大鼠內(nèi)皮祖細(xì)胞
產(chǎn)品信息：
產(chǎn)品名稱 大鼠內(nèi)皮祖細(xì)胞
組織來源 正常骨髓血組織
種屬 大鼠
產(chǎn)品規(guī)格 5×10^5Cells/T25
英文名稱 | Rat primary endothelial progenitor cells | 規(guī)格 | 5×105 |
細(xì)胞形態(tài) | 梭狀，不規(guī)則細(xì)胞 | 貨號 | P-X1687 |
細(xì)胞簡介：
細(xì)胞詳述
內(nèi)皮祖細(xì)胞是血管內(nèi)皮細(xì)胞的前體細(xì)胞 ,在生理或病理因素刺激下,可從骨髓動員到外周血參與損傷血管的修復(fù)研究顯示,內(nèi)皮祖細(xì)胞在心腦血管ji病、外周血管ji病、腫瘤血管形成及創(chuàng)傷yu合等方面均發(fā)揮重要作用，并為缺血性ji病的研究zhi療提供了新思路。
內(nèi)皮祖細(xì)胞具有游走特性，能進(jìn)一步增殖分化的幼稚內(nèi)皮細(xì)胞，缺乏成熟內(nèi)皮細(xì)胞的特征性表型，不能形成管腔樣結(jié)構(gòu)。其功能主要為參與了出生后缺血組織的血管發(fā)生和血管損傷后的修復(fù)。
細(xì)胞特性
1)組織來源于實(shí)驗(yàn)動物的正常骨髓血組織。
2)細(xì)胞鑒定：CD31或CD34免疫熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
5)細(xì)胞生長方式：梭狀，不規(guī)則細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基：
我們推薦使用 Delf原代 內(nèi)皮 細(xì)胞培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
產(chǎn)品定義：
大鼠內(nèi)皮祖細(xì)胞是存在于大鼠骨髓、外周血及臍帶血等組織中的一種內(nèi)皮前體細(xì)胞，具有自我更新和分化為成熟內(nèi)皮細(xì)胞的能力。它可參與胚胎期血管的發(fā)生和成年期血管的損傷修復(fù)，在缺血性疾病的血管再生、腫瘤血管生成及心血管疾病治療研究中具有重要應(yīng)用價值。
原代細(xì)胞分離：
組織取材
無菌操作是底線：取材前對動物/組織進(jìn)行嚴(yán)格消毒，全程在超凈臺內(nèi)操作，所有工具提前滅菌
新鮮度決定活性：取材后立即放入預(yù)冷的含雙抗的PBS中，30分鐘內(nèi)完成分離，若無法即時處理，可暫存于4℃冰箱（不超過24小時）
精準(zhǔn)取材：避開血管、脂肪、結(jié)締組織等非目標(biāo)組織，比如分離肝細(xì)胞時要剔除膽囊，分離神經(jīng)細(xì)胞時要去除腦膜
組織處理
機(jī)械法：通過剪碎、研磨、過濾等方式分散組織，適用于結(jié)締組織較少的組織（如肝臟、腎臟），注意力度適中，避免過度研磨損傷細(xì)胞
酶解法：根據(jù)組織類型選擇合適的酶：
胰蛋白酶：適用于消化上皮組織、肝、腎等，濃度0.25%-0.5%，消化時間15-30分鐘，37℃
膠原酶：適用于消化結(jié)締組織、脂肪組織、肌肉組織等，濃度0.1%-0.3%，消化時間1-4小時，37℃，可加入EDTA增強(qiáng)效果
透明質(zhì)酸酶：常與膠原酶聯(lián)用，消化軟骨、滑膜等富含透明質(zhì)酸的組織
聯(lián)合法：機(jī)械剪碎后再進(jìn)行酶解，兼顧效率與細(xì)胞活性
細(xì)胞篩選與純化
過濾：使用200-400目細(xì)胞篩過濾細(xì)胞懸液，去除未消化的組織塊
離心：800-1200RPM離心5-8分鐘，棄上清后用PBS重洗2-3次，去除細(xì)胞碎片和酶液
特異性純化：使用差速貼壁法（利用不同細(xì)胞貼壁速度差異）、密度梯度離心法（如Percoll、Ficoll）、免疫磁珠分選或流式細(xì)胞術(shù)，獲得高純度目標(biāo)細(xì)胞
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實(shí)驗(yàn)后處理：
廢棄樣本處理：
細(xì)胞廢棄物消毒：實(shí)驗(yàn)后的培養(yǎng)基、細(xì)胞懸液需用含有效氯的消毒液處理30分鐘后再排放，培養(yǎng)瓶、吸管等耗材需高壓滅菌后丟棄。
動物組織處理：剩余的動物組織需放入專用的生物危害垃圾袋，由專業(yè)機(jī)構(gòu)進(jìn)行無害化處理，避免生物污染。
實(shí)驗(yàn)設(shè)備清潔：
超凈工作臺清潔：實(shí)驗(yàn)結(jié)束后用75%酒精擦拭臺面，打開紫外燈照射30分鐘，關(guān)閉風(fēng)機(jī)。
培養(yǎng)箱定期清潔：每周用75%酒精擦拭培養(yǎng)箱內(nèi)壁和隔板，每2周更換一次培養(yǎng)箱內(nèi)的水盤，避免滋生細(xì)菌。
關(guān)鍵字： 大鼠內(nèi)皮祖細(xì)胞;梭狀，不規(guī)則細(xì)胞;貼壁;
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