產(chǎn)品介紹：

該試劑盒主要用于臨床糞便或嘔吐物樣本中諾如病毒 GII 型的快速檢測，適用于醫(yī)療機構(gòu)、疾控中心及科研單位進行病原學診斷和流行病學調(diào)查。

諾如病毒是引起急性胃腸炎的主要病原體之一，其中 GII 型是全球范圍內(nèi)流行最廣泛的基因型。

?? 產(chǎn)品核心信息

檢測對象：諾如病毒 GII 型（Norovirus GII）RNA。

檢測原理：一步法熒光 RT-PCR（TaqMan 熒光探針法）。針對諾如病毒 GII 型基因組的高度保守區(qū)域（如 RNA 聚合酶區(qū)或衣殼蛋白區(qū)）設(shè)計特異性引物和探針。

熒光通道：通常為 FAM 通道（檢測 GII 型靶標）。部分試劑盒可能包含內(nèi)標通道（如 VIC/HEX 通道），用于監(jiān)控樣本中是否存在 PCR 抑制物。

適用儀器：ABI 7500、LightCycler 480、Bio-Rad CFX96、羅氏 480、安捷倫 MX3000P 等實時熒光定量 PCR 儀。

檢測樣本：人糞便樣本、嘔吐物樣本或肛拭子洗脫液。酶液 (Enzyme Mix)  25 μL x 1 管  含逆轉(zhuǎn)錄酶 (RTase)、熱啟動 Taq 酶及 RNase 抑制劑

陽性質(zhì)控品 (PC)  50 μL x 1 管  含諾如病毒 GII 型目標基因片段的假病毒或質(zhì)粒（已知濃度）

陰性質(zhì)控品 (NC)  250 μL x 1 管  無 RNA 酶水（RNase-free Water）

?? 操作流程詳解

1. 樣本處理與 RNA 提取

糞便/嘔吐物樣本：取黃豆大?。s 100-200 mg）的糞便或嘔吐物，加入 800 μL 生理鹽水，劇烈振蕩混勻制成 10%-20% 的懸液。

離心處理：4℃ 下 8000 r/min 離心 5 分鐘，取上清液進行后續(xù)操作。

RNA 提?。?/span>

取 200 μL 上清液，使用病毒 RNA 提取試劑盒（離心柱法或磁珠法）進行提取。

洗脫步驟：加入 50-100 μL 洗脫緩沖液洗脫 RNA。

保存：提取的 RNA 應(yīng)盡快檢測，若需長期保存，應(yīng)置于 -70℃ 冰箱（避免反復凍融）。

?? 結(jié)果判讀標準

1. 質(zhì)控標準

陰性質(zhì)控品 (NC)：FAM 通道無擴增曲線（Ct 值未定義或 ≥40）。

陽性質(zhì)控品 (PC)：擴增曲線呈明顯的 "S" 型，且 Ct 值 ≤ 32。

2. 樣本判定

陽性 (+)：FAM 通道出現(xiàn)明顯的 "S" 型擴增曲線，且 Ct 值 ≤ 35。表明樣本中含有諾如病毒 GII 型 RNA。

可疑 (±)：Ct 值在 35-40 之間。建議對該樣本進行復檢，若復測 Ct 值 < 35 則判為陽性。

陰性 (-)：FAM 通道無擴增曲線，或 Ct 值 ≥ 40。

?? 注意事項

防污染：必須嚴格實行分區(qū)操作（試劑準備區(qū)、樣本制備區(qū)、擴增區(qū)），使用帶濾芯的槍頭，防止氣溶膠污染導致假陽性。

RNA 酶防護：諾如病毒是 RNA 病毒，極易降解。操作時必須佩戴口罩、手套，使用無 RNA 酶的耗材。

樣本處理：糞便樣本成分復雜，含有大量 PCR 抑制物（如膽紅素、多糖），高質(zhì)量的 RNA 提取是實驗成功的關(guān)鍵。

臨床意義：檢測結(jié)果需結(jié)合患者的臨床癥狀（如嘔吐、腹瀉、腹痛等）及流行病學背景進行綜合判斷。陽性結(jié)果僅表明檢出病毒核酸，需結(jié)合臨床表現(xiàn)確診。

公司正在出售的產(chǎn)品：

注意事項

防污染操作

需在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)、擴增區(qū)獨立操作，使用帶濾芯吸頭及專用實驗服。

陽性對照管理

濃度高達1×10?拷貝/μL，需單獨存放并避免污染其他試劑。

局限性

僅限科研使用，不可用于臨床診斷；

環(huán)境樣本中可能存在PCR抑制劑，需設(shè)置內(nèi)參對照。