重組蛋白生產(chǎn)流程:
通常包括以下幾個核心步驟:
基因克?。菏紫?,科學家需要獲取編碼目標蛋白的特定基因序列(目的基因)。
構建載體:將目的基因插入到一個被稱為“載體”的DNA分子中,這個載體就像是一個運輸工具,
能將目的基因送入宿主細胞并指導其表達。
轉入宿主:將構建好的重組載體導入選定的宿主細胞中,這個過程稱為“轉化”或“轉染”。
表達與培養(yǎng):宿主細胞在適宜的條件下進行大規(guī)模培養(yǎng),其自身的遺傳系統(tǒng)會讀取重組載體上的基因信息,開始大量生產(chǎn)目標蛋白。
純化:通過一系列復雜的生物化學方法(如層析技術),將目標重組蛋白從宿主細胞的眾多混合物中分離出來,以獲得高純度的產(chǎn)品。
產(chǎn)品概述:
Recombinant Human KRT15(重組人角蛋白15)是一種通過基因工程技術在大腸桿菌(E. coli)中表達的、帶有N端His標簽的人源蛋白,對應于Ala238-Ser450的特定結構域,分子量約為49.2 kDa。該蛋白屬于I型細胞骨架角蛋白家族,是構成上皮細胞中間絲的關鍵成分,主要在毛囊干細胞、基底角質形成細胞及部分腺上皮祖細胞中表達,與角蛋白5(KRT5)或角蛋白14(KRT14)配對形成異二聚體,維持上皮組織的結構完整性和機械穩(wěn)定性。
產(chǎn)品名 | Recombinant Human KRT15 | 分子量 | 32.4 KDa |
表達區(qū)間 | 350-456 | 貨號 | XG-DB2470 |
別名
CK 15, CK15, Cytokeratin 15, K15, K1CO, keratin 15, KRT15, KRTB
宿主; E.Coli
表達區(qū)間; 350-456
分子量; 32.4 KDa
標簽; N-terminal His-IF2DI Tag
純度; Greater than 95% as determined by SDS-PAGE
應用; Western Blot, ELISA
性狀; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存儲; The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.
操作要點:
電泳條件?:使用15% SDS-PAGE凝膠,以提高對小分子量蛋白(~13.4 kDa)的分辨率。
?轉膜參數(shù)?:采用濕轉法,100 V、60–90分鐘(4°C),使用PVDF膜(需甲醇預活化)。
?抗體選擇?:
一抗:抗CST3多克隆抗體(如兔源抗體),推薦稀釋比為1:1000。
二抗:HRP標記的山羊抗兔IgG,稀釋比1:10,000。
?顯色方式?:ECL化學發(fā)光法,預期條帶位于?~13.4 kDa?處。
?內參建議?:由于CST3分子量較小,可選用GAPDH(~37 kDa)或β-actin(~42 kDa)作為內參,避免條帶重疊。
注意事項:
?安全提示?: 操作時需佩戴手套和護目鏡,遵循實驗室生物安全規(guī)范。
安全提示:僅限研究使用,避免接觸臨床樣本;操作時需佩戴防護裝備。
質量控制:產(chǎn)品純度通過SDS-PAGE驗證,確保生物活性穩(wěn)定;避免使用含硫柳汞等有毒物質的試劑。
兼容性:適用于多種實驗體系,但需優(yōu)化濃度以避免非特異性結合。
公司正在出售的產(chǎn)品:
突觸核膜蛋白1 | ELISA完全制備試劑盒 |
FAM122C蛋白 | 載玻片細胞AKT蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡酶聯(lián)免疫試劑盒 |
腺病毒GFP穿梭載體 | TRAIL 蛋白免疫共沉淀分析試劑盒 |
果蠅細胞凍存試劑盒 | 臺桌清潔劑(飯桌、工作臺、學生課桌椅等)a |
細胞甘油激酶(Glycerol kinase)活性酶連續(xù)反應比色法定量pcr檢測試劑盒 | 腦蛋白239抗體 |
干擾素誘導35蛋白 | 低密度脂蛋白受體結構域蛋白2抗體 |
動物血小板線粒體可溶性總蛋白制備試劑盒 | HARTMAN固著液 |
同位素核酸(酶切產(chǎn)物)蛋白結合甲基化干擾足跡法分析試劑盒 | 細胞EPHA1激酶活性定量pcr檢測試劑盒(A/B/C) |
自噬相關蛋白1 | 異構核糖核蛋白E2抗體 |
甲基樣蛋白16 | APC標記人CD154單克隆抗體 |
PE標記人IL-6單克隆 | 磷酸泛酰半胱氨酸脫羧酶抗體 |
AF680標記的整合素αVβ5 | Recombinant Human KRT15α胰蛋白酶重鏈H4抗體 |
體液半乳糖總含量酶連續(xù)循環(huán)反應比色法定量檢測試劑盒 | KIAA0323蛋白抗體 |
關鍵字: KRT15;32.4 KDa; 350-456;
上海西格生物有限公司于2019年6月18日成立。
西格生物專注于實驗室和公共衛(wèi)生領域,利用互聯(lián)網(wǎng)、數(shù)據(jù)分析及自動化技術,包括實驗室固定資產(chǎn)、儀器設備、生物樣本、化學品、試劑、配件耗材、環(huán)境、儀器自動化和高通量篩選等一體化綜合管理平臺。不斷為各行業(yè)實驗室細胞生命學產(chǎn)品、技術服務、免疫學和分子學產(chǎn)品,截止至2024年5月,西格生物已為生命科學、檢驗檢測、化工材料、科研院所、政府機構多行業(yè)300余家知名客戶提供實驗室完整解決方案。本著幫助用戶實現(xiàn)“讓科研場所更智能、讓科研人員更專注、讓科學服務更高效“的愿景,西格生物將繼續(xù)在實驗室科研產(chǎn)品領域持續(xù)發(fā)力,更加重視本土化,建構通用性高、適應性好、模塊搭配靈活,能快速響應客戶需求的產(chǎn)品。