輔酶ⅠNAD(H)含量測試盒
商品屬性:
產(chǎn)品名稱
| 輔酶ⅠNAD(H)含量測試盒 | 貨號 | AS63211 |
| 規(guī)格 | 100管/48樣、50管/24樣 | 品牌
| 撫生 |
| 檢測方法 | 微量法、可見分光光度法 | 用途 | 僅供科研實驗 |
測定意義:
輔酶ⅠNAD(H)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,NAD+是糖酵解(EMP)和三羧酸循環(huán)(TCA)
的主要氫受體,生成的NADH經(jīng)呼吸電子鏈(ETC)傳遞把電子交給氧,在合成ATP的同時,形成大量的ROS,
同時NADH再生為NAD+。糖、脂、蛋白質(zhì)三大代謝物質(zhì)分解中的氧化反應(yīng)絕大部分通過這一體系完成。NAD
(H)含量和NADH/NAD+比值的高低可用于評價糖酵解和TCA循環(huán)的強弱。較高的NAD(H)及NADH/NAD+比值
說明細(xì)胞呼吸耗氧量較高,處于過氧化狀態(tài)。此外,NADH/NAD+比值升高也可抑制糖酵解和TCA循環(huán)。另外,
NAD+降解產(chǎn)物對細(xì)胞信號傳導(dǎo)、代謝和基因表達(dá)等具有重要的調(diào)控作用。
測定原理:
分別用酸性和堿性提取液提取樣品中NAD+和NADH,NADH通過PMS的遞氫作用,還原氧化型噻唑藍(lán)(MTT)
為甲瓚,在570nm下檢測吸光值;而NAD+可被乙醇脫氫酶還原為NADH,進(jìn)一步采用MTT還原法檢測。
需自備的儀器和用品
可見分光光度計、臺式離心機、移液器、1 mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
核心功能:
輔酶Ⅰ(NAD)作為糖酵解和三羧酸循環(huán)中的主要氫受體,其總量及 NADH/NAD+ 比值直接反映細(xì)胞的能量
代謝狀態(tài)和氧化還原平衡。
?代謝評估?:較高的 NAD(H) 含量及比值通常意味著細(xì)胞呼吸耗氧量高,處于活躍代謝或過氧化狀態(tài)。
?疾病關(guān)聯(lián)?:該指標(biāo)與細(xì)胞抗衰老、抗氧化能力及多種代謝性疾病的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān),體內(nèi)含量降低往往提示細(xì)
胞損傷或衰亡。
?信號調(diào)控?:NAD+ 的降解產(chǎn)物在細(xì)胞信號傳導(dǎo)和基因表達(dá)調(diào)控中扮演重要角色。
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主流檢測方法與原理:
?1. 比色法(可見分光光度法/酶標(biāo)儀法)?
這是目前實驗室最常用的方法,操作相對簡便,無需大型儀器。
?原理?:利用酸性和堿性提取液分別提取 NAD+ 和 NADH。NADH 通過 PMS 遞氫,將氧化型噻唑藍(lán)(MTT)
還原為甲瓚,在 570nm 波長下檢測吸光值;NAD+ 則先被乙醇脫氫酶還原為 NADH,再進(jìn)行上述反應(yīng)。
?適用場景?:適用于大多數(shù)常規(guī)生化實驗室,成本較低,通量較高。
?所需設(shè)備?:可見分光光度計或酶標(biāo)儀、離心機、水浴鍋等。
?2. 高效液相色譜法(HPLC)?
?原理?:利用 NAD 和 NADH 在 254nm 紫外光下的特征吸收峰,通過色譜柱分離后直接測定含量。
?優(yōu)勢?:特異性強,能更精準(zhǔn)地分離干擾物質(zhì),適合對精度要求極高的研究。
?所需設(shè)備?:高效液相色譜儀、C18 色譜柱、溶劑抽濾裝置等專業(yè)設(shè)備。
關(guān)鍵字: 輔酶ⅠNAD;H;含量測試盒;
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