產(chǎn)品定義：

大鼠鼓膜上皮干細胞是存在于大鼠鼓膜上皮層中的成體干細胞，具有自我更新和分化能力。它可分化為鼓膜的扁平上皮細胞和立方上皮細胞，維持鼓膜上皮的正常結(jié)構(gòu)和功能，在鼓膜損傷后可增殖分化參與鼓膜的修復(fù)過程，是研究鼓膜再生機制及鼓膜損傷修復(fù)的重要細胞模型。

產(chǎn)品簡介：

細胞詳述

鼓膜也稱耳膜，為一彈性灰白色半透明薄膜，將外耳道與中耳隔開。鼓膜穿孔不能yu合，可能與干細胞受損或增殖抑制有關(guān)。鼓膜上皮干細胞的分布與鼓膜的血供豐富的區(qū)域一致。

鼓膜上皮干細胞高表達 β1整合素，有很強的黏附型，對Ⅳ型膠原的黏附鼻其他細胞更快、更強。

細胞特性

1)組織來源于實驗動物的正常鼓膜組織。

2)細胞鑒定：廣譜角蛋白(PCK)免疫熒光染色為陽性。

3)經(jīng)鑒定細胞純度高于90%。

4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。

5)細胞生長方式：鋪路石狀細胞，不規(guī)則細胞，貼壁培養(yǎng)。

推薦培養(yǎng)基：

我們推薦使用 Delf原代 上皮 細胞培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
原代細胞培養(yǎng)：

培養(yǎng)基選擇：根據(jù)細胞類型選擇專用培養(yǎng)基，如上皮細胞用上皮細胞培養(yǎng)基、成纖維細胞用成纖維細胞培養(yǎng)基，必要時添加血清（胎牛血清FBS常用，濃度10%-20%）、生長因子、抗生素等補充成分；培養(yǎng)基使用前需預(yù)熱至37℃。

接種密度控制：原代細胞接種密度不宜過低，否則細胞難以分泌足夠的自分泌因子支持生長，一般接種密度為1×10?-5×10?細胞/cm2；接種后輕輕晃動培養(yǎng)瓶，使細胞均勻分布。

培養(yǎng)環(huán)境監(jiān)控：保持培養(yǎng)箱內(nèi)37℃、5%CO?的恒定環(huán)境，定期檢查培養(yǎng)基顏色變化（變黃說明pH下降，需及時換液）；原代細胞貼壁前避免頻繁晃動培養(yǎng)瓶，貼壁后通常每2-3天換液一次。
原代細胞分離：

組織樣本處理：取材后立即置于預(yù)冷的含抗生素的PBS或組織保存液中，避免樣本干燥和溫度變化；修剪時去除壞死、結(jié)締組織等雜質(zhì)，盡量減小組織塊體積以提高消化效率。

消化方法選擇：

酶消化法：根據(jù)組織類型選對應(yīng)酶（如胰蛋白酶用于上皮類組織、膠原酶用于結(jié)締組織豐富的組織），嚴格控制消化溫度（通常37℃）和時間，每隔5-10分鐘鏡下觀察，避免過度消化損傷細胞。

機械分離法：適合柔軟組織（如腦、肝臟），通過剪碎、吹打、過濾等方式分散細胞，操作時動作輕柔，減少細胞機械損傷。

細胞過濾與離心：用合適孔徑的細胞篩（如100-200目）過濾細胞懸液，去除未消化的組織塊；離心轉(zhuǎn)速通常為1000-1500rpm，時間5-10分鐘，避免高速離心導(dǎo)致細胞破裂。

公司正在出售的產(chǎn)品：