小鼠脾淋巴細(xì)胞
產(chǎn)品信息：
產(chǎn)品名稱 小鼠脾淋巴細(xì)胞
組織來源 脾臟
種屬 小鼠
產(chǎn)品規(guī)格 5×10^5Cells/T25
英文名稱 | Mouse Splenic Lymphocyte Cells | 規(guī)格 | 5×105 |
細(xì)胞形態(tài) | 圓形 | 貨號(hào) | P-X1940 |
培養(yǎng)信息：
方法簡(jiǎn)介：實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠脾淋巴細(xì)胞采用機(jī)械研磨法結(jié)合密度梯度離心法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)：實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠脾淋巴細(xì)胞，不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱：小鼠脾淋巴細(xì)胞
英文簡(jiǎn)稱：SPL
組織來源：脾臟
產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息：包被條件
培養(yǎng)基含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性：懸浮
細(xì)胞形態(tài)：圓形
傳代特性：不增殖；不傳代
消化液：0.25%胰蛋白酶小鼠脾淋巴細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細(xì)胞簡(jiǎn)介 ：
小鼠脾淋巴細(xì)胞分離自脾臟組織；脾臟是機(jī)體最大的免疫器官，占全身淋巴組織總量的25%，含有大量的淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞，是機(jī)體細(xì)胞免疫和體液免疫的中心。位于左季肋區(qū)后外方肋弓深處，與9－11肋相對(duì)，長(zhǎng)軸與第10肋一致。膈面與膈肌和左肋膈竇相鄰，前方有胃，后方與左腎、左腎上腺毗鄰，下端與結(jié)腸脾溝相鄰，地柔軟的網(wǎng)狀內(nèi)皮細(xì)胞器官。淋巴細(xì)胞(lymphocyte)白細(xì)胞的一種，由淋巴器官產(chǎn)生，機(jī)體免疫應(yīng)答功能的重要細(xì)胞成分。淋巴器官根據(jù)其發(fā)生和功能的差異，可分為中樞淋巴器官(又名初級(jí)淋巴器官)和周圍淋巴器官(又名次級(jí)淋巴器官)兩類。前者包括胸腺、腔上囊或其相當(dāng)器官(有人認(rèn)為在哺乳動(dòng)物是骨髓)。它們無須抗原刺激即可不斷增殖淋巴細(xì)胞，成熟后將其轉(zhuǎn)送至周圍淋巴器官。后者包括脾、淋巴結(jié)等。成熟淋巴細(xì)胞需依賴抗原刺激而分化增殖，繼而發(fā)揮其免疫功能。
原代細(xì)胞分離：
組織樣本處理：取材后立即置于預(yù)冷的含抗生素的PBS或組織保存液中，避免樣本干燥和溫度變化；修剪時(shí)去除壞死、結(jié)締組織等雜質(zhì)，盡量減小組織塊體積以提高消化效率。
消化方法選擇：
酶消化法：根據(jù)組織類型選對(duì)應(yīng)酶（如胰蛋白酶用于上皮類組織、膠原酶用于結(jié)締組織豐富的組織），嚴(yán)格控制消化溫度（通常37℃）和時(shí)間，每隔5-10分鐘鏡下觀察，避免過度消化損傷細(xì)胞。
機(jī)械分離法：適合柔軟組織（如腦、肝臟），通過剪碎、吹打、過濾等方式分散細(xì)胞，操作時(shí)動(dòng)作輕柔，減少細(xì)胞機(jī)械損傷。
細(xì)胞過濾與離心：用合適孔徑的細(xì)胞篩（如100-200目）過濾細(xì)胞懸液，去除未消化的組織塊；離心轉(zhuǎn)速通常為1000-1500rpm，時(shí)間5-10分鐘，避免高速離心導(dǎo)致細(xì)胞破裂。
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細(xì)胞消化與傳代：
方法一：利多卡因消化法
吸出培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞1次
添加1ml 12mM利多卡因消化液，輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶使液體覆蓋瓶底，37℃溫浴3-5分鐘
顯微鏡下觀察到細(xì)胞回縮變圓后，加入5ml完全培養(yǎng)基稀釋消化液
輕輕吹打混勻細(xì)胞，1200rpm離心5分鐘，棄上清后用完全培養(yǎng)基重懸接種
方法二：胰酶消化法
若利多卡因消化效果不佳，可更換為0.25%胰蛋白酶-EDTA消化液，重復(fù)上述操作，消化時(shí)間控制在1-2分鐘
方法三：細(xì)胞刮取法
若細(xì)胞仍無法消化，加入3ml完全培養(yǎng)基終止消化，用無菌細(xì)胞刮輕輕刮取細(xì)胞（此方法易造成細(xì)胞機(jī)械損傷，不推薦）
關(guān)鍵字： 小鼠脾淋巴細(xì)胞;圓形;懸浮;
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