小鼠氣管上皮細(xì)胞
產(chǎn)品信息：
產(chǎn)品名稱 小鼠氣管上皮細(xì)胞
組織來源 氣管
種屬 小鼠
產(chǎn)品規(guī)格 5×10^5Cells/T25
英文名稱 | Mouse Tracheal Epithelial Cells | 規(guī)格 | 5×105 |
細(xì)胞形態(tài) | 上皮細(xì)胞樣 | 貨號 | P-X1765 |
培養(yǎng)信息：
方法簡介：實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠氣管上皮細(xì)胞采用鏈霉蛋白酶-中性蛋白酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法，并通過上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測：實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠氣管上皮細(xì)胞經(jīng)PCK免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱：小鼠氣管上皮細(xì)胞
組織來源：氣管
產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息：包被條件鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
傳代特性：可傳1-2代
消化液：0.25%胰蛋白酶小鼠氣管上皮細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細(xì)胞簡介 ：
小鼠氣管上皮細(xì)胞分離自氣管組織；氣管(Trachea)，呼吸器官的一部分；為后壁略平的圓筒型管狀。上端平第六頸椎下緣，與環(huán)狀軟骨相連；向下至第四、五胸椎體(相當(dāng)胸骨角平面)交界處，分左、右主支氣管，分叉處稱為氣管杈。氣管主要由14-16個半環(huán)狀軟骨構(gòu)成，有彈性，軟骨為“C”字形的軟骨環(huán)，缺口向后，各軟骨環(huán)以韌帶連接起來，環(huán)后方缺口處由平滑肌和致密結(jié)締組織連接，保持了持續(xù)張開狀態(tài)。管腔襯以粘膜，表面覆蓋纖毛上皮，粘膜分泌的粘液可粘附吸入空氣中的灰塵顆粒，纖毛不斷向咽部擺動將粘液與灰塵排出，以凈化吸入的氣體。氣管上皮是氣道與外界環(huán)境接觸的第一道防線，不僅是各種病原體、炎癥介質(zhì)作用的靶細(xì)胞，還作為效應(yīng)細(xì)胞合成、釋放多種炎性介質(zhì)和細(xì)胞因子從而參與氣道炎癥及免疫反應(yīng)。體外培養(yǎng)的原代氣管上皮細(xì)胞因與體內(nèi)組織在形態(tài)結(jié)構(gòu)和功能活動上存在很大的相似性，因此，在基礎(chǔ)及臨床研究中極為重要。
原代細(xì)胞接種：
細(xì)胞計(jì)數(shù)與密度調(diào)整
使用血球計(jì)數(shù)板或細(xì)胞計(jì)數(shù)儀準(zhǔn)確計(jì)數(shù)，調(diào)整細(xì)胞密度至合適范圍（不同細(xì)胞類型差異較大，一般為1×10?-1×10?cells/ml）
密度過低：細(xì)胞無法分泌足夠的生長因子，難以存活；密度過高：細(xì)胞競爭營養(yǎng)物質(zhì)，易出現(xiàn)接觸抑制
培養(yǎng)基選擇
優(yōu)先使用原代細(xì)胞專用培養(yǎng)基，若使用通用培養(yǎng)基，需添加合適的生長因子、血清等補(bǔ)充成分（如成纖維細(xì)胞添加FGF，內(nèi)皮細(xì)胞添加VEGF）
血清濃度：原代細(xì)胞培養(yǎng)血清濃度一般為10%-20%，部分特殊細(xì)胞（如神經(jīng)細(xì)胞）需使用無血清培養(yǎng)基
培養(yǎng)環(huán)境控制
溫度：哺乳動物細(xì)胞一般為37℃，鳥類細(xì)胞38.5℃，昆蟲細(xì)胞27℃
CO?濃度：大多數(shù)細(xì)胞需要5%CO?，維持培養(yǎng)基pH在7.2-7.4之間
濕度：培養(yǎng)箱濕度保持在70%-80%，避免培養(yǎng)基蒸發(fā)過快
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通用注意事項(xiàng)：
無菌操作：所有操作全程在超凈臺內(nèi)進(jìn)行，定期對超凈臺、培養(yǎng)箱進(jìn)行消毒，使用無菌的培養(yǎng)基、血清、試劑
細(xì)胞狀態(tài)監(jiān)測：每天觀察細(xì)胞形態(tài)、密度、顏色變化，記錄生長情況，若發(fā)現(xiàn)細(xì)胞出現(xiàn)污染、形態(tài)異常、生長緩慢等問題，及時處理
培養(yǎng)基更換：原代細(xì)胞培養(yǎng)初期每2-3天更換一次培養(yǎng)基，傳代后每1-2天更換一次，根據(jù)培養(yǎng)基顏色變化（變黃表示營養(yǎng)耗盡）靈活調(diào)整
避免過度操作：原代細(xì)胞較為脆弱，避免頻繁吹打、離心，盡量減少對細(xì)胞的機(jī)械損傷
凍存?zhèn)浞荩涸?xì)胞分離成功后，及時凍存部分細(xì)胞作為備份，凍存液使用90%血清+10%DMSO，采用梯度降溫法凍存
關(guān)鍵字： 小鼠氣管上皮細(xì)胞;上皮細(xì)胞樣; 貼壁;
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