細胞簡介:

兔前列腺上皮細胞分離自前列腺組織;前列腺(Prostate)是雄性特有的性腺器官;前列腺是不成對的實質性器宮,由腺組織和肌組織構成。前列腺如栗子,底朝上,與膀胱相貼,尖朝下,抵泌尿生殖膈,前面貼恥骨聯(lián)合,后面依直腸。前列腺腺體的中間有尿道穿過,扼守著尿道上口,所以,前列腺有問題時,排尿首先受影響。前列腺是機體非常少有的,具有內、外雙重分泌功能的性分泌腺。作為外分泌腺,前列腺每天分泌前列腺液,是構成精液主要成分;作為內分泌腺,前列腺分泌的激素稱為“前列腺素”。前列腺上皮細胞與前列腺的功能關系密切,上皮細胞的損傷是前列腺炎的主要病癥,重度的前列腺炎患者的前列腺液內可檢測到脫落的上皮細胞,這是上皮細胞損傷的標志。炎癥發(fā)生時,與炎癥相關的一些炎癥因子可能發(fā)生變化。因此,體外培養(yǎng)前列腺上皮細胞是研究前列腺炎及前列腺上皮肉瘤等疾病的前提和基礎。前列腺主要特征如下:①前列腺結構和功能活動均受雄性激素的調控;②基底細胞主要表達高分子量細胞角蛋白(CK-5、CK-14),基底上皮細胞可分化成管腔上皮細胞;③前列腺上皮細胞的培養(yǎng)為研究前列腺的許多重要特性以及化學和激素性致癌作用提供了機會。
產(chǎn)品名稱 | 兔前列腺上皮細胞 | 產(chǎn)品貨號 | P-X2088 |
英文名稱 | Rabbit Prostate Epithelial Cells | 規(guī)格 | 5×10^5 |
報告 | 提供免疫熒光鑒定報告 | 組織來源 | 前列腺 |
產(chǎn)品信息:

方法簡介:實驗室分離的兔前列腺上皮細胞采用先中性蛋白酶消化、后膠原酶-胰蛋白酶聯(lián)合消化并通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:實驗室分離的兔前列腺上皮細胞經(jīng)PCK免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱:兔前列腺上皮細胞
組織來源:前列腺
產(chǎn)品規(guī)格:5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息:包被條件鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細胞形態(tài):上皮細胞樣
傳代特性:可傳1-2代
消化液:0.25%胰蛋白酶兔前列腺上皮細胞體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。
操作過程:

組織消化的細節(jié):
分階段消化:對于致密組織(如腎臟、乳腺),可先剪碎至1mm3左右的小塊,用PBS清洗2-3次去除血液和雜質,再進行酶消化,避免雜質影響酶的活性。
間歇振蕩消化:消化過程中可將培養(yǎng)瓶置于搖床上,以60-80rpm的速度輕微振蕩,促進酶與組織充分接觸,提高消化效率。
細胞計數(shù)與接種:
計數(shù)前混勻:細胞懸液需充分混勻后再取樣計數(shù),避免細胞沉降導致計數(shù)誤差;計數(shù)時至少計數(shù)2個方格,取平均值提高準確性。
接種后靜置:細胞接種后將培養(yǎng)瓶置于培養(yǎng)箱內靜置2-4小時,期間不要晃動,讓細胞自然貼壁,之后再輕輕更換培養(yǎng)位置。
換液與傳代的技巧:
換液留底液:換液時不要完全倒掉舊培養(yǎng)基,可保留10%左右的底液,減少細胞環(huán)境的突變,幫助細胞適應新培養(yǎng)基。
傳代避免過度消化:原代細胞對胰蛋白酶更敏感,傳代時消化時間比傳代細胞短2-3分鐘,鏡下觀察到細胞邊緣收縮、開始脫落時即可終止消化。
原代細胞實驗常見問題:

污染防控:實驗全程嚴格無菌操作,超凈工作臺使用前紫外消毒30分鐘,實驗用品需高壓滅菌;定期對培養(yǎng)箱、水浴鍋等設備進行清潔和消毒,避免細菌、真菌、支原體污染。
細胞老化與分化:原代細胞傳代次數(shù)有限,通常傳至3-5代后會出現(xiàn)老化,需及時凍存早期代次細胞;培養(yǎng)過程中避免過度傳代、營養(yǎng)缺乏、環(huán)境刺激等因素,防止細胞自發(fā)分化。
實驗重復性保障:每次實驗使用同一來源、同一代次的細胞,嚴格控制實驗條件(如培養(yǎng)基批次、消化時間、培養(yǎng)時間等),設置足夠的重復樣本,減少實驗誤差。
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關鍵字: 兔前列腺上皮細胞;上皮細胞樣;貼壁;
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