重組表達(dá)原理:
基因克隆?:從?;蚪M中獲取CST3基因的編碼序列(對(duì)應(yīng)氨基酸31–148),插入含有啟動(dòng)子、篩選標(biāo)記和His標(biāo)簽序列的質(zhì)粒載體。
宿主表達(dá)?:將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化至E. coli(如BL21菌株),在IPTG誘導(dǎo)下啟動(dòng)蛋白表達(dá)。該系統(tǒng)成本低、表達(dá)效率高,適合大規(guī)模生產(chǎn)。
蛋白純化?:利用His標(biāo)簽與鎳柱親和層析結(jié)合,實(shí)現(xiàn)高純度(>95%)蛋白回收,再經(jīng)透析或凝膠過(guò)濾去除雜質(zhì)。
凍干保存?:加入海藻糖作為保護(hù)劑,凍干后可長(zhǎng)期穩(wěn)定儲(chǔ)存,復(fù)溶后保持天然構(gòu)象和生物活性。
產(chǎn)品概述:
NIK是非經(jīng)典NF-κB信號(hào)通路的核心調(diào)控激酶。其主要功能是響應(yīng)TNF受體超家族成員(如CD40、BAFF-R、LTβR)的刺激,磷酸化并激活I(lǐng)KKα復(fù)合物,進(jìn)而介導(dǎo)NF-κB2前體p100的磷酸化與蛋白水解加工,生成成熟的p52亞基。p52隨后與RelB形成二聚體轉(zhuǎn)入細(xì)胞核,調(diào)控涉及淋巴器官發(fā)生、B細(xì)胞成熟、骨代謝及免疫應(yīng)答等關(guān)鍵生物學(xué)過(guò)程的基因表達(dá)。此外,NIK還能激活MAPK通路(如MEK1/2和Erk1/2),在細(xì)胞增殖和腫瘤遷移中發(fā)揮作用。
產(chǎn)品名稱; Recombinant Human NIK
別名; FLH21957, HGK, HPK/GCK like kinase HGK, KIAA0687, MAP4K4, MEK kinase kinase 4, MEKKK 4, Nck interacting kinase, NIK
宿主; E.Coli
表達(dá)區(qū)間; 526-721
分子量; 42 KDa
標(biāo)簽; N-terminal His-IF2DI Tag
純度; Greater than 95% by SDS-PAGE gel analyses
應(yīng)用; Western Blot, ELISA
性狀; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存儲(chǔ); The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.
使用前準(zhǔn)備:
離心處理?
凍干粉在運(yùn)輸過(guò)程中可能附著于管壁或管蓋,開(kāi)蓋前應(yīng)先進(jìn)行離心,確保粉末沉降至管底。
建議條件:3000–3500 rpm 離心 5 分鐘
若無(wú)高速離心機(jī),可適當(dāng)延長(zhǎng)低速離心時(shí)間
平衡溫度?
將凍干粉緩慢恢復(fù)至室溫(避免加熱加速溶解),防止因溫差導(dǎo)致管內(nèi)冷凝水影響蛋白穩(wěn)定性
溶解(Reconstitution)
溶解液選擇?
推薦使用無(wú)菌蒸餾水或 PBS(pH 7.4)進(jìn)行復(fù)溶
若用于細(xì)胞實(shí)驗(yàn),可選用含 0.1% BSA 的緩沖液以增強(qiáng)穩(wěn)定性
配制濃度?
將凍干粉溶解至終濃度 ?0.1–1.0 mg/mL?,此范圍適用于大多數(shù)實(shí)驗(yàn)場(chǎng)景
濃度過(guò)高可能導(dǎo)致蛋白聚集,過(guò)低則易失活
混勻方式?
使用移液槍頭輕輕吹打數(shù)次,或上下輕柔顛倒混勻
嚴(yán)禁使用渦旋振蕩器?,以免破壞蛋白空間結(jié)構(gòu),導(dǎo)致活性喪失
公司正在出售的產(chǎn)品:
維甲酸相關(guān)孤兒受體γt | 細(xì)胞去甲基化處理試劑盒 |
DNA損傷誘導(dǎo)蛋白1 | 石蠟切片組織APC蛋白表達(dá)CDK2顯色光學(xué)顯微鏡酶聯(lián)免疫試劑盒 |
轉(zhuǎn)基因油菜(canola)RF3品系基因pcr檢測(cè)試劑盒 | 細(xì)胞PI-3 KINASE P110BETA蛋白表達(dá)比色法定量酶聯(lián)免疫試劑盒 |
M9培養(yǎng)基 | 可溶性包涵體蛋白復(fù)性(物理透析)試劑盒(10毫升純化蛋白) |
血液磷酸二酯酶(PDE)總活性熒光定量pcr檢測(cè)試劑盒 | 凝集素甘露糖結(jié)合蛋白2樣蛋白抗體 |
富含亮氨酸重復(fù)絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶1 | 凋亡誘導(dǎo)蛋白D抗體 |
活體細(xì)胞線粒體長(zhǎng)期跟蹤試劑盒 | 胱硫醚-γ-裂解酶(cystathionine γ-lyase;CGL)活性比色法定量pcr檢測(cè)試劑盒 |
糖果環(huán)(cyclamate)含量薄層色譜法定性pcr檢測(cè)試劑盒 | 組織Akt1/PKBa激酶活性定量pcr檢測(cè)試劑盒(A/B/C) |
轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白SEC23B | 液泡蛋白分選受體SORCS3抗體 |
雞馬立克氏病火雞皰疹病毒(HVT) | Bax單克隆抗體 |
Pacific Blue標(biāo)記小鼠CD103單克隆 | 柯薩奇病毒A16型3CD抗體 |
AF750標(biāo)記的抑制肌原調(diào)節(jié)蛋白1 | Recombinant Human NIKγ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶2重鏈抗體 |
HCV(HEPATITIS VIRUS C)病毒標(biāo)準(zhǔn)曲線定量PCR擴(kuò)增檢測(cè)試劑盒 | KIAA1456蛋白抗體 |
注意事項(xiàng):
安全提示:僅限研究使用,避免接觸臨床樣本;操作時(shí)需佩戴防護(hù)裝備。
質(zhì)量控制:產(chǎn)品純度通過(guò)SDS-PAGE驗(yàn)證,確保生物活性穩(wěn)定;避免使用含硫柳汞等有毒物質(zhì)的試劑。
兼容性:適用于多種實(shí)驗(yàn)體系,但需優(yōu)化濃度以避免非特異性結(jié)合。
關(guān)鍵字: NIK;42 KDa; 526-721;
上海西格生物有限公司于2019年6月18日成立。
西格生物專注于實(shí)驗(yàn)室和公共衛(wèi)生領(lǐng)域,利用互聯(lián)網(wǎng)、數(shù)據(jù)分析及自動(dòng)化技術(shù),包括實(shí)驗(yàn)室固定資產(chǎn)、儀器設(shè)備、生物樣本、化學(xué)品、試劑、配件耗材、環(huán)境、儀器自動(dòng)化和高通量篩選等一體化綜合管理平臺(tái)。不斷為各行業(yè)實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞生命學(xué)產(chǎn)品、技術(shù)服務(wù)、免疫學(xué)和分子學(xué)產(chǎn)品,截止至2024年5月,西格生物已為生命科學(xué)、檢驗(yàn)檢測(cè)、化工材料、科研院所、政府機(jī)構(gòu)多行業(yè)300余家知名客戶提供實(shí)驗(yàn)室完整解決方案。本著幫助用戶實(shí)現(xiàn)“讓科研場(chǎng)所更智能、讓科研人員更專注、讓科學(xué)服務(wù)更高效“的愿景,西格生物將繼續(xù)在實(shí)驗(yàn)室科研產(chǎn)品領(lǐng)域持續(xù)發(fā)力,更加重視本土化,建構(gòu)通用性高、適應(yīng)性好、模塊搭配靈活,能快速響應(yīng)客戶需求的產(chǎn)品。