小鼠骨骼肌細胞

產(chǎn)品信息：

產(chǎn)品名稱 小鼠骨骼肌細胞

組織來源 骨骼肌組織
種屬 小鼠

產(chǎn)品規(guī)格 5×10^5Cells/T25

培養(yǎng)信息：

方法簡介：實驗室分離的小鼠骨骼肌細胞采用膠原酶消化法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測：實驗室分離的小鼠骨骼肌細胞經(jīng)α-Sarcomeric actin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

產(chǎn)品名稱：小鼠骨骼肌細胞

組織來源：骨骼肌組織

產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

培養(yǎng)信息：包被條件PLL(0.1mg/ml)

培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率:每2-3天換液一次

生長特性：貼壁

細胞形態(tài)：成纖維細胞樣

傳代特性：可傳3-5代左右

消化液：0.25%胰蛋白酶小鼠骨骼肌細胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細胞簡介 ：

小鼠骨骼肌細胞分離自四肢肌肉組織；骨骼肌又稱橫紋肌，肌肉中的一種，約占全身重量的40%。骨骼肌纖維為長柱形的多核細胞，肌膜的外面有基膜緊密貼附。屬于橫紋肌，橫紋肌還包括心肌與內(nèi)臟橫紋肌，其中骨骼肌主要分布于四肢。每塊肌肉都是具有一定形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能的器官，有豐富的血管、淋巴分布，在軀體神經(jīng)支配下收縮或舒張，進行隨意運動。肌肉可根據(jù)共形狀、大小、位置、起止點、纖維方向和作用等命名。依形態(tài)命名的如斜方肌、菱形肌、三角肌、梨狀肌等。骨骼肌細胞呈纖維狀，不分支，有明顯橫紋，核很多，且都位于細胞膜下方。肌細胞內(nèi)有許多沿細胞長軸平行排列的細絲狀肌原纖維。每一肌原纖維都有相間排列的明帶(Ⅰ帶)及暗帶(A帶)。明帶染色較淺，而暗帶染色較深。暗帶中間有一條較明亮的線稱H線。H線的中部有一M線。明帶中間，有一條較暗的線稱為Z線。兩個Z線之間的區(qū)段，叫做一個肌節(jié)。骨骼肌細胞也稱橫紋肌細胞，細胞呈纖維狀，不分支，有明顯橫紋，核很多，且都位于細胞膜下方，細胞多呈梭行，具有一定的方向性。骨骼肌細胞原代分離培養(yǎng)3天后，可見細胞貼壁伸展，細胞形態(tài)：大小不一，呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形，核卵圓形、居中；2周后細胞匯合，多數(shù)細胞伸展呈長梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長，高低起伏；細胞密度低時，常交織成網(wǎng)狀；密度高時，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快，4-6天即可匯合，并保持上述形態(tài)學特征和生長特點。
原代細胞培養(yǎng)：

培養(yǎng)基選擇：根據(jù)細胞類型選擇專用培養(yǎng)基，如上皮細胞用上皮細胞培養(yǎng)基、成纖維細胞用成纖維細胞培養(yǎng)基，必要時添加血清（胎牛血清FBS常用，濃度10%-20%）、生長因子、抗生素等補充成分；培養(yǎng)基使用前需預熱至37℃。

接種密度控制：原代細胞接種密度不宜過低，否則細胞難以分泌足夠的自分泌因子支持生長，一般接種密度為1×10?-5×10?細胞/cm2；接種后輕輕晃動培養(yǎng)瓶，使細胞均勻分布。

培養(yǎng)環(huán)境監(jiān)控：保持培養(yǎng)箱內(nèi)37℃、5%CO?的恒定環(huán)境，定期檢查培養(yǎng)基顏色變化（變黃說明pH下降，需及時換液）；原代細胞貼壁前避免頻繁晃動培養(yǎng)瓶，貼壁后通常每2-3天換液一次。
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原代細胞分離：

組織樣本處理：取材后立即置于預冷的含抗生素的PBS或組織保存液中，避免樣本干燥和溫度變化；修剪時去除壞死、結(jié)締組織等雜質(zhì)，盡量減小組織塊體積以提高消化效率。

消化方法選擇：

酶消化法：根據(jù)組織類型選對應酶（如胰蛋白酶用于上皮類組織、膠原酶用于結(jié)締組織豐富的組織），嚴格控制消化溫度（通常37℃）和時間，每隔5-10分鐘鏡下觀察，避免過度消化損傷細胞。

機械分離法：適合柔軟組織（如腦、肝臟），通過剪碎、吹打、過濾等方式分散細胞，操作時動作輕柔，減少細胞機械損傷。

細胞過濾與離心：用合適孔徑的細胞篩（如100-200目）過濾細胞懸液，去除未消化的組織塊；離心轉(zhuǎn)速通常為1000-1500rpm，時間5-10分鐘，避免高速離心導致細胞破裂。