大鼠腎足細胞
產(chǎn)品信息：
產(chǎn)品名稱 大鼠腎足細胞
組織來源 正常腎臟組織
種屬 大鼠
產(chǎn)品規(guī)格 5×10^5Cells/T25
英文名稱 | Rat renal podocyte | 規(guī)格 | 5×105 |
細胞形態(tài) | 不規(guī)則，含足突細胞 | 貨號 | P-X1590 |
細胞簡介：
細胞詳述
腎小球為血液過濾器，腎小球毛xi血管壁構(gòu)成過濾膜。腎小球過濾膜從內(nèi)到外有三層結(jié)構(gòu)：內(nèi)層為內(nèi)皮、中層為腎小球基膜、外層為上皮細胞層，上皮細胞又稱足細胞，其不規(guī)則突起稱足突，其間有許多狹小間隙，血液經(jīng)濾膜過濾后，濾液入腎小球囊。在正常情況下，血液中絕大部分蛋白質(zhì)不能濾過而保留于血液中，僅小分子物質(zhì)如尿素、葡萄糖、電解質(zhì)及某些小分子蛋白能濾過。
腎足細胞即腎小球上皮細胞，它附著于腎小球基底膜的外側(cè)，連同腎小球基底膜和腎小球基膜一起構(gòu)成了腎小球血液濾過屏障。又由于正常成年機體的腎臟足細胞是一種終末分化細胞，體外培養(yǎng)的原代細胞不能增殖。
足細胞呈星型多突狀，胞體較大，由胞體伸出許多突起，呈指狀交叉覆蓋于腎小球基底膜外表面，并通過黏附分子和蛋白多糖分子與腎小球基底膜相連。足細胞在正常情況下可以分泌腎小球基底膜的主要組成成分 IV型膠原和纖維連接蛋白,在促腎纖維化引資等刺激下還能分泌具有降解腎小球基底膜作用的基質(zhì)金屬蛋白酶和組織蛋白酶，從而在腎小球基底膜的代謝平衡中發(fā)揮重要作用。
細胞特性
1)細胞來源于實驗動物正常腎臟組織。
2)細胞鑒定：廣譜角蛋白（PCK）或WT-1（Wilm'sTumorProtein）免疫熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。
5)細胞生長方式：不規(guī)則，含足突細胞，貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基：
我們推薦使用 Delf 原代腎足 細胞 培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
產(chǎn)品定義：
大鼠腎足細胞是存在于大鼠腎小球臟層上皮細胞的一種特殊細胞，其胞體伸出許多足突，與腎小球毛細血管內(nèi)皮細胞及基底膜共同構(gòu)成腎小球濾過屏障。足突之間的裂孔膜可阻止蛋白質(zhì)等大分子物質(zhì)濾過，在腎小球濾過功能中發(fā)揮關(guān)鍵作用，是研究腎小球腎炎、腎病綜合征及腎功能衰竭發(fā)病機制的重要細胞模型。
原代細胞傳代：
傳代時機判斷
細胞匯合度達到80%-90%時進行傳代，避免細胞過度匯合導致接觸抑制，影響增殖能力
觀察細胞狀態(tài)：細胞形態(tài)正常，無明顯漂浮、污染跡象
消化環(huán)節(jié)控制
消化前準備：吸出舊培養(yǎng)基，用PBS輕輕沖洗細胞1-2次，去除血清（血清會抑制胰蛋白酶活性）
消化液選擇：同原代分離，根據(jù)細胞類型選擇合適的消化酶，胰蛋白酶消化時間一般為1-5分鐘，膠原酶消化時間為10-30分鐘
消化終止：顯微鏡下觀察到細胞回縮變圓、間隙增大時，立即加入含血清的培養(yǎng)基終止消化，血清濃度不低于10%
細胞吹打：用移液器輕輕吹打細胞，避免過度用力導致細胞破裂，吹打次數(shù)一般為10-15次
傳代比例控制
傳代比例根據(jù)細胞生長速度調(diào)整：生長速度快的細胞（如成纖維細胞）可按1:3-1:6傳代，生長速度慢的細胞（如內(nèi)皮細胞、神經(jīng)細胞）按1:2傳代
首次傳代比例可適當提高（如1:2），待細胞適應(yīng)體外培養(yǎng)環(huán)境后再調(diào)整為常規(guī)比例
傳代后培養(yǎng)
接種后輕輕晃動培養(yǎng)瓶，使細胞均勻分布，放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)
24小時內(nèi)不要晃動培養(yǎng)瓶，避免細胞貼壁不牢
培養(yǎng)24-48小時后觀察細胞貼壁情況，更換新鮮培養(yǎng)基，去除未貼壁的死細胞和細胞碎片
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細胞分離與接種：
酶消化的“度”：酶液濃度和消化時間需精準控制，如胰蛋白酶濃度通常為0.25%，消化時間5-15分鐘（根據(jù)組織類型調(diào)整），消化期間每隔3-5分鐘輕輕晃動容器，鏡下觀察到細胞變圓、間隙增大時，立即加入含血清的培養(yǎng)基終止消化。
吹打力度適中：用巴氏吸管吹打細胞懸液時，避免用力過猛產(chǎn)生大量氣泡，以吹打后細胞懸液呈均勻霧狀為宜，一般吹打10-15次即可，過度吹打會導致細胞膜破裂。
接種密度適配：根據(jù)細胞增殖速度調(diào)整接種密度，增殖快的細胞（如成纖維細胞）可適當降低密度，增殖慢的細胞（如神經(jīng)元）需提高接種密度，確保細胞能相互支持生長。
關(guān)鍵字： 大鼠腎足細胞;不規(guī)則，含足突細胞; 貼壁;
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