大鼠腦血管成纖維細胞
產(chǎn)品信息：
產(chǎn)品名稱 大鼠腦血管成纖維細胞
組織來源 正常腦組織
種屬 大鼠
產(chǎn)品規(guī)格 5×10^5Cells/T25
英文名稱 | Primary cerebral vascular fibroblasts in rats | 規(guī)格 | 5×105 |
細胞形態(tài) | 長梭形細胞，不規(guī)則細胞 | 貨號 | P-X1711 |
細胞簡介：
細胞詳述
腦血管是由內(nèi)膜、中層彈力層和外膜構成，三層緊密貼合在一起。其中，外膜是專門的支持組織，由結締組織組成，主要成分是成纖維細胞，其在血管炎癥反應、血管重塑等方面發(fā)揮重要作用。
細胞特性
1） 組織來源于實驗動物的正常腦組織。
2） 細胞鑒定：波形蛋白（Vimentin）免疫熒光染色為陽性。
3） 經(jīng)鑒定細胞純度高于90%。
4） 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。
5） 細胞生長方式：長梭形細胞，不規(guī)則細胞，貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基：
我們推薦使用 Delf原代 成纖維 細胞培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
產(chǎn)品定義：
大鼠腦血管成纖維細胞是存在于大鼠腦血管外膜中的成纖維細胞，呈梭形或星形。它主要負責合成和分泌膠原蛋白、彈性蛋白等細胞外基質(zhì)，維持腦血管外膜的結構完整性，同時在腦血管損傷、炎癥及動脈粥樣硬化過程中可被激活，參與血管壁的重構和纖維化過程。
原代細胞傳代：
傳代時機判斷
細胞匯合度達到80%-90%時進行傳代，避免細胞過度匯合導致接觸抑制，影響增殖能力
觀察細胞狀態(tài)：細胞形態(tài)正常，無明顯漂浮、污染跡象
消化環(huán)節(jié)控制
消化前準備：吸出舊培養(yǎng)基，用PBS輕輕沖洗細胞1-2次，去除血清（血清會抑制胰蛋白酶活性）
消化液選擇：同原代分離，根據(jù)細胞類型選擇合適的消化酶，胰蛋白酶消化時間一般為1-5分鐘，膠原酶消化時間為10-30分鐘
消化終止：顯微鏡下觀察到細胞回縮變圓、間隙增大時，立即加入含血清的培養(yǎng)基終止消化，血清濃度不低于10%
細胞吹打：用移液器輕輕吹打細胞，避免過度用力導致細胞破裂，吹打次數(shù)一般為10-15次
傳代比例控制
傳代比例根據(jù)細胞生長速度調(diào)整：生長速度快的細胞（如成纖維細胞）可按1:3-1:6傳代，生長速度慢的細胞（如內(nèi)皮細胞、神經(jīng)細胞）按1:2傳代
首次傳代比例可適當提高（如1:2），待細胞適應體外培養(yǎng)環(huán)境后再調(diào)整為常規(guī)比例
傳代后培養(yǎng)
接種后輕輕晃動培養(yǎng)瓶，使細胞均勻分布，放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)
24小時內(nèi)不要晃動培養(yǎng)瓶，避免細胞貼壁不牢
培養(yǎng)24-48小時后觀察細胞貼壁情況，更換新鮮培養(yǎng)基，去除未貼壁的死細胞和細胞碎片
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細胞分離與接種：
酶消化的“度”：酶液濃度和消化時間需精準控制，如胰蛋白酶濃度通常為0.25%，消化時間5-15分鐘（根據(jù)組織類型調(diào)整），消化期間每隔3-5分鐘輕輕晃動容器，鏡下觀察到細胞變圓、間隙增大時，立即加入含血清的培養(yǎng)基終止消化。
吹打力度適中：用巴氏吸管吹打細胞懸液時，避免用力過猛產(chǎn)生大量氣泡，以吹打后細胞懸液呈均勻霧狀為宜，一般吹打10-15次即可，過度吹打會導致細胞膜破裂。
接種密度適配：根據(jù)細胞增殖速度調(diào)整接種密度，增殖快的細胞（如成纖維細胞）可適當降低密度，增殖慢的細胞（如神經(jīng)元）需提高接種密度，確保細胞能相互支持生長。
關鍵字： 大鼠腦血管成纖維細胞;長梭形細胞，不規(guī)則細胞;貼壁;
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