小鼠海綿體平滑肌細胞
產(chǎn)品信息：
產(chǎn)品名稱 小鼠海綿體平滑肌細胞
組織來源 海綿體組織
種屬 小鼠
產(chǎn)品規(guī)格 5×10^5Cells/T25
英文名稱 | Mouse Corpora Cavernous Smooth Muscle Cells | 規(guī)格 | 5×105 |
細胞形態(tài) | 成纖維細胞樣 | 貨號 | P-X1869 |
培養(yǎng)信息：
方法簡介：實驗室分離的小鼠海綿體平滑肌細胞采用膠原酶消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測：實驗室分離的小鼠海綿體平滑肌細胞經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱：小鼠海綿體平滑肌細胞
英文簡稱：CCSMCs
組織來源：海綿體組織
產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息：包被條件
培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細胞形態(tài)：成纖維細胞樣
傳代特性：可傳1-3代左右
消化液：0.25%胰蛋白酶小鼠海綿體平滑肌細胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細胞簡介 ：
小鼠海綿體平滑肌細胞分離自海綿體組織；海綿體，又稱海綿體肌，是最硬的平滑肌和結(jié)締組織。海綿體是一種勃起組織，外面包有堅厚的白膜，內(nèi)部由結(jié)締組織和平滑肌組成海綿狀支架，其腔隙與血管相通。它主要包括海綿體內(nèi)皮細胞、平滑肌細胞和成纖維細胞3種細胞成分。其中平滑肌細胞和成纖維細胞鑲嵌于海綿體細胞外基質(zhì)的膠原中，在消化海綿體組織時，膠原酶的作用主要是松解海綿體內(nèi)皮細胞與基膜的聯(lián)系，破壞海綿體內(nèi)皮細胞間的緊密連接。因此可用膠原酶分離出海綿體平滑肌細胞。平滑肌，是非橫紋肌的肌肉組織。分布在人體動脈和靜脈血管壁、膀胱、子宮、男性和女性生殖道、消化道、呼吸道、眼睛的睫狀肌和虹膜。平滑肌細胞原代分離培養(yǎng)3天后，可見細胞貼壁伸展，細胞形態(tài)：大小不一，呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形，核卵圓形、居中；2周后細胞匯合，多數(shù)細胞伸展呈長梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長，高低起伏；細胞密度低時，常交織成網(wǎng)狀；密度高時，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快，4-6天即可匯合，并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長特點。
操作過程：
組織消化的細節(jié)：
分階段消化：對于致密組織（如腎臟、乳腺），可先剪碎至1mm3左右的小塊，用PBS清洗2-3次去除血液和雜質(zhì)，再進行酶消化，避免雜質(zhì)影響酶的活性。
間歇振蕩消化：消化過程中可將培養(yǎng)瓶置于搖床上，以60-80rpm的速度輕微振蕩，促進酶與組織充分接觸，提高消化效率。
細胞計數(shù)與接種：
計數(shù)前混勻：細胞懸液需充分混勻后再取樣計數(shù)，避免細胞沉降導(dǎo)致計數(shù)誤差；計數(shù)時至少計數(shù)2個方格，取平均值提高準確性。
接種后靜置：細胞接種后將培養(yǎng)瓶置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置2-4小時，期間不要晃動，讓細胞自然貼壁，之后再輕輕更換培養(yǎng)位置。
換液與傳代的技巧：
換液留底液：換液時不要完全倒掉舊培養(yǎng)基，可保留10%左右的底液，減少細胞環(huán)境的突變，幫助細胞適應(yīng)新培養(yǎng)基。
傳代避免過度消化：原代細胞對胰蛋白酶更敏感，傳代時消化時間比傳代細胞短2-3分鐘，鏡下觀察到細胞邊緣收縮、開始脫落時即可終止消化。
公司正在出售的產(chǎn)品：
人睪丸白膜上皮細胞 | 大腸桿菌通用染料法熒光定量PCR試劑盒(含致病性和非致病性) |
人睪丸支持細胞 | 米黑根毛霉染料法熒光定量PCR試劑盒 |
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人宮頸成纖維細胞 | 丹毒絲菌屬通用染料法熒光定量PCR試劑盒 |
人宮頸平滑肌細胞 | 化膿隱秘菌染料法熒光定量PCR試劑盒 |
人宮頸上皮細胞 | 詹姆士城峽谷病毒染料法熒光定量RT-PCR試劑盒 |
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人骨髓巨噬細胞 | 小鼠海綿體平滑肌細胞寨卡病毒染料法熒光定量RT-PCR試劑盒 |
人骨微血管內(nèi)皮細胞 | 札如病毒G2型染料法熒光定量RT-PCR試劑盒 |
原代細胞實驗常見問題：
污染防控：實驗全程嚴格無菌操作，超凈工作臺使用前紫外消毒30分鐘，實驗用品需高壓滅菌；定期對培養(yǎng)箱、水浴鍋等設(shè)備進行清潔和消毒，避免細菌、真菌、支原體污染。
細胞老化與分化：原代細胞傳代次數(shù)有限，通常傳至3-5代后會出現(xiàn)老化，需及時凍存早期代次細胞；培養(yǎng)過程中避免過度傳代、營養(yǎng)缺乏、環(huán)境刺激等因素，防止細胞自發(fā)分化。
實驗重復(fù)性保障：每次實驗使用同一來源、同一代次的細胞，嚴格控制實驗條件（如培養(yǎng)基批次、消化時間、培養(yǎng)時間等），設(shè)置足夠的重復(fù)樣本，減少實驗誤差。
關(guān)鍵字： 小鼠海綿體平滑肌細胞;成纖維細胞樣;貼壁;
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