重組表達原理:
基因克隆?:從?;蚪M中獲取CST3基因的編碼序列(對應(yīng)氨基酸31–148),插入含有啟動子、篩選標記和His標簽序列的質(zhì)粒載體。
宿主表達?:將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化至E. coli(如BL21菌株),在IPTG誘導下啟動蛋白表達。該系統(tǒng)成本低、表達效率高,適合大規(guī)模生產(chǎn)。
蛋白純化?:利用His標簽與鎳柱親和層析結(jié)合,實現(xiàn)高純度(>95%)蛋白回收,再經(jīng)透析或凝膠過濾去除雜質(zhì)。
凍干保存?:加入海藻糖作為保護劑,凍干后可長期穩(wěn)定儲存,復(fù)溶后保持天然構(gòu)象和生物活性。
產(chǎn)品概述:
Recombinant Human PAK2(重組人PAK2蛋白)是通過基因工程技術(shù)在昆蟲細胞(如Sf9)或大腸桿菌等宿主系統(tǒng)中表達并純化的人源p21激活激酶2(p21-activated kinase 2)。該蛋白通常帶有GST或His等親和標簽,為高純度的絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶,其分子量約為58-95 kDa(取決于標簽和剪接變體)。PAK2是Rho家族GTP酶Cdc42和Rac1的關(guān)鍵下游效應(yīng)分子,在細胞骨架重組、細胞遷移、增殖、存活及凋亡等多種信號通路中發(fā)揮核心調(diào)控作用;全長PAK2主要促進細胞生
產(chǎn)品名稱; Recombinant Human PAK2
別名; C-t-PAK2, CB422, EC 2.7.11.1, Gamma PAK, Gamma-PAK, hPAK65, Kinase, p21 (CDKN1A) activated kinase 2, p21 (CDKN1A)-activated kinase 2a, p21 activated kinase 2, p21 protein (Cdc42/Rac)-activated kinase 2, p21 protein Cdc42 Rac activated kinase 2, p21-activated kinase 2, p21-activated kinase, 65-KD, p21-activated protein kinase I, p21CDKN1A activated kinase 2, p27, p34, p58, p65PAK, PAK 2, PAK-2, PAK-2p34
宿主; E.Coli
表達區(qū)間; 227-524
分子量; 32.7 kDa
標簽; N-terminal His Tag
純度; Greater than 95% as determined by SDS-PAGE
應(yīng)用; Western Blot, ELISA
性狀; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存儲; The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.
使用前準備:
離心處理?
凍干粉在運輸過程中可能附著于管壁或管蓋,開蓋前應(yīng)先進行離心,確保粉末沉降至管底。
建議條件:3000–3500 rpm 離心 5 分鐘
若無高速離心機,可適當延長低速離心時間
平衡溫度?
將凍干粉緩慢恢復(fù)至室溫(避免加熱加速溶解),防止因溫差導致管內(nèi)冷凝水影響蛋白穩(wěn)定性
溶解(Reconstitution)
溶解液選擇?
推薦使用無菌蒸餾水或 PBS(pH 7.4)進行復(fù)溶
若用于細胞實驗,可選用含 0.1% BSA 的緩沖液以增強穩(wěn)定性
配制濃度?
將凍干粉溶解至終濃度 ?0.1–1.0 mg/mL?,此范圍適用于大多數(shù)實驗場景
濃度過高可能導致蛋白聚集,過低則易失活
混勻方式?
使用移液槍頭輕輕吹打數(shù)次,或上下輕柔顛倒混勻
嚴禁使用渦旋振蕩器?,以免破壞蛋白空間結(jié)構(gòu),導致活性喪失
公司正在出售的產(chǎn)品:
碳酸氫鈉協(xié)同轉(zhuǎn)運蛋白4-A4突變型 | 細胞D-葡萄糖激酶法定量酶聯(lián)免疫試劑盒 |
Fcγ免疫球蛋白IgG結(jié)合蛋白 | 載玻片細胞CASPASE-9蛋白表達熒光顯微鏡酶聯(lián)免疫試劑盒 |
細胞色素P450亞酶CYP3A4(BFCD)活性熒光定量pcr檢測試劑盒 | 細胞MAPK蛋白表達熒光定量酶聯(lián)免疫試劑盒 |
通用型WNV(WEST NILE)病毒定性pcr檢測試劑盒 | 肉類(folic acid)含量微生物比色法定量酶聯(lián)免疫試劑盒 |
無脊椎動物和昆蟲組織基質(zhì)金屬(MMP)總活性比色法定量pcr檢測試劑盒 | 貓眼綜合征染色體候選基因1抗體 |
骨巢蛋白 | 多巴胺、cAMP調(diào)節(jié)磷蛋白抗體 |
EDTA二鉀血液抗凝液 | 細胞尿素比色法定量pcr檢測試劑盒 |
石蠟切片DNA高質(zhì)純化試劑盒 | 組織腎素(renin)活性熒光定量pcr檢測試劑盒 |
軸突導向受體蛋白3 | 液泡蛋白分選蛋白35抗體 |
雞傳染性法氏囊病病毒(IBDV) | 9號染色體開放閱 |
RASGEF1C蛋白 | 磷酸化γ1氨基丁酸受體GABAA Rβ1抗體 |
細胞色素c氧化酶IV重組兔單克隆 | Recombinant Human PAK2癌癥亮氨酸拉鏈下調(diào)因子1樣蛋白抗體 |
細胞脂蛋白相關(guān)磷脂酶A2(LP PLA2)活性比色法定量檢測試劑盒 | JDP2蛋白抗體 |
注意事項:
安全提示:僅限研究使用,避免接觸臨床樣本;操作時需佩戴防護裝備。
質(zhì)量控制:產(chǎn)品純度通過SDS-PAGE驗證,確保生物活性穩(wěn)定;避免使用含硫柳汞等有毒物質(zhì)的試劑。
兼容性:適用于多種實驗體系,但需優(yōu)化濃度以避免非特異性結(jié)合。
關(guān)鍵字: PAK2;32.7 kDa; 227-524;
上海西格生物有限公司于2019年6月18日成立。
西格生物專注于實驗室和公共衛(wèi)生領(lǐng)域,利用互聯(lián)網(wǎng)、數(shù)據(jù)分析及自動化技術(shù),包括實驗室固定資產(chǎn)、儀器設(shè)備、生物樣本、化學品、試劑、配件耗材、環(huán)境、儀器自動化和高通量篩選等一體化綜合管理平臺。不斷為各行業(yè)實驗室細胞生命學產(chǎn)品、技術(shù)服務(wù)、免疫學和分子學產(chǎn)品,截止至2024年5月,西格生物已為生命科學、檢驗檢測、化工材料、科研院所、政府機構(gòu)多行業(yè)300余家知名客戶提供實驗室完整解決方案。本著幫助用戶實現(xiàn)“讓科研場所更智能、讓科研人員更專注、讓科學服務(wù)更高效“的愿景,西格生物將繼續(xù)在實驗室科研產(chǎn)品領(lǐng)域持續(xù)發(fā)力,更加重視本土化,建構(gòu)通用性高、適應(yīng)性好、模塊搭配靈活,能快速響應(yīng)客戶需求的產(chǎn)品。