大鼠纖維環(huán)細(xì)胞
產(chǎn)品信息：
產(chǎn)品名稱 大鼠纖維環(huán)細(xì)胞
組織來(lái)源 正常椎間盤組織
種屬 大鼠
產(chǎn)品規(guī)格 5×10^5Cells/T25
英文名稱 | Rat annulus fibrosus cell | 規(guī)格 | 5×105 |
細(xì)胞形態(tài) | 多角形細(xì)胞，不規(guī)則細(xì)胞 | 貨號(hào) | P-X1652 |
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
細(xì)胞詳述
纖維環(huán)，位于椎間盤的周緣部，由纖維軟骨組成，纖維環(huán)的纖維在椎體間斜行，在橫切面上排列成同心環(huán)狀，相鄰環(huán)的纖維具有相反的斜度，而相互交叉。纖維環(huán)細(xì)胞位于膠原纖維束之前，合成和分泌纖維環(huán)細(xì)胞外基質(zhì)，維持正常的纖維環(huán)結(jié)構(gòu)和功能。
細(xì)胞特性
1)組織來(lái)源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常椎間盤組織。
2)細(xì)胞鑒定：Ⅱ型膠原(Collagen Ⅱ)或Ⅰ型膠原(Collagen Ⅰ)免疫熒光染色為陽(yáng)性。
3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
5)細(xì)胞生長(zhǎng)方式：多角形細(xì)胞，不規(guī)則細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基：
我們推薦使用 Delf 原代軟骨 細(xì)胞 培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
產(chǎn)品定義：
大鼠纖維環(huán)細(xì)胞是存在于大鼠椎間盤纖維環(huán)中的軟骨樣細(xì)胞，呈扁平狀或梭形。它可合成和分泌膠原蛋白、蛋白多糖等細(xì)胞外基質(zhì)，維持纖維環(huán)的結(jié)構(gòu)和力學(xué)性能，限制髓核的突出，在脊柱的運(yùn)動(dòng)和壓力緩沖中發(fā)揮重要作用，是研究椎間盤退變、腰椎間盤突出癥及椎間盤組織工程的重要細(xì)胞模型。
原代細(xì)胞分離：
組織樣本處理：取材后立即置于預(yù)冷的含抗生素的PBS或組織保存液中，避免樣本干燥和溫度變化；修剪時(shí)去除壞死、結(jié)締組織等雜質(zhì)，盡量減小組織塊體積以提高消化效率。
消化方法選擇：
酶消化法：根據(jù)組織類型選對(duì)應(yīng)酶（如胰蛋白酶用于上皮類組織、膠原酶用于結(jié)締組織豐富的組織），嚴(yán)格控制消化溫度（通常37℃）和時(shí)間，每隔5-10分鐘鏡下觀察，避免過度消化損傷細(xì)胞。
機(jī)械分離法：適合柔軟組織（如腦、肝臟），通過剪碎、吹打、過濾等方式分散細(xì)胞，操作時(shí)動(dòng)作輕柔，減少細(xì)胞機(jī)械損傷。
細(xì)胞過濾與離心：用合適孔徑的細(xì)胞篩（如100-200目）過濾細(xì)胞懸液，去除未消化的組織塊；離心轉(zhuǎn)速通常為1000-1500rpm，時(shí)間5-10分鐘，避免高速離心導(dǎo)致細(xì)胞破裂。
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細(xì)胞消化與傳代：
方法一：利多卡因消化法
吸出培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞1次
添加1ml 12mM利多卡因消化液，輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶使液體覆蓋瓶底，37℃溫浴3-5分鐘
顯微鏡下觀察到細(xì)胞回縮變圓后，加入5ml完全培養(yǎng)基稀釋消化液
輕輕吹打混勻細(xì)胞，1200rpm離心5分鐘，棄上清后用完全培養(yǎng)基重懸接種
方法二：胰酶消化法
若利多卡因消化效果不佳，可更換為0.25%胰蛋白酶-EDTA消化液，重復(fù)上述操作，消化時(shí)間控制在1-2分鐘
方法三：細(xì)胞刮取法
若細(xì)胞仍無(wú)法消化，加入3ml完全培養(yǎng)基終止消化，用無(wú)菌細(xì)胞刮輕輕刮取細(xì)胞（此方法易造成細(xì)胞機(jī)械損傷，不推薦）
關(guān)鍵字： 大鼠纖維環(huán)細(xì)胞;上皮細(xì)胞樣; 貼壁;
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