產品定義：

大鼠DRG神經元細胞即大鼠背根神經節(jié)神經元細胞，是位于大鼠脊髓背根神經節(jié)中的初級感覺神經元。它負責將外周組織的痛覺、溫度覺、觸覺等感覺信號傳遞至脊髓和大腦，同時也參與外周傷害性刺激的感知和調控，是研究痛覺傳導機制、神經病理性疼痛發(fā)病機制及鎮(zhèn)痛藥物篩選的重要細胞模型。

產品簡介：

細胞詳述

DRG為軀體內臟初級感覺zhong樞，富含周圍神經系統(tǒng)感覺神經元。

神經元是構成神經系統(tǒng)結構和功能的基本單位。神經元具有長突起，由細胞體和細胞突起構成。

細胞特性

1） 組織來源于實驗動物的正常脊髓組織。

2） 細胞鑒定：NSE免疫熒光染色為陽性。

3） 經鑒定細胞純度高于90%。

4） 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。

5） 細胞生長方式：不規(guī)則細胞，貼壁培養(yǎng)。

推薦培養(yǎng)基：

我們推薦使用 Delf原代 神經元 細胞培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
原代細胞分離：

組織取材

無菌操作是底線：取材前對動物/組織進行嚴格消毒，全程在超凈臺內操作，所有工具提前滅菌

新鮮度決定活性：取材后立即放入預冷的含雙抗的PBS中，30分鐘內完成分離，若無法即時處理，可暫存于4℃冰箱（不超過24小時）

精準取材：避開血管、脂肪、結締組織等非目標組織，比如分離肝細胞時要剔除膽囊，分離神經細胞時要去除腦膜

組織處理

機械法：通過剪碎、研磨、過濾等方式分散組織，適用于結締組織較少的組織（如肝臟、腎臟），注意力度適中，避免過度研磨損傷細胞

酶解法：根據(jù)組織類型選擇合適的酶：

胰蛋白酶：適用于消化上皮組織、肝、腎等，濃度0.25%-0.5%，消化時間15-30分鐘，37℃

膠原酶：適用于消化結締組織、脂肪組織、肌肉組織等，濃度0.1%-0.3%，消化時間1-4小時，37℃，可加入EDTA增強效果

透明質酸酶：常與膠原酶聯(lián)用，消化軟骨、滑膜等富含透明質酸的組織

聯(lián)合法：機械剪碎后再進行酶解，兼顧效率與細胞活性

細胞篩選與純化

過濾：使用200-400目細胞篩過濾細胞懸液，去除未消化的組織塊

離心：800-1200RPM離心5-8分鐘，棄上清后用PBS重洗2-3次，去除細胞碎片和酶液

特異性純化：使用差速貼壁法（利用不同細胞貼壁速度差異）、密度梯度離心法（如Percoll、Ficoll）、免疫磁珠分選或流式細胞術，獲得高純度目標細胞
原代細胞實驗注意事項：

取材要快、要新鮮、全程無菌

組織離體時間越短越好，冰上操作，減少缺血損傷。

嚴格控制細胞代數(shù)

原代細胞只建議用 P0～P3，代數(shù)越高越容易分化、結果越不可靠。

接種密度寧高不低

原代細胞普遍怕稀，太稀不貼壁、不生長、容易凋亡。

消化是關鍵，寧輕勿重

胰酶 / 膠原酶只消化到細胞變圓就終止，過度消化必死一批。

吹打輕柔，避免機械損傷。

培養(yǎng)基和血清不要隨便換批次

血清、基礎培養(yǎng)基、添加因子固定廠家固定批次，換批次必須先預實驗。

避免頻繁折騰細胞

少開培養(yǎng)箱門，不反復觀察、不反復拿進拿出，溫度、pH 波動對原代殺傷極大。

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