細(xì)胞簡介：

兔視網(wǎng)膜前體細(xì)胞分離自視網(wǎng)膜組織；視網(wǎng)膜居于眼球壁的內(nèi)層，是一層透明的薄膜。視網(wǎng)膜由色素上皮層和視網(wǎng)膜感覺層組成，兩層間在病理情況下可分開，稱為視網(wǎng)膜脫離。色素上皮層與脈絡(luò)膜緊密相連，由色素上皮細(xì)胞組成，它們具有支持和營養(yǎng)光感受器細(xì)胞、遮光、散熱以及再生和修復(fù)等作用。組織學(xué)上視網(wǎng)膜分為10層，由外向內(nèi)分別為：色素上皮層、視錐、視桿細(xì)胞層、外界膜、外顆粒層、外叢狀層、內(nèi)顆粒層、內(nèi)叢狀層、神經(jīng)節(jié)細(xì)胞層、神經(jīng)纖維層、內(nèi)界膜。視網(wǎng)膜內(nèi)層為襯于血管膜內(nèi)面的一層薄膜，有感光作用；后部鼻側(cè)有一視神經(jīng)乳頭。視網(wǎng)膜上的感覺層是由三個(gè)神經(jīng)元組成。第一神經(jīng)元是視細(xì)胞層，專司感光，它包括錐細(xì)胞和桿細(xì)胞。視桿細(xì)胞主要在離中心凹較遠(yuǎn)的視網(wǎng)膜上，而視錐細(xì)胞則在中心凹處最多。第二層叫雙節(jié)細(xì)胞，約有10到數(shù)百個(gè)視細(xì)胞通過雙節(jié)細(xì)胞與一個(gè)神經(jīng)節(jié)細(xì)胞相聯(lián)系，負(fù)責(zé)聯(lián)絡(luò)作用。第三層叫節(jié)細(xì)胞層，專管傳導(dǎo)。視網(wǎng)膜是一層菲薄的但又非常復(fù)雜的結(jié)構(gòu)，它貼于眼球的后壁部，傳遞來自視網(wǎng)膜感受器沖動(dòng)的神經(jīng)纖維跨越視網(wǎng)膜表面，經(jīng)由視神經(jīng)到達(dá)出口。視網(wǎng)膜的分辨力是不均勻的，在黃斑區(qū)，其分辨能力最強(qiáng)。

產(chǎn)品信息：

方法簡介：實(shí)驗(yàn)室分離的兔視網(wǎng)膜前體細(xì)胞采用胰蛋白酶消化法結(jié)合專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測：實(shí)驗(yàn)室分離的兔視網(wǎng)膜前體細(xì)胞經(jīng)Nestin免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

產(chǎn)品名稱：兔視網(wǎng)膜前體細(xì)胞

組織來源：視網(wǎng)膜組織

產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

培養(yǎng)信息：包被條件

培養(yǎng)基含B-27 Supplement、EGF、bFGF、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率:每2-3天換液一次

生長特性：半貼壁半懸浮

細(xì)胞形態(tài)：圓形

傳代特性：可傳1-2代

消化液：0.25%胰蛋白酶兔視網(wǎng)膜前體細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。
原代細(xì)胞接種：

細(xì)胞計(jì)數(shù)與密度調(diào)整

使用血球計(jì)數(shù)板或細(xì)胞計(jì)數(shù)儀準(zhǔn)確計(jì)數(shù)，調(diào)整細(xì)胞密度至合適范圍（不同細(xì)胞類型差異較大，一般為1×10?-1×10?cells/ml）

密度過低：細(xì)胞無法分泌足夠的生長因子，難以存活；密度過高：細(xì)胞競爭營養(yǎng)物質(zhì)，易出現(xiàn)接觸抑制

培養(yǎng)基選擇

優(yōu)先使用原代細(xì)胞專用培養(yǎng)基，若使用通用培養(yǎng)基，需添加合適的生長因子、血清等補(bǔ)充成分（如成纖維細(xì)胞添加FGF，內(nèi)皮細(xì)胞添加VEGF）

血清濃度：原代細(xì)胞培養(yǎng)血清濃度一般為10%-20%，部分特殊細(xì)胞（如神經(jīng)細(xì)胞）需使用無血清培養(yǎng)基

培養(yǎng)環(huán)境控制

溫度：哺乳動(dòng)物細(xì)胞一般為37℃，鳥類細(xì)胞38.5℃，昆蟲細(xì)胞27℃

CO?濃度：大多數(shù)細(xì)胞需要5%CO?，維持培養(yǎng)基pH在7.2-7.4之間

濕度：培養(yǎng)箱濕度保持在70%-80%，避免培養(yǎng)基蒸發(fā)過快
原代細(xì)胞實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)：

取材要快、要新鮮、全程無菌

組織離體時(shí)間越短越好，冰上操作，減少缺血損傷。

嚴(yán)格控制細(xì)胞代數(shù)

原代細(xì)胞只建議用 P0～P3，代數(shù)越高越容易分化、結(jié)果越不可靠。

接種密度寧高不低

原代細(xì)胞普遍怕稀，太稀不貼壁、不生長、容易凋亡。

消化是關(guān)鍵，寧輕勿重

胰酶 / 膠原酶只消化到細(xì)胞變圓就終止，過度消化必死一批。

吹打輕柔，避免機(jī)械損傷。

培養(yǎng)基和血清不要隨便換批次

血清、基礎(chǔ)培養(yǎng)基、添加因子固定廠家固定批次，換批次必須先預(yù)實(shí)驗(yàn)。

避免頻繁折騰細(xì)胞

少開培養(yǎng)箱門，不反復(fù)觀察、不反復(fù)拿進(jìn)拿出，溫度、pH 波動(dòng)對原代殺傷極大。

公司正在出售的產(chǎn)品：