重組蛋白生產(chǎn)流程:
通常包括以下幾個核心步驟:
基因克?。菏紫龋茖W家需要獲取編碼目標蛋白的特定基因序列(目的基因)。
構(gòu)建載體:將目的基因插入到一個被稱為“載體”的DNA分子中,這個載體就像是一個運輸工具,
能將目的基因送入宿主細胞并指導其表達。
轉(zhuǎn)入宿主:將構(gòu)建好的重組載體導入選定的宿主細胞中,這個過程稱為“轉(zhuǎn)化”或“轉(zhuǎn)染”。
表達與培養(yǎng):宿主細胞在適宜的條件下進行大規(guī)模培養(yǎng),其自身的遺傳系統(tǒng)會讀取重組載體上的基因信息,開始大量生產(chǎn)目標蛋白。
純化:通過一系列復雜的生物化學方法(如層析技術(shù)),將目標重組蛋白從宿主細胞的眾多混合物中分離出來,以獲得高純度的產(chǎn)品。
產(chǎn)品概述:
人源PMM2重組蛋白是一種在大腸桿菌(Escherichia coli)中表達、帶有C端6His標簽的人類全長蛋白(氨基酸1-246位)。該蛋白純度超過95%(經(jīng)還原性SDS-PAGE檢測),分子量約為13.4 kDa,以0.2 μm過濾溶液的形式提供,溶解于含三羥甲基氨基甲烷鹽酸鹽和氯化鈉的緩沖液中,內(nèi)毒素含量極低(<0.1 ng/μg),適用于ELISA、Western Blot、SDS-PAGE及質(zhì)譜分析等多種科研應(yīng)用。
產(chǎn)品名 | Recombinant Human PMM2 | 分子量 | 30.0 kDa |
表達區(qū)間 | 1-246 | 貨號 | XG-DB3031 |
別名
AI585868, BOS_22465, C86848, CDG 1, CDG1, CDG1a, CDGS, MGC127449, Phosphomannomutase 2, PMM 2, Pmm2, PMM2_HUMAN
宿主; E.Coli
表達區(qū)間; 1-246
分子量; 30.0 kDa
標簽; N-terminal His Tag
純度; Greater than 95% as determined by SDS-PAGE
應(yīng)用; Western Blot, ELISA
性狀; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存儲; The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.
操作要點:
電泳條件?:使用15% SDS-PAGE凝膠,以提高對小分子量蛋白(~13.4 kDa)的分辨率。
?轉(zhuǎn)膜參數(shù)?:采用濕轉(zhuǎn)法,100 V、60–90分鐘(4°C),使用PVDF膜(需甲醇預(yù)活化)。
?抗體選擇?:
一抗:抗CST3多克隆抗體(如兔源抗體),推薦稀釋比為1:1000。
二抗:HRP標記的山羊抗兔IgG,稀釋比1:10,000。
?顯色方式?:ECL化學發(fā)光法,預(yù)期條帶位于?~13.4 kDa?處。
?內(nèi)參建議?:由于CST3分子量較小,可選用GAPDH(~37 kDa)或β-actin(~42 kDa)作為內(nèi)參,避免條帶重疊。
注意事項:
?安全提示?: 操作時需佩戴手套和護目鏡,遵循實驗室生物安全規(guī)范。
安全提示:僅限研究使用,避免接觸臨床樣本;操作時需佩戴防護裝備。
質(zhì)量控制:產(chǎn)品純度通過SDS-PAGE驗證,確保生物活性穩(wěn)定;避免使用含硫柳汞等有毒物質(zhì)的試劑。
兼容性:適用于多種實驗體系,但需優(yōu)化濃度以避免非特異性結(jié)合。
公司正在出售的產(chǎn)品:
酸性核糖體磷蛋白大亞基P0 | 細胞硬脂酰去飽和酶(STEAROYL COA DESATURASE)活性光譜法定量酶聯(lián)免疫試劑盒 |
磷酸化蛋白酶體PSMβ7 | 人體液微量白蛋白(microalbumin)免疫比濁法定量酶聯(lián)免疫試劑盒 |
胞漿微型RNA(miRNA)電泳法分離試劑盒 | 胚胎組織培養(yǎng)液 |
細胞CHK1激酶活性定量pcr檢測試劑盒(A/B/C) | 細胞游離脂肪酸酶連續(xù)循環(huán)比色法定量酶聯(lián)免疫試劑盒 |
植物結(jié)合吲哚-3-(IAA)比色法定量pcr檢測試劑盒(包括萃?。?/span> | S-腺苷蛋氨酸脫羧酶抗體 |
果蠅inaD蛋白 | KDM4E蛋白抗體 |
細胞鈣ATP酶SERCA蛋白表達流式細胞儀pcr檢測試劑盒 | 細胞ABL1激酶活性定量pcr檢測試劑盒(A/B/C) |
咖啡乙酰舒泛(acesulfame K)含量高效液相色譜法定量pcr檢測試劑盒 | 胚胎干細胞中胚層(mesoderm)細胞分化熒光pcr檢測試劑盒 |
組蛋白去甲基化酶JARID2 | DPRX蛋白抗體 |
環(huán)指蛋白56 | 內(nèi)皮細胞的分化蛋白6抗體 |
ras基因相關(guān)蛋白RAB37 | 蛋白質(zhì)精氨酸亞型2抗體 |
腺病毒GFP穿梭載體 | Recombinant Human PMM2原癌基因酪氨酸蛋白激酶Yes1抗體 |
PerCP標記的血型糖蛋白A(CD235a)抗體 | 6號染色體開放閱讀框142抗體 |
關(guān)鍵字: PMM2;30.0 kDa ; 1-246;
上海西格生物有限公司于2019年6月18日成立。
西格生物專注于實驗室和公共衛(wèi)生領(lǐng)域,利用互聯(lián)網(wǎng)、數(shù)據(jù)分析及自動化技術(shù),包括實驗室固定資產(chǎn)、儀器設(shè)備、生物樣本、化學品、試劑、配件耗材、環(huán)境、儀器自動化和高通量篩選等一體化綜合管理平臺。不斷為各行業(yè)實驗室細胞生命學產(chǎn)品、技術(shù)服務(wù)、免疫學和分子學產(chǎn)品,截止至2024年5月,西格生物已為生命科學、檢驗檢測、化工材料、科研院所、政府機構(gòu)多行業(yè)300余家知名客戶提供實驗室完整解決方案。本著幫助用戶實現(xiàn)“讓科研場所更智能、讓科研人員更專注、讓科學服務(wù)更高效“的愿景,西格生物將繼續(xù)在實驗室科研產(chǎn)品領(lǐng)域持續(xù)發(fā)力,更加重視本土化,建構(gòu)通用性高、適應(yīng)性好、模塊搭配靈活,能快速響應(yīng)客戶需求的產(chǎn)品。