細(xì)胞狀態(tài)：細(xì)胞形態(tài)正常，無明顯漂浮、污染跡象
消化環(huán)節(jié)控制
消化前準(zhǔn)備：吸出舊培養(yǎng)基，用PBS輕輕沖洗細(xì)胞1-2次，去除血清（血清會抑制胰蛋白酶活性）
消化液選擇：同原代分離，根據(jù)細(xì)胞類型選擇合適的消化酶，胰蛋白酶消化時間一般為1-5分鐘，膠原酶消化時間為10-30分鐘
消化終止：顯微鏡下觀察到細(xì)胞回縮變圓、間隙增大時，立即加入含血清的培養(yǎng)基終止消化，血清濃度不低于10%
細(xì)胞吹打：用移液器輕輕吹打細(xì)胞，避免過度用力導(dǎo)致細(xì)胞破裂，吹打次數(shù)一般為10-15次
傳代比例控制
傳代比例根據(jù)細(xì)胞生長速度調(diào)整：生長速度快的細(xì)胞（如成纖維細(xì)胞）可按1:3-1:6傳代，生長速度慢的細(xì)胞（如內(nèi)皮細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞）按1:2傳代
首次傳代比例可適當(dāng)提高（如1:2），待細(xì)胞適應(yīng)體外培養(yǎng)環(huán)境后再調(diào)整為常規(guī)比例
傳代后培養(yǎng)
接種后輕輕晃動培養(yǎng)瓶，使細(xì)胞均勻分布，放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)
24小時內(nèi)不要晃動培養(yǎng)瓶，避免細(xì)胞貼壁不牢
培養(yǎng)24-48小時后觀察細(xì)胞貼壁情況，更換新鮮培養(yǎng)基，去除未貼壁的死細(xì)胞和細(xì)胞碎片
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收貨與處理流程：
1. 收貨檢查
收到細(xì)胞后首先觀察T25培養(yǎng)瓶瓶身是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有異常及時聯(lián)系。
2. 細(xì)胞復(fù)蘇（僅針對凍存細(xì)胞）
將凍存管迅速放入37℃溫水中搖晃融化，時間約1分鐘
加入4-5ml完全培養(yǎng)基混勻，1000RPM常溫離心4-5分鐘
棄去上清液，補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液吹勻，移入含5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜，第二天換液并檢查細(xì)胞密度
3. 新鮮細(xì)胞處理
用75%酒精消毒培養(yǎng)瓶瓶身，拆下封口膜
放入37℃、5%CO?、飽和濕度的培養(yǎng)箱中靜置3-4小時，穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)后再進(jìn)行后續(xù)操作
關(guān)鍵字： 兔脂肪細(xì)胞;梭形、多角形、圓形; 貼壁;
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