操作要點(diǎn)：

電泳條件?：使用15% SDS-PAGE凝膠，以提高對(duì)小分子量蛋白（~13.4 kDa）的分辨率。

?轉(zhuǎn)膜參數(shù)?：采用濕轉(zhuǎn)法，100 V、60–90分鐘（4°C），使用PVDF膜（需甲醇預(yù)活化）。

?抗體選擇?：

一抗：抗CST3多克隆抗體（如兔源抗體），推薦稀釋比為1:1000。

二抗：HRP標(biāo)記的山羊抗兔IgG，稀釋比1:10,000。

?顯色方式?：ECL化學(xué)發(fā)光法，預(yù)期條帶位于?~13.4 kDa?處。

?內(nèi)參建議?：由于CST3分子量較小，可選用GAPDH（~37 kDa）或β-actin（~42 kDa）作為內(nèi)參，避免條帶重疊。

產(chǎn)品概述：

該蛋白是線粒體大核糖體亞基（mtLSU）的關(guān)鍵結(jié)構(gòu)成分，主要定位于線粒體內(nèi)膜，作為核糖體結(jié)構(gòu)蛋白參與線粒體翻譯過(guò)程中的蛋白質(zhì)結(jié)合與組裝。其核心功能是參與構(gòu)建線粒體核糖體，確保線粒體內(nèi)膜上遺傳信息的準(zhǔn)確翻譯，這對(duì)于維持線粒體氧化磷酸化系統(tǒng)的正常運(yùn)作和細(xì)胞能量（ATP）供應(yīng)至關(guān)重要。作為線粒體生物合成與維持通路的重要組成部分，MRPL1的表達(dá)水平或功能異?？赡苡绊懢€粒體的整體功能。

別名

39S ribosomal protein L1, 39S ribosomal protein L1, mitochondrial precursor, BM022, L1mt, mitochondrial, Mitochondrial ribosomal protein L1, MRP L1, MRP-L1, Mrpl1, RM01_HUMAN

宿主; E.Coli

表達(dá)區(qū)間; 51-325

分子量; 30.1 kDa

標(biāo)簽; N-terminal His Tag

純度; Greater than 95% as determined by SDS-PAGE

應(yīng)用; Western Blot, ELISA

性狀; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4

溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex

存儲(chǔ); The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.

使用說(shuō)明：

復(fù)溶方法?: 使用無(wú)菌蒸餾水或PBS緩沖液（pH 7.4）溶解凍干粉，輕輕混勻至完全溶解。

?應(yīng)用建議?:

?實(shí)驗(yàn)用途?: 適用于Western Blot、ELISA等檢測(cè)，作為抗原或標(biāo)準(zhǔn)品。

?濃度調(diào)整?: 根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求稀釋?zhuān)苊飧邼舛葘?dǎo)致非特異性結(jié)合。

?安全提示?: 操作時(shí)需佩戴手套和護(hù)目鏡，遵循實(shí)驗(yàn)室生物安全規(guī)范。

重組表達(dá)原理：

基因克隆?：從?；蚪M中獲取CST3基因的編碼序列（對(duì)應(yīng)氨基酸31–148），插入含有啟動(dòng)子、篩選標(biāo)記和His標(biāo)簽序列的質(zhì)粒載體。

?宿主表達(dá)?：將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化至E. coli（如BL21菌株），在IPTG誘導(dǎo)下啟動(dòng)蛋白表達(dá)。該系統(tǒng)成本低、表達(dá)效率高，適合大規(guī)模生產(chǎn)。

?蛋白純化?：利用His標(biāo)簽與鎳柱親和層析結(jié)合，實(shí)現(xiàn)高純度（>95%）蛋白回收，再經(jīng)透析或凝膠過(guò)濾去除雜質(zhì)。

?凍干保存?：加入海藻糖作為保護(hù)劑，凍干后可長(zhǎng)期穩(wěn)定儲(chǔ)存，復(fù)溶后保持天然構(gòu)象和生物活性。

公司正在出售的產(chǎn)品：

重組蛋白生產(chǎn)流程：

通常包括以下幾個(gè)核心步驟：

基因克?。菏紫?，科學(xué)家需要獲取編碼目標(biāo)蛋白的特定基因序列（目的基因）。

構(gòu)建載體：將目的基因插入到一個(gè)被稱(chēng)為“載體”的DNA分子中，這個(gè)載體就像是一個(gè)運(yùn)輸工具，

能將目的基因送入宿主細(xì)胞并指導(dǎo)其表達(dá)。

轉(zhuǎn)入宿主：將構(gòu)建好的重組載體導(dǎo)入選定的宿主細(xì)胞中，這個(gè)過(guò)程稱(chēng)為“轉(zhuǎn)化”或“轉(zhuǎn)染”。

表達(dá)與培養(yǎng)：宿主細(xì)胞在適宜的條件下進(jìn)行大規(guī)模培養(yǎng)，其自身的遺傳系統(tǒng)會(huì)讀取重組載體上的基因信息，開(kāi)始大量生產(chǎn)目標(biāo)蛋白。

純化：通過(guò)一系列復(fù)雜的生物化學(xué)方法（如層析技術(shù)），將目標(biāo)重組蛋白從宿主細(xì)胞的眾多混合物中分離出來(lái)，以獲得高純度的產(chǎn)品。