重組表達(dá)原理:
基因克隆?:從牛基因組中獲取CST3基因的編碼序列(對(duì)應(yīng)氨基酸31–148),插入含有啟動(dòng)子、篩選標(biāo)記和His標(biāo)簽序列的質(zhì)粒載體。
宿主表達(dá)?:將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化至E. coli(如BL21菌株),在IPTG誘導(dǎo)下啟動(dòng)蛋白表達(dá)。該系統(tǒng)成本低、表達(dá)效率高,適合大規(guī)模生產(chǎn)。
蛋白純化?:利用His標(biāo)簽與鎳柱親和層析結(jié)合,實(shí)現(xiàn)高純度(>95%)蛋白回收,再經(jīng)透析或凝膠過(guò)濾去除雜質(zhì)。
凍干保存?:加入海藻糖作為保護(hù)劑,凍干后可長(zhǎng)期穩(wěn)定儲(chǔ)存,復(fù)溶后保持天然構(gòu)象和生物活性。
產(chǎn)品概述:
Recombinant Human HLA F (HLA-F重組蛋白) 是通過(guò)基因工程技術(shù)(如在大腸桿菌或昆蟲(chóng)細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)中)生產(chǎn)的、與天然人源HLA-F蛋白結(jié)構(gòu)功能相似的蛋白質(zhì)。作為非經(jīng)典的I類(lèi)主要組織相容性復(fù)合體(MHC-I)分子,HLA-F能夠呈現(xiàn)非傳統(tǒng)長(zhǎng)度的肽段,并通過(guò)與自然殺傷細(xì)胞受體(如LIR1)相互作用,在調(diào)節(jié)妊娠、病毒感染及自身免疫性疾病等過(guò)程中發(fā)揮關(guān)鍵的免疫調(diào)控作用。該重組蛋白作為一種重要的科研工具,廣泛用于免疫學(xué)、腫瘤學(xué)及藥物開(kāi)發(fā)領(lǐng)域,特別是在研究母胎免疫耐受、NK細(xì)胞功能及病毒免疫逃
產(chǎn)品名 | Recombinant Human HLA F | 分子量 | 31.1 kDa |
表達(dá)區(qū)間 | 22-305 | 貨號(hào) | XG-DB2232 |
別名
CDA12, HLA 5.4, HLA class I histocompatibility antigen, alpha chain F, HLA class I molecule, HLA F antigen, HLA-CDA12, HLA-F, HLAF, HLAF_HUMAN, Leukocyte antigen F, MHC class I antigen F
宿主; E.Coli
表達(dá)區(qū)間; 22-305
分子量; 31.1 kDa
標(biāo)簽; N-terminal His Tag
純度; Greater than 95% as determined by SDS-PAGE
應(yīng)用; Western Blot, ELISA
性狀; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存儲(chǔ); The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.
使用前準(zhǔn)備:
離心處理?
凍干粉在運(yùn)輸過(guò)程中可能附著于管壁或管蓋,開(kāi)蓋前應(yīng)先進(jìn)行離心,確保粉末沉降至管底。
建議條件:3000–3500 rpm 離心 5 分鐘
若無(wú)高速離心機(jī),可適當(dāng)延長(zhǎng)低速離心時(shí)間
平衡溫度?
將凍干粉緩慢恢復(fù)至室溫(避免加熱加速溶解),防止因溫差導(dǎo)致管內(nèi)冷凝水影響蛋白穩(wěn)定性
溶解(Reconstitution)
溶解液選擇?
推薦使用無(wú)菌蒸餾水或 PBS(pH 7.4)進(jìn)行復(fù)溶
若用于細(xì)胞實(shí)驗(yàn),可選用含 0.1% BSA 的緩沖液以增強(qiáng)穩(wěn)定性
配制濃度?
將凍干粉溶解至終濃度 ?0.1–1.0 mg/mL?,此范圍適用于大多數(shù)實(shí)驗(yàn)場(chǎng)景
濃度過(guò)高可能導(dǎo)致蛋白聚集,過(guò)低則易失活
混勻方式?
使用移液槍頭輕輕吹打數(shù)次,或上下輕柔顛倒混勻
嚴(yán)禁使用渦旋振蕩器?,以免破壞蛋白空間結(jié)構(gòu),導(dǎo)致活性喪失
公司正在出售的產(chǎn)品:
炭疽毒素受體2 | 組織短鏈羥脂酰脫氫酶(HYDROXYACYL COA DEHYDROGENASE)活性比色法定量酶聯(lián)免疫試劑盒 |
磷酸化α型-過(guò)氧化酶活化增生受體 | 通用型甘油三酯(triglyceride)含量酶連續(xù)循環(huán)反應(yīng)比色法 |
法醫(yī)學(xué)基因組DNA萃取試劑專(zhuān)題 | ENDOPHILIN蛋白表達(dá)酶聯(lián)免疫試劑盒 |
細(xì)胞腺苷酸環(huán)化酶(Adenylate Cyclase)活性酶連續(xù)循環(huán)比色法定量pcr檢測(cè)試劑盒 | 冰凍切片磷脂尼羅紅(Nile Red)熒光染色試劑盒 |
細(xì)胞色素P450亞酶CYP2B6(EFC)活性熒光定量pcr檢測(cè)試劑盒 | 艾杜糖-2-硫酸酯酶抗體 |
谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶ω2 | K1826蛋白抗體 |
細(xì)胞JNK/SAPK蛋白表達(dá)比色法定量pcr檢測(cè)試劑盒 | 酵母多酚氧化酶(polyphenol oxidase;PPO)活性比色法定量pcr檢測(cè)試劑盒 |
血液維生素B1比色法定量pcr檢測(cè)試劑盒 | 純化線(xiàn)粒體可溶性總蛋白制備試劑盒 |
轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β2(TGFβ2) | EI2BL/MRI1蛋白抗體 |
鉀通道多聚體結(jié)構(gòu)域KCTD18 | 濾泡樹(shù)突細(xì)胞分泌蛋白抗體 |
PE標(biāo)記小鼠H-2D(D)單克隆 | 蛋白二硫異構(gòu)酶A6抗體 |
果蠅直接法PCR擴(kuò)增試劑盒 | Recombinant Human HLA F嗅覺(jué)受體52I2抗體 |
AF750標(biāo)記的NFkB誘導(dǎo)激酶抗體 | 26S蛋白酶調(diào)節(jié)亞型7抗體 |
注意事項(xiàng):
安全提示:僅限研究使用,避免接觸臨床樣本;操作時(shí)需佩戴防護(hù)裝備。
質(zhì)量控制:產(chǎn)品純度通過(guò)SDS-PAGE驗(yàn)證,確保生物活性穩(wěn)定;避免使用含硫柳汞等有毒物質(zhì)的試劑。
兼容性:適用于多種實(shí)驗(yàn)體系,但需優(yōu)化濃度以避免非特異性結(jié)合。
關(guān)鍵字: HLA F;31.1 kDa; 22-305;
上海西格生物有限公司于2019年6月18日成立。
西格生物專(zhuān)注于實(shí)驗(yàn)室和公共衛(wèi)生領(lǐng)域,利用互聯(lián)網(wǎng)、數(shù)據(jù)分析及自動(dòng)化技術(shù),包括實(shí)驗(yàn)室固定資產(chǎn)、儀器設(shè)備、生物樣本、化學(xué)品、試劑、配件耗材、環(huán)境、儀器自動(dòng)化和高通量篩選等一體化綜合管理平臺(tái)。不斷為各行業(yè)實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞生命學(xué)產(chǎn)品、技術(shù)服務(wù)、免疫學(xué)和分子學(xué)產(chǎn)品,截止至2024年5月,西格生物已為生命科學(xué)、檢驗(yàn)檢測(cè)、化工材料、科研院所、政府機(jī)構(gòu)多行業(yè)300余家知名客戶(hù)提供實(shí)驗(yàn)室完整解決方案。本著幫助用戶(hù)實(shí)現(xiàn)“讓科研場(chǎng)所更智能、讓科研人員更專(zhuān)注、讓科學(xué)服務(wù)更高效“的愿景,西格生物將繼續(xù)在實(shí)驗(yàn)室科研產(chǎn)品領(lǐng)域持續(xù)發(fā)力,更加重視本土化,建構(gòu)通用性高、適應(yīng)性好、模塊搭配靈活,能快速響應(yīng)客戶(hù)需求的產(chǎn)品。