細胞簡介：
兔乳腺成纖維細胞分離自乳腺組織；乳腺位于皮下淺筋膜的淺層與深層之間，淺筋膜伸向乳腺組織內(nèi)形成條索狀的小葉間隔，一端連于胸肌筋膜，另一端連于皮膚，將乳腺腺體固定在胸部的皮下組織之中。乳腺是哺乳動物少數(shù)可以重復(fù)經(jīng)歷生長、功能分化和退化過程的器官之一。纖維結(jié)締組織伸入乳腺組織之間，形成許多間隔，這些纖維結(jié)締組織對乳房起固定作用，而纖維結(jié)締組織是由成纖維細胞構(gòu)成的。成纖維細胞(Fibroblast)是疏松結(jié)締組織的主要細胞成分，由胚胎時期的間充質(zhì)細胞分化而來。成纖維細胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu)，其細胞核呈規(guī)則的卵圓形，核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛，細胞質(zhì)嗜弱堿性，具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動，在一定條件下，它可以實現(xiàn)跟纖維細胞的互相轉(zhuǎn)化；成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的乳腺成纖維細胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養(yǎng)基中。30min細胞貼壁，其中部分開始伸出偽足，表現(xiàn)為小的突起；6h后細胞基本貼壁完全，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長，不聚集成團；細胞生長迅速，5-7天即呈融合狀態(tài)，細胞排列緊密，有的交叉重疊生長，平坦、胞體較大，細胞質(zhì)透明，細胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細胞融合，并彼此連接成網(wǎng)狀；細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。
產(chǎn)品名稱 | 兔乳腺成纖維細胞 | 產(chǎn)品貨號 | P-X2124 |
英文名稱 | Rabbit Mammary Fibroblast Cells | 規(guī)格 | 5×10^5 |
報告 | 提供免疫熒光鑒定報告 | 組織來源 | 乳腺組織 |
產(chǎn)品信息：
方法簡介：實驗室分離的兔乳腺成纖維細胞采用胰蛋白酶 - 膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測：實驗室分離的兔乳腺成纖維細胞經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱：兔乳腺成纖維細胞
組織來源：乳腺組織
產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息：包被條件
培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細胞形態(tài)：成纖維細胞樣
傳代特性：可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)最佳
消化液：0.25%胰蛋白酶兔乳腺成纖維細胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細胞培養(yǎng)方法：
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%胰酶（T25瓶），使胰酶覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入完全培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%胰蛋白酶（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入完全培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
原代細胞純化與鑒定：
純化方法：
差速貼壁法：利用不同細胞貼壁速度差異，如成纖維細胞貼壁快，上皮細胞貼壁慢，在接種后1-2小時移除未貼壁細胞，可初步分離不同細胞類型。
免疫磁珠分選法/流式細胞術(shù)：針對特定細胞表面標志物，利用特異性抗體標記細胞，通過磁珠或流式分選儀分離目標細胞，純度可達90%以上。
鑒定手段：通過形態(tài)學(xué)觀察（原代細胞形態(tài)多樣，與傳代細胞有差異）、免疫細胞化學(xué)染色、RT-PCR檢測特異性基因表達等方法，確認目標細胞的純度和身份。
公司正在出售的產(chǎn)品：
人急性骨髓白血病細胞 | 布氏錐尾線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒 |
小鼠胚胎成纖維細胞 | RT-豬皰疹病毒型探針法熒光定量PCR試劑盒 |
大鼠滑膜細胞 | 豬乳頭瘤病毒探針法熒光定量PCR試劑盒 |
人胚肺成纖維細胞 | 鏈狀帶絳蟲探針法熒光定量PCR試劑盒 |
子宮內(nèi)膜癌細胞株 | 泰勒屬原蟲通用PCR檢測試劑盒 |
小細胞肺癌細胞 | 雞類圓線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒 |
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人膽管細胞型肝癌細胞 | 氣管比翼線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒 |
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關(guān)鍵字： 兔乳腺成纖維細胞;成纖維細胞樣;貼壁;
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