重組蛋白（Recombinant Protein）：
是指利用重組DNA或RNA技術，在體外人工制造的蛋白質(zhì)。
這項技術通過將編碼特定目標蛋白的基因片段，插入到重組表達載體中，然后導入宿主細胞（如細菌、酵母、哺乳動物細胞等），
利用宿主細胞的“蛋白質(zhì)工廠”來生產(chǎn)出大量的、具有特定生物學活性的蛋白質(zhì)。
產(chǎn)品概述：
重組人中性粒細胞胞質(zhì)因子1（NCF1）是一種在大腸桿菌表達系統(tǒng)中制備的重組蛋白，由編碼Met1-Val390的基因表達純化而來。作為NADPH氧化酶（NOX2）復合體的關鍵胞質(zhì)亞基，NCF1在調(diào)節(jié)活性氧（ROS）的產(chǎn)生中發(fā)揮核心作用，對先天免疫、宿主防御以及炎癥反應的調(diào)控至關重要。該蛋白純度超過95%，以凍干粉形式提供，主要用于相關免疫學與炎癥機制的研究。
產(chǎn)品名 | Recombinant Human NCF1 | 分子量 | 42.8 kDa |
表達區(qū)間 | 1-390 | 貨號 | XG-DB2732 |
別名
47 kDa autosomal chronic granulomatous disease protein, 47 kDa neutrophil oxidase factor, NADPH oxidase organizer 2, NCF 47K, NCF-1, NCF-47K, Ncf1, NCF1_HUMAN, Neutrophil cytosol factor 1, Neutrophil cytosolic factor 1, neutrophil cytosolic factor 1, (chronic granulomatous disease, autosomal 1), Neutrophil NADPH oxidase factor 1, Nox organizer 2, Nox organizing protein 2, Nox-organizing protein 2
宿主; E.Coli
表達區(qū)間; 1-390
分子量; 42.8 kDa
標簽; N-terminal His Tag
純度; Greater than 95% as determined by SDS-PAGE
應用; Western Blot, ELISA
性狀; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存儲; The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.
使用說明：
復溶方法?: 使用無菌蒸餾水或PBS緩沖液（pH 7.4）溶解凍干粉，輕輕混勻至完全溶解。
?應用建議?:
?實驗用途?: 適用于Western Blot、ELISA等檢測，作為抗原或標準品。
?濃度調(diào)整?: 根據(jù)實驗需求稀釋，避免高濃度導致非特異性結(jié)合。
?安全提示?: 操作時需佩戴手套和護目鏡，遵循實驗室生物安全規(guī)范。
重組表達原理：
基因克隆?：從?；蚪M中獲取CST3基因的編碼序列（對應氨基酸31–148），插入含有啟動子、篩選標記和His標簽序列的質(zhì)粒載體。
?宿主表達?：將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化至E. coli（如BL21菌株），在IPTG誘導下啟動蛋白表達。該系統(tǒng)成本低、表達效率高，適合大規(guī)模生產(chǎn)。
?蛋白純化?：利用His標簽與鎳柱親和層析結(jié)合，實現(xiàn)高純度（>95%）蛋白回收，再經(jīng)透析或凝膠過濾去除雜質(zhì)。
?凍干保存?：加入海藻糖作為保護劑，凍干后可長期穩(wěn)定儲存，復溶后保持天然構象和生物活性。
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操作要點：
電泳條件?：使用15% SDS-PAGE凝膠，以提高對小分子量蛋白（~13.4 kDa）的分辨率。
?轉(zhuǎn)膜參數(shù)?：采用濕轉(zhuǎn)法，100 V、60–90分鐘（4°C），使用PVDF膜（需甲醇預活化）。
?抗體選擇?：
一抗：抗CST3多克隆抗體（如兔源抗體），推薦稀釋比為1:1000。
二抗：HRP標記的山羊抗兔IgG，稀釋比1:10,000。
?顯色方式?：ECL化學發(fā)光法，預期條帶位于?~13.4 kDa?處。
?內(nèi)參建議?：由于CST3分子量較小，可選用GAPDH（~37 kDa）或β-actin（~42 kDa）作為內(nèi)參，避免條帶重疊。
存儲條件：
凍干狀態(tài)?: 存儲于-20°C以下，可穩(wěn)定保存長達12個月。
?復溶后?: 在2-8°C下可保存1個月，需保持無菌環(huán)境。
?注意事項?: 避免反復凍融，以防止蛋白降解或活性損失。
關鍵字： NCF1;42.8 kDa; 1-390;
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西格生物專注于實驗室和公共衛(wèi)生領域，利用互聯(lián)網(wǎng)、數(shù)據(jù)分析及自動化技術，包括實驗室固定資產(chǎn)、儀器設備、生物樣本、化學品、試劑、配件耗材、環(huán)境、儀器自動化和高通量篩選等一體化綜合管理平臺。不斷為各行業(yè)實驗室細胞生命學產(chǎn)品、技術服務、免疫學和分子學產(chǎn)品，截止至2024年5月，西格生物已為生命科學、檢驗檢測、化工材料、科研院所、政府機構多行業(yè)300余家知名客戶提供實驗室完整解決方案。本著幫助用戶實現(xiàn)“讓科研場所更智能、讓科研人員更專注、讓科學服務更高效“的愿景，西格生物將繼續(xù)在實驗室科研產(chǎn)品領域持續(xù)發(fā)力，更加重視本土化，建構通用性高、適應性好、模塊搭配靈活，能快速響應客戶需求的產(chǎn)品。