重組蛋白生產(chǎn)流程:
通常包括以下幾個(gè)核心步驟:
基因克?。菏紫?,科學(xué)家需要獲取編碼目標(biāo)蛋白的特定基因序列(目的基因)。
構(gòu)建載體:將目的基因插入到一個(gè)被稱為“載體”的DNA分子中,這個(gè)載體就像是一個(gè)運(yùn)輸工具,
能將目的基因送入宿主細(xì)胞并指導(dǎo)其表達(dá)。
轉(zhuǎn)入宿主:將構(gòu)建好的重組載體導(dǎo)入選定的宿主細(xì)胞中,這個(gè)過程稱為“轉(zhuǎn)化”或“轉(zhuǎn)染”。
表達(dá)與培養(yǎng):宿主細(xì)胞在適宜的條件下進(jìn)行大規(guī)模培養(yǎng),其自身的遺傳系統(tǒng)會(huì)讀取重組載體上的基因信息,開始大量生產(chǎn)目標(biāo)蛋白。
純化:通過一系列復(fù)雜的生物化學(xué)方法(如層析技術(shù)),將目標(biāo)重組蛋白從宿主細(xì)胞的眾多混合物中分離出來,以獲得高純度的產(chǎn)品。
產(chǎn)品概述:
該蛋白是 新生多肽相關(guān)復(fù)合物 (NAC) 的α亞基。NAC 是一種高度保守的異二聚體蛋白復(fù)合物,作為核糖體相關(guān)的分子伴侶,它是新生肽鏈從核糖體大亞基出口處遇到的第一個(gè)結(jié)合伴侶。其核心功能是保護(hù)新生肽鏈免受錯(cuò)誤折疊或降解,并調(diào)控新生肽鏈向內(nèi)質(zhì)網(wǎng)或線粒體的靶向轉(zhuǎn)運(yùn)。此外,NACA 還參與轉(zhuǎn)錄調(diào)控、細(xì)胞凋亡信號(hào)傳導(dǎo)(如 FADD 介導(dǎo)的通路)以及肌肉損傷修復(fù)等過程。在某些病毒性感染(如乙肝病毒)中,NACA 會(huì)與病毒蛋白相互作用,影響疾病進(jìn)程。
產(chǎn)品名稱; Recombinant Human NACA1
別名; Alpha NAC, Alpha-NAC, Hom s 2.02, HSD48, MGC117224, NAC-alpha, naca, NACA/1.9.2, NACA_HUMAN, NACA1, Nascent polypeptide associated complex alpha polypeptide, Nascent polypeptide associated complex alpha subunit, Nascent polypeptide associated complex subunit alpha, Nascent polypeptide-associated complex subunit alpha
宿主; E.Coli
表達(dá)區(qū)間; 1-215
分子量; 23.5 kDa
標(biāo)簽; N-terminal His Tag
純度; Greater than 95% as determined by SDS-PAGE
應(yīng)用; Western Blot, ELISA
性狀; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存儲(chǔ); The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.
操作要點(diǎn):
電泳條件?:使用15% SDS-PAGE凝膠,以提高對(duì)小分子量蛋白(~13.4 kDa)的分辨率。
?轉(zhuǎn)膜參數(shù)?:采用濕轉(zhuǎn)法,100 V、60–90分鐘(4°C),使用PVDF膜(需甲醇預(yù)活化)。
?抗體選擇?:
一抗:抗CST3多克隆抗體(如兔源抗體),推薦稀釋比為1:1000。
二抗:HRP標(biāo)記的山羊抗兔IgG,稀釋比1:10,000。
?顯色方式?:ECL化學(xué)發(fā)光法,預(yù)期條帶位于?~13.4 kDa?處。
?內(nèi)參建議?:由于CST3分子量較小,可選用GAPDH(~37 kDa)或β-actin(~42 kDa)作為內(nèi)參,避免條帶重疊。
注意事項(xiàng):
?安全提示?: 操作時(shí)需佩戴手套和護(hù)目鏡,遵循實(shí)驗(yàn)室生物安全規(guī)范。
安全提示:僅限研究使用,避免接觸臨床樣本;操作時(shí)需佩戴防護(hù)裝備。
質(zhì)量控制:產(chǎn)品純度通過SDS-PAGE驗(yàn)證,確保生物活性穩(wěn)定;避免使用含硫柳汞等有毒物質(zhì)的試劑。
兼容性:適用于多種實(shí)驗(yàn)體系,但需優(yōu)化濃度以避免非特異性結(jié)合。
公司正在出售的產(chǎn)品:
絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶MNB | 細(xì)菌西蒙(SIMMON)檸檬酸瓊脂平板 |
酪酪肽 | 全組織免疫熒光顯微鏡直接酶聯(lián)免疫試劑盒(含熒光一抗) |
食物甘素(dulcin)含量高效液相色譜法定量pcr檢測(cè)試劑盒 | 微管(microtubules)熒光染色試劑盒 |
組織SGK1激酶活性定量pcr檢測(cè)試劑盒(A/B/C) | 組織還原型甘肽(GSH)濃度高效液相色譜定量酶聯(lián)免疫試劑盒 |
植物總氨基酸含量熒光定量pcr檢測(cè)試劑盒 | WD重復(fù)膜蛋白61抗體 |
睪丸特異性蛋白57 | KMT5A單克隆抗體 |
細(xì)胞NF KAPPA B P65蛋白表達(dá)熒光定量pcr檢測(cè)試劑盒 | 組織PHKG2激酶活性定量pcr檢測(cè)試劑盒(A/B/C) |
體液賴(lysine)含量熒光定量pcr檢測(cè)試劑盒 | BrdU標(biāo)記法載玻片細(xì)胞繁殖NBT顯色pcr檢測(cè)試劑盒 |
組織相容性復(fù)合體蛋白1 | DMRT2蛋白抗體 |
肌細(xì)胞生成素 | 能量平衡相關(guān)蛋白抗體 |
RMND5B蛋白 | 程序性細(xì)胞死亡2樣抗體 |
裂解液VIII:細(xì)菌活性化蛋白制備溶液 | Recombinant Human NACA1嗅覺受體5V1抗體 |
PE標(biāo)記人CD8單克隆抗體 | 3-磷酸甘油醛脫氫酶(內(nèi)參)單克隆抗體 |
關(guān)鍵字: NACA1;23.5 kDa; 1-215;
上海西格生物有限公司于2019年6月18日成立。
西格生物專注于實(shí)驗(yàn)室和公共衛(wèi)生領(lǐng)域,利用互聯(lián)網(wǎng)、數(shù)據(jù)分析及自動(dòng)化技術(shù),包括實(shí)驗(yàn)室固定資產(chǎn)、儀器設(shè)備、生物樣本、化學(xué)品、試劑、配件耗材、環(huán)境、儀器自動(dòng)化和高通量篩選等一體化綜合管理平臺(tái)。不斷為各行業(yè)實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞生命學(xué)產(chǎn)品、技術(shù)服務(wù)、免疫學(xué)和分子學(xué)產(chǎn)品,截止至2024年5月,西格生物已為生命科學(xué)、檢驗(yàn)檢測(cè)、化工材料、科研院所、政府機(jī)構(gòu)多行業(yè)300余家知名客戶提供實(shí)驗(yàn)室完整解決方案。本著幫助用戶實(shí)現(xiàn)“讓科研場(chǎng)所更智能、讓科研人員更專注、讓科學(xué)服務(wù)更高效“的愿景,西格生物將繼續(xù)在實(shí)驗(yàn)室科研產(chǎn)品領(lǐng)域持續(xù)發(fā)力,更加重視本土化,建構(gòu)通用性高、適應(yīng)性好、模塊搭配靈活,能快速響應(yīng)客戶需求的產(chǎn)品。