重組表達原理:
基因克隆?:從?;蚪M中獲取CST3基因的編碼序列(對應氨基酸31–148),插入含有啟動子、篩選標記和His標簽序列的質粒載體。
宿主表達?:將重組質粒轉化至E. coli(如BL21菌株),在IPTG誘導下啟動蛋白表達。該系統成本低、表達效率高,適合大規(guī)模生產。
蛋白純化?:利用His標簽與鎳柱親和層析結合,實現高純度(>95%)蛋白回收,再經透析或凝膠過濾去除雜質。
凍干保存?:加入海藻糖作為保護劑,凍干后可長期穩(wěn)定儲存,復溶后保持天然構象和生物活性。
產品概述:
該蛋白屬于Mg2?/Mn2?依賴性的PP2C家族絲氨酸/蘇氨酸蛋白磷酸酶。PPM1F在細胞信號轉導中扮演關鍵調控角色,它不僅是鈣調蛋白依賴性蛋白激酶(CaMK)的特異性磷酸酶,還被證實是整合素β1亞基T788/T789位點的生理性磷酸酶。通過去磷酸化這些關鍵底物,PPM1F能夠負向調控整合素的活性,進而影響細胞與細胞外基質的粘附和細胞遷移。研究表明,PPM1F在胚胎發(fā)育中至關重要,同時其表達水平與多種腫瘤細胞的侵襲能力密切相關,既能通過抑制整合素活性降低細胞粘附,又能通過調控PAK激酶促進細胞運動,從而促
產品名稱; Recombinant Human PPM1F
別名; Ca(2+)/calmodulin-dependent protein kinase phosphatase, CaM-kinase phosphatase, CAMKP, CaMKPase, FEM 2, hFEM-2, KIAA0015, Partner of PIX 2, POPX2, PP2C phosphatase, Ppm1f, PPM1F_HUMAN, Protein fem-2 homolog, Protein phosphatase 1F, Protein phosphatase 1F (PP2C domain containing), Protein phosphatase Mg2+/Mn2+ dependent 1F
宿主; E.Coli
表達區(qū)間; 1-454
分子量; 49.8 kDa
標簽; N-terminal His Tag
純度; Greater than 95% as determined by SDS-PAGE
應用; Western Blot, ELISA
性狀; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存儲; The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.
使用前準備:
離心處理?
凍干粉在運輸過程中可能附著于管壁或管蓋,開蓋前應先進行離心,確保粉末沉降至管底。
建議條件:3000–3500 rpm 離心 5 分鐘
若無高速離心機,可適當延長低速離心時間
平衡溫度?
將凍干粉緩慢恢復至室溫(避免加熱加速溶解),防止因溫差導致管內冷凝水影響蛋白穩(wěn)定性
溶解(Reconstitution)
溶解液選擇?
推薦使用無菌蒸餾水或 PBS(pH 7.4)進行復溶
若用于細胞實驗,可選用含 0.1% BSA 的緩沖液以增強穩(wěn)定性
配制濃度?
將凍干粉溶解至終濃度 ?0.1–1.0 mg/mL?,此范圍適用于大多數實驗場景
濃度過高可能導致蛋白聚集,過低則易失活
混勻方式?
使用移液槍頭輕輕吹打數次,或上下輕柔顛倒混勻
嚴禁使用渦旋振蕩器?,以免破壞蛋白空間結構,導致活性喪失
公司正在出售的產品:
突變的黑色素瘤相關抗原1 | 總脂肪酶(lipase)定量酶聯免疫試劑盒 |
磷酸化白介素1受體1 | PROTEASE酶解法石蠟切片抗原修復處理試劑盒 |
寡核苷酸探針非同位素AP化學發(fā)光法RNA北方雜交完全試劑盒 | 體外微管蛋白聚合作用(polymerization)熒光酶聯免疫試劑盒 |
組織腎素(renin)熒光共振能量轉移法(FRET)定量pcr檢測試劑盒 | 血液甘肽S轉移酶(GSH ST)總活性比色法定量酶聯免疫試劑盒 |
細胞色素P450亞酶CYP2B(EFC)活性熒光定量pcr檢測試劑盒 | 癌調蛋白/癌鈣蛋白抗體 |
睪丸特異性Y蛋白樣5 | kelch樣蛋白13抗體 |
MAPK蛋白免疫共沉淀分析試劑盒 | 體液基質金屬抑制劑2(TIMP-2)活性熒光定量pcr檢測試劑盒 |
咖啡甘素(dulcin)含量薄層色譜法定性pcr檢測試劑盒 | 石蠟切片組織衰老特異性晚期脂褐素鐵還原法 |
軸絲動力蛋白11 | FAM134B蛋白抗體 |
甲狀腺激素受體相互作用15 | 膜相關環(huán)指蛋白4抗體 |
PE標記人CD11c單克隆 | 蛋氨酸氨肽酶1D抗體 |
細菌醛酮還原酶(aldo-keto reductase)總活性比色法定量檢測試劑 | Recombinant Human PPM1F嗅覺受體52H1抗體 |
14號染色體開放閱讀框106抗體 | 22號染色體開放閱讀框26抗體 |
注意事項:
安全提示:僅限研究使用,避免接觸臨床樣本;操作時需佩戴防護裝備。
質量控制:產品純度通過SDS-PAGE驗證,確保生物活性穩(wěn)定;避免使用含硫柳汞等有毒物質的試劑。
兼容性:適用于多種實驗體系,但需優(yōu)化濃度以避免非特異性結合。
關鍵字: PPM1F;49.8 kDa ; 1-454;
上海西格生物有限公司于2019年6月18日成立。
西格生物專注于實驗室和公共衛(wèi)生領域,利用互聯網、數據分析及自動化技術,包括實驗室固定資產、儀器設備、生物樣本、化學品、試劑、配件耗材、環(huán)境、儀器自動化和高通量篩選等一體化綜合管理平臺。不斷為各行業(yè)實驗室細胞生命學產品、技術服務、免疫學和分子學產品,截止至2024年5月,西格生物已為生命科學、檢驗檢測、化工材料、科研院所、政府機構多行業(yè)300余家知名客戶提供實驗室完整解決方案。本著幫助用戶實現“讓科研場所更智能、讓科研人員更專注、讓科學服務更高效“的愿景,西格生物將繼續(xù)在實驗室科研產品領域持續(xù)發(fā)力,更加重視本土化,建構通用性高、適應性好、模塊搭配靈活,能快速響應客戶需求的產品。