操作要點：
電泳條件?：使用15% SDS-PAGE凝膠，以提高對小分子量蛋白（~13.4 kDa）的分辨率。
?轉(zhuǎn)膜參數(shù)?：采用濕轉(zhuǎn)法，100 V、60–90分鐘（4°C），使用PVDF膜（需甲醇預活化）。
?抗體選擇?：
一抗：抗CST3多克隆抗體（如兔源抗體），推薦稀釋比為1:1000。
二抗：HRP標記的山羊抗兔IgG，稀釋比1:10,000。
?顯色方式?：ECL化學發(fā)光法，預期條帶位于?~13.4 kDa?處。
?內(nèi)參建議?：由于CST3分子量較小，可選用GAPDH（~37 kDa）或β-actin（~42 kDa）作為內(nèi)參，避免條帶重疊。
產(chǎn)品概述：
Recombinant Human PITPNB（重組人磷脂酰肌醇轉(zhuǎn)運蛋白β，Phosphatidylinositol Transfer Protein, Beta）是利用基因工程技術(shù)在大腸桿菌（E. coli）中表達并純化的高純度人源蛋白。該蛋白通常包含N端His標簽，對應于人PITPNB的1-271氨基酸區(qū)域，分子量約為33.7 kDa，純度經(jīng)SDS-PAGE分析大于95%。
產(chǎn)品名 | Recombinant Human PITPNB | 分子量 | 29.7 kDa |
表達區(qū)間 | 1-271 | 貨號 | XG-DB3009 |
別名
OTTHUMP00000198846, OTTHUMP00000198847, Phosphatidylinositol transfer protein beta isoform, Phosphatidylinositol transfer protein, beta, PI TP beta, PI-TP-beta, PIPNB_HUMAN, Pitpnb, PtdIns transfer protein beta, PtdInsTP, PtdInsTP beta, VIB1B
宿主; E.Coli
表達區(qū)間; 1-271
分子量; 29.7 kDa
標簽; N-terminal His Tag
純度; Greater than 95% as determined by SDS-PAGE
應用; Western Blot, ELISA
性狀; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存儲; The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.
使用說明：
復溶方法?: 使用無菌蒸餾水或PBS緩沖液（pH 7.4）溶解凍干粉，輕輕混勻至完全溶解。
?應用建議?:
?實驗用途?: 適用于Western Blot、ELISA等檢測，作為抗原或標準品。
?濃度調(diào)整?: 根據(jù)實驗需求稀釋，避免高濃度導致非特異性結(jié)合。
?安全提示?: 操作時需佩戴手套和護目鏡，遵循實驗室生物安全規(guī)范。
重組表達原理：
基因克隆?：從?；蚪M中獲取CST3基因的編碼序列（對應氨基酸31–148），插入含有啟動子、篩選標記和His標簽序列的質(zhì)粒載體。
?宿主表達?：將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化至E. coli（如BL21菌株），在IPTG誘導下啟動蛋白表達。該系統(tǒng)成本低、表達效率高，適合大規(guī)模生產(chǎn)。
?蛋白純化?：利用His標簽與鎳柱親和層析結(jié)合，實現(xiàn)高純度（>95%）蛋白回收，再經(jīng)透析或凝膠過濾去除雜質(zhì)。
?凍干保存?：加入海藻糖作為保護劑，凍干后可長期穩(wěn)定儲存，復溶后保持天然構(gòu)象和生物活性。
公司正在出售的產(chǎn)品：
通用轉(zhuǎn)錄因子2H亞基2/TFIIH p44 | 冰凍切片組織L（CATHEPSIN L）活性原位熒光染色酶聯(lián)免疫試劑盒 |
ENPP3蛋白 | CASPASE-1蛋白表達西方雜交分析試劑盒 |
體外非細胞系統(tǒng)細胞色素P450亞酶2C19（S-MEPHENYTOIN） | 載玻片細胞RyR受體蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡酶聯(lián)免疫試劑盒 |
正常人體腎組織微粒體組分（5毫克/毫升） | 細胞精（arginine））含量化學比色法定量酶聯(lián)免疫試劑盒 |
體液基質(zhì)金屬（MMP-7）活性熒光定量pcr檢測試劑盒 | 氯離子通道蛋白2抗體 |
肝癌相關(guān)抗原hca25a | 蛋白酪氨酸激酶7抗體 |
通用型細胞培養(yǎng)污染性支原體屬鑒定16S rDNA | 冰凍切片肌腺苷酸脫氨酶（Myoadenylate deaminase）活性 |
鄰氨基卞啶酮（AMAC）熒光輔助糖蛋白電泳（FACE） | 組織組蛋白脫乙?；?/span>2（HDAC2）活性比色法定量pcr檢測試劑盒 |
周期素依賴性激酶10 | 載脂蛋白C4抗體 |
肌肉相關(guān)卷曲螺旋蛋白 | 8號染色體開放閱讀框59抗體 |
PE標記人CD103 (ITGAE)單克隆 | 離子通道蛋白Kv1.3抗體 |
AbBy Fluor? 647標記的小腦肽2 | Recombinant Human PITPNB白介素8抗體 |
（Vibrio cholerae）鑒定 | HDHD3蛋白抗體 |
重組蛋白生產(chǎn)流程：
通常包括以下幾個核心步驟：
基因克隆：首先，科學家需要獲取編碼目標蛋白的特定基因序列（目的基因）。
構(gòu)建載體：將目的基因插入到一個被稱為“載體”的DNA分子中，這個載體就像是一個運輸工具，
能將目的基因送入宿主細胞并指導其表達。
轉(zhuǎn)入宿主：將構(gòu)建好的重組載體導入選定的宿主細胞中，這個過程稱為“轉(zhuǎn)化”或“轉(zhuǎn)染”。
表達與培養(yǎng)：宿主細胞在適宜的條件下進行大規(guī)模培養(yǎng)，其自身的遺傳系統(tǒng)會讀取重組載體上的基因信息，開始大量生產(chǎn)目標蛋白。
純化：通過一系列復雜的生物化學方法（如層析技術(shù)），將目標重組蛋白從宿主細胞的眾多混合物中分離出來，以獲得高純度的產(chǎn)品。
關(guān)鍵字： PITPNB;29.7 kDa; 1-271;
上海西格生物有限公司于2019年6月18日成立。
西格生物專注于實驗室和公共衛(wèi)生領(lǐng)域，利用互聯(lián)網(wǎng)、數(shù)據(jù)分析及自動化技術(shù)，包括實驗室固定資產(chǎn)、儀器設備、生物樣本、化學品、試劑、配件耗材、環(huán)境、儀器自動化和高通量篩選等一體化綜合管理平臺。不斷為各行業(yè)實驗室細胞生命學產(chǎn)品、技術(shù)服務、免疫學和分子學產(chǎn)品，截止至2024年5月，西格生物已為生命科學、檢驗檢測、化工材料、科研院所、政府機構(gòu)多行業(yè)300余家知名客戶提供實驗室完整解決方案。本著幫助用戶實現(xiàn)“讓科研場所更智能、讓科研人員更專注、讓科學服務更高效“的愿景，西格生物將繼續(xù)在實驗室科研產(chǎn)品領(lǐng)域持續(xù)發(fā)力，更加重視本土化，建構(gòu)通用性高、適應性好、模塊搭配靈活，能快速響應客戶需求的產(chǎn)品。