重組蛋白生產(chǎn)流程:
通常包括以下幾個核心步驟:
基因克?。菏紫?,科學(xué)家需要獲取編碼目標(biāo)蛋白的特定基因序列(目的基因)。
構(gòu)建載體:將目的基因插入到一個被稱為“載體”的DNA分子中,這個載體就像是一個運(yùn)輸工具,
能將目的基因送入宿主細(xì)胞并指導(dǎo)其表達(dá)。
轉(zhuǎn)入宿主:將構(gòu)建好的重組載體導(dǎo)入選定的宿主細(xì)胞中,這個過程稱為“轉(zhuǎn)化”或“轉(zhuǎn)染”。
表達(dá)與培養(yǎng):宿主細(xì)胞在適宜的條件下進(jìn)行大規(guī)模培養(yǎng),其自身的遺傳系統(tǒng)會讀取重組載體上的基因信息,開始大量生產(chǎn)目標(biāo)蛋白。
純化:通過一系列復(fù)雜的生物化學(xué)方法(如層析技術(shù)),將目標(biāo)重組蛋白從宿主細(xì)胞的眾多混合物中分離出來,以獲得高純度的產(chǎn)品。
產(chǎn)品概述:
該蛋白屬于MOB1/phocein家族,是Hippo信號通路中的核心調(diào)控因子,在控制器官大小和抑制腫瘤發(fā)生中發(fā)揮關(guān)鍵作用。其主要功能是作為支架蛋白和激活劑,與上游激酶MST1/2(STK4/3)協(xié)同作用,磷酸化并激活下游核心激酶LATS1/2,進(jìn)而導(dǎo)致YAP1癌蛋白和TAZ的磷酸化與失活,從而限制細(xì)胞增殖并促進(jìn)凋亡。此外,MOB1A還能刺激STK38/NDR1和STK38L/NDR2的激酶活性,參與調(diào)控細(xì)胞周期和有絲分裂。研究表明,MOB1A的表達(dá)異?;蚬δ苋笔c多種癌癥的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)。
產(chǎn)品名稱; Recombinant Human Mob1A
別名; B1, Mps One Binder kinase activator like 1B (yeast), C2orf6, Chromosome 2 open reading frame 6, FLJ10788, FLJ11595, MATS1, MOB kinase activator 1A, MOB1, Mob1 alpha, Mob1 homolog 1B, MOB1 Mps One Binder homolog A, MOB1 Mps One Binder kinase activator like 1B, Mob1A, MOB4B, Mob4B protein, MOBK1B, Mobkl1b, MOL1B_HUMAN, Mps one binder kinase activator like 1B, Mps one binder kinase activator-like 1B
宿主; E.Coli
表達(dá)區(qū)間; 1-216
分子量; 23.7 kDa
標(biāo)簽; N-terminal His Tag
純度; Greater than 95% as determined by SDS-PAGE
應(yīng)用; Western Blot, ELISA
性狀; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存儲; The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.
操作要點:
電泳條件?:使用15% SDS-PAGE凝膠,以提高對小分子量蛋白(~13.4 kDa)的分辨率。
?轉(zhuǎn)膜參數(shù)?:采用濕轉(zhuǎn)法,100 V、60–90分鐘(4°C),使用PVDF膜(需甲醇預(yù)活化)。
?抗體選擇?:
一抗:抗CST3多克隆抗體(如兔源抗體),推薦稀釋比為1:1000。
二抗:HRP標(biāo)記的山羊抗兔IgG,稀釋比1:10,000。
?顯色方式?:ECL化學(xué)發(fā)光法,預(yù)期條帶位于?~13.4 kDa?處。
?內(nèi)參建議?:由于CST3分子量較小,可選用GAPDH(~37 kDa)或β-actin(~42 kDa)作為內(nèi)參,避免條帶重疊。
注意事項:
?安全提示?: 操作時需佩戴手套和護(hù)目鏡,遵循實驗室生物安全規(guī)范。
安全提示:僅限研究使用,避免接觸臨床樣本;操作時需佩戴防護(hù)裝備。
質(zhì)量控制:產(chǎn)品純度通過SDS-PAGE驗證,確保生物活性穩(wěn)定;避免使用含硫柳汞等有毒物質(zhì)的試劑。
兼容性:適用于多種實驗體系,但需優(yōu)化濃度以避免非特異性結(jié)合。
公司正在出售的產(chǎn)品:
肽酰甘氨酸2羥化酶 | 植物磷脂酶D2(Phospholipase D2)活性熒光定量酶聯(lián)免疫試劑盒 |
磷酸化半胱氨酸蛋白酶9 | 體液鎂離子(Mg)濃度酶反應(yīng)光譜法定量酶聯(lián)免疫試劑盒 |
動物毛發(fā)DNA萃取試劑盒 | PARKIN蛋白表達(dá)酶聯(lián)免疫試劑盒 |
細(xì)胞溶酶體脂酶(酸性脂酶)活性比色法定量pcr檢測試劑盒 | 體液D-葡萄糖激酶法定量酶聯(lián)免疫試劑盒 |
細(xì)胞色素P450亞酶CYP2C9(CEC)活性熒光定量pcr檢測試劑盒 | γ氨基丁酸轉(zhuǎn)氨酶抗體 |
谷胱甘肽過氧化酶2 | MAGEG1抗體 |
冰凍切片組織CASPASE-5蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡pcr檢測試劑盒 | 體液基質(zhì)金屬(MMP)總活性比色法定量pcr檢測試劑盒 |
通用型半胱(cysteine)含量高效液相色譜法定量pcr檢測試劑盒 | 動物硬組織線粒體可溶性總蛋白制備試劑盒 |
轉(zhuǎn)錄因子HES2 | FITC標(biāo)記人CD16單克隆抗體 |
堿性磷酸酶(胎盤型) | 鳥苷酸激酶GMK抗體 |
PE標(biāo)記小鼠FOXP3單克隆 | 蛋白激酶LYK5抗體 |
植物葉片原生質(zhì)細(xì)胞分離試劑盒 | Recombinant Human Mob1A抑癌基因Rbms3抗體 |
14號染色體開放閱讀框130抗體 | 9號染色體開放閱讀框41抗體 |
關(guān)鍵字: Mob1A;23.7 kDa; 1-216;
上海西格生物有限公司于2019年6月18日成立。
西格生物專注于實驗室和公共衛(wèi)生領(lǐng)域,利用互聯(lián)網(wǎng)、數(shù)據(jù)分析及自動化技術(shù),包括實驗室固定資產(chǎn)、儀器設(shè)備、生物樣本、化學(xué)品、試劑、配件耗材、環(huán)境、儀器自動化和高通量篩選等一體化綜合管理平臺。不斷為各行業(yè)實驗室細(xì)胞生命學(xué)產(chǎn)品、技術(shù)服務(wù)、免疫學(xué)和分子學(xué)產(chǎn)品,截止至2024年5月,西格生物已為生命科學(xué)、檢驗檢測、化工材料、科研院所、政府機(jī)構(gòu)多行業(yè)300余家知名客戶提供實驗室完整解決方案。本著幫助用戶實現(xiàn)“讓科研場所更智能、讓科研人員更專注、讓科學(xué)服務(wù)更高效“的愿景,西格生物將繼續(xù)在實驗室科研產(chǎn)品領(lǐng)域持續(xù)發(fā)力,更加重視本土化,建構(gòu)通用性高、適應(yīng)性好、模塊搭配靈活,能快速響應(yīng)客戶需求的產(chǎn)品。