重組蛋白生產(chǎn)流程:
通常包括以下幾個核心步驟:
基因克?。菏紫?,科學家需要獲取編碼目標蛋白的特定基因序列(目的基因)。
構(gòu)建載體:將目的基因插入到一個被稱為“載體”的DNA分子中,這個載體就像是一個運輸工具,
能將目的基因送入宿主細胞并指導其表達。
轉(zhuǎn)入宿主:將構(gòu)建好的重組載體導入選定的宿主細胞中,這個過程稱為“轉(zhuǎn)化”或“轉(zhuǎn)染”。
表達與培養(yǎng):宿主細胞在適宜的條件下進行大規(guī)模培養(yǎng),其自身的遺傳系統(tǒng)會讀取重組載體上的基因信息,開始大量生產(chǎn)目標蛋白。
純化:通過一系列復雜的生物化學方法(如層析技術(shù)),將目標重組蛋白從宿主細胞的眾多混合物中分離出來,以獲得高純度的產(chǎn)品。
產(chǎn)品概述:
重組人Neuroserpin(神經(jīng)絲氨酸蛋白酶抑制劑)是一種在大腸桿菌(E. coli)中表達的非糖基化重組蛋白,通常以無菌過濾的白色凍干粉形式提供。該蛋白由394個氨基酸殘基組成,分子量約為44.7 kDa,純度經(jīng)SDS-PAGE和HPLC分析驗證通常高于95%。作為絲氨酸蛋白酶抑制劑(serpin)家族的成員,Neuroserpin主要在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中表達,其核心功能是特異性抑制組織型纖溶酶原激活劑(tPA)的活性。它在海馬、大腦皮層等與學習記憶相關(guān)的突觸可塑性區(qū)域中發(fā)揮關(guān)鍵作用,參與調(diào)節(jié)神經(jīng)元的發(fā)育
產(chǎn)品名稱; Recombinant Human Neuroserpin
別名; DKFZp781N13156, Neuroserpin, NEUS_HUMAN, Peptidase inhibitor 12, PI-12, PI12, Protease inhibitor 12, Serine or cysteine proteinase inhibitor clade I (neuroserpin) member 1, Serine or cysteine proteinase inhibitor clade I member 1, Serpin I1, Serpin peptidase inhibitor clade I (neuroserpin) member 1, SERPINI1
宿主; E.Coli
表達區(qū)間; 17-410
分子量; 43.2 kDa
標簽; N-terminal His Tag
純度; Greater than 95% as determined by SDS-PAGE
應用; Western Blot, ELISA
性狀; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存儲; The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.
操作要點:
電泳條件?:使用15% SDS-PAGE凝膠,以提高對小分子量蛋白(~13.4 kDa)的分辨率。
?轉(zhuǎn)膜參數(shù)?:采用濕轉(zhuǎn)法,100 V、60–90分鐘(4°C),使用PVDF膜(需甲醇預活化)。
?抗體選擇?:
一抗:抗CST3多克隆抗體(如兔源抗體),推薦稀釋比為1:1000。
二抗:HRP標記的山羊抗兔IgG,稀釋比1:10,000。
?顯色方式?:ECL化學發(fā)光法,預期條帶位于?~13.4 kDa?處。
?內(nèi)參建議?:由于CST3分子量較小,可選用GAPDH(~37 kDa)或β-actin(~42 kDa)作為內(nèi)參,避免條帶重疊。
注意事項:
?安全提示?: 操作時需佩戴手套和護目鏡,遵循實驗室生物安全規(guī)范。
安全提示:僅限研究使用,避免接觸臨床樣本;操作時需佩戴防護裝備。
質(zhì)量控制:產(chǎn)品純度通過SDS-PAGE驗證,確保生物活性穩(wěn)定;避免使用含硫柳汞等有毒物質(zhì)的試劑。
兼容性:適用于多種實驗體系,但需優(yōu)化濃度以避免非特異性結(jié)合。
公司正在出售的產(chǎn)品:
拓撲異構(gòu)酶相關(guān)功能蛋白4-2 | DA高效液相色譜電化學定量酶聯(lián)免疫試劑盒 |
磷酸化FRA-1蛋白 | 體液α-活性CNPG3比色法定量酶聯(lián)免疫試劑盒 |
96孔板細胞基因組DNA分離試劑盒 | 載玻片細胞P21蛋白表達熒光顯微鏡酶聯(lián)免疫試劑盒 |
酵母P型ATP酶(P type ATPase)活性比色法定量pcr檢測試劑盒 | 細胞氧化型甘肽(GSSG)濃度高效液相色譜定量酶聯(lián)免疫試劑盒 |
植物硫氰酸酶(rhodanase)活性比色法定量pcr檢測試劑盒 | SRC有絲分裂相關(guān)蛋白68抗體 |
干擾素誘導35蛋白 | HECA蛋白抗體 |
載玻片細胞P38蛋白表達熒光顯微鏡pcr檢測試劑盒 | 細胞NLK激酶活性定量pcr檢測試劑盒(A/B/C) |
糖果糖精(saccharin)含量比色法定量pcr檢測試劑盒 | 細胞琥珀酸脫氫酶(SDH)活性比色法定量pcr檢測試劑盒 |
轉(zhuǎn)錄因子Gli3 | FBXW8蛋白抗體 |
活化的Notch1蛋白 | 尼曼匹克C1前體蛋白抗體 |
PerCP-Cy5.5標記人/小鼠CD11b單克隆 | 多聚腺苷酸結(jié)合蛋白4抗體 |
體液HSV1(HERPES SIMPLX1)病毒定性pcr檢測試劑盒 | Recombinant Human Neuroserpin原鈣粘蛋白γA2抗體 |
AF680標記的磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶α2抗體 | 4號染色體開放閱讀框29抗體 |
關(guān)鍵字: Neuroserpin;43.2 kDa; 17-410;
上海西格生物有限公司于2019年6月18日成立。
西格生物專注于實驗室和公共衛(wèi)生領域,利用互聯(lián)網(wǎng)、數(shù)據(jù)分析及自動化技術(shù),包括實驗室固定資產(chǎn)、儀器設備、生物樣本、化學品、試劑、配件耗材、環(huán)境、儀器自動化和高通量篩選等一體化綜合管理平臺。不斷為各行業(yè)實驗室細胞生命學產(chǎn)品、技術(shù)服務、免疫學和分子學產(chǎn)品,截止至2024年5月,西格生物已為生命科學、檢驗檢測、化工材料、科研院所、政府機構(gòu)多行業(yè)300余家知名客戶提供實驗室完整解決方案。本著幫助用戶實現(xiàn)“讓科研場所更智能、讓科研人員更專注、讓科學服務更高效“的愿景,西格生物將繼續(xù)在實驗室科研產(chǎn)品領域持續(xù)發(fā)力,更加重視本土化,建構(gòu)通用性高、適應性好、模塊搭配靈活,能快速響應客戶需求的產(chǎn)品。