重組蛋白生產(chǎn)流程:
通常包括以下幾個核心步驟:
基因克隆:首先,科學家需要獲取編碼目標蛋白的特定基因序列(目的基因)。
構建載體:將目的基因插入到一個被稱為“載體”的DNA分子中,這個載體就像是一個運輸工具,
能將目的基因送入宿主細胞并指導其表達。
轉入宿主:將構建好的重組載體導入選定的宿主細胞中,這個過程稱為“轉化”或“轉染”。
表達與培養(yǎng):宿主細胞在適宜的條件下進行大規(guī)模培養(yǎng),其自身的遺傳系統(tǒng)會讀取重組載體上的基因信息,開始大量生產(chǎn)目標蛋白。
純化:通過一系列復雜的生物化學方法(如層析技術),將目標重組蛋白從宿主細胞的眾多混合物中分離出來,以獲得高純度的產(chǎn)品。
產(chǎn)品概述:
該蛋白屬于 Rab 小 GTP 酶家族,作為一種分子開關,通過 GTP/GDP 結合狀態(tài)的轉換來調控細胞內的囊泡運輸過程。RAB3D 主要在分泌組織中表達,定位于分泌顆粒膜,參與調節(jié)性分泌途徑。研究表明,它在腫瘤細胞中異常高表達,能通過激活 AKT/GSK3β 信號通路促進上皮間質化轉變(EMT),并調控外泌體(exosome)的釋放及熱休克蛋白 90α(Hsp90α)的分泌,從而推動腫瘤的侵襲和轉移。此外,RAB3D 在惡性乳腺癌患者的血漿中亦有檢出,顯示出作為潛在腫瘤標志物的價值。重組人源 RAB3D
產(chǎn)品名 | Recombinant Human RAB3D | 分子量 | 26.0 kDa |
表達區(qū)間 | 2-219 | 貨號 | XG-DB3171 |
別名
D2-2, Glioblastoma overexpressed, GOV, RAB 16, RAB16, Rab3d, Rab3D upregulated with myeloid differentiation, RAB3D, member RAS oncogene family, RAB3D_HUMAN, RAD3D, Ras-related protein Rab-3D
宿主; E.Coli
表達區(qū)間; 2-219
分子量; 26.0 kDa
標簽; N-terminal His Tag
純度; Greater than 90% by SDS-PAGE gel analyses
應用; Western Blot, ELISA
性狀; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存儲; The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.
操作要點:
電泳條件?:使用15% SDS-PAGE凝膠,以提高對小分子量蛋白(~13.4 kDa)的分辨率。
?轉膜參數(shù)?:采用濕轉法,100 V、60–90分鐘(4°C),使用PVDF膜(需甲醇預活化)。
?抗體選擇?:
一抗:抗CST3多克隆抗體(如兔源抗體),推薦稀釋比為1:1000。
二抗:HRP標記的山羊抗兔IgG,稀釋比1:10,000。
?顯色方式?:ECL化學發(fā)光法,預期條帶位于?~13.4 kDa?處。
?內參建議?:由于CST3分子量較小,可選用GAPDH(~37 kDa)或β-actin(~42 kDa)作為內參,避免條帶重疊。
注意事項:
?安全提示?: 操作時需佩戴手套和護目鏡,遵循實驗室生物安全規(guī)范。
安全提示:僅限研究使用,避免接觸臨床樣本;操作時需佩戴防護裝備。
質量控制:產(chǎn)品純度通過SDS-PAGE驗證,確保生物活性穩(wěn)定;避免使用含硫柳汞等有毒物質的試劑。
兼容性:適用于多種實驗體系,但需優(yōu)化濃度以避免非特異性結合。
公司正在出售的產(chǎn)品:
外周苯二氮受體 | 人血液前白蛋白(prealbumin;PA)免疫比濁法定量酶聯(lián)免疫試劑盒 |
FITC標記人IL-2單克隆 | 性染色體分離(Ericsson法)試劑盒 |
植物中性蔗糖轉化酶(neutral invertase)活性比色法定量pcr檢測試劑盒 | 冰凍切片組織線粒體復合物II蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡酶聯(lián)免疫試劑盒 |
細胞色素P450亞酶CYP2B1(PROD)活性熒光定量pcr檢測試劑盒 | 通用型馬皰疹病毒(Equine Herpes Virus Type 1)基因酶聯(lián)免疫試劑盒 |
組織樣品組織L(CATHEPSIN L)活性熒光定量pcr檢測試劑盒 | 內質網(wǎng)分子伴侶SIL1抗體 |
過氧化物酶體生物合成因子10 | 二甲基苯胺單加氧酶3抗體 |
(SCHMORL)直接染色試劑盒 | 血液3-磷酸甘油醛脫氫酶(GAPDH)活性酶動力比色法 |
寡核苷酸探針非同位素HRP化學發(fā)光法RNA北方雜交完全試劑盒 | 細胞肉毒堿棕櫚酰轉移酶II(CARNITINE PALMITOYL-TRANSFERASE II)活性比色法定量pcr檢測試劑盒 |
組蛋白甲基轉移酶SMYD4 | 原鈣粘附蛋白10抗體 |
腱糖蛋白R | ATP5G2蛋白抗體 |
RHOJ蛋白 | 磷酸化鈣調節(jié)蛋白-1抗體 |
生物素標記的綠色熒光蛋白TurboGFP單克隆 | Recombinant Human RAB3DTANC1蛋白抗體 |
細胞總酶連續(xù)循環(huán)熒光定量檢測試劑盒 | HIRA相互作用蛋白3抗體 |
關鍵字: RAB3D;26.0 kDa ; 2-219;
上海西格生物有限公司于2019年6月18日成立。
西格生物專注于實驗室和公共衛(wèi)生領域,利用互聯(lián)網(wǎng)、數(shù)據(jù)分析及自動化技術,包括實驗室固定資產(chǎn)、儀器設備、生物樣本、化學品、試劑、配件耗材、環(huán)境、儀器自動化和高通量篩選等一體化綜合管理平臺。不斷為各行業(yè)實驗室細胞生命學產(chǎn)品、技術服務、免疫學和分子學產(chǎn)品,截止至2024年5月,西格生物已為生命科學、檢驗檢測、化工材料、科研院所、政府機構多行業(yè)300余家知名客戶提供實驗室完整解決方案。本著幫助用戶實現(xiàn)“讓科研場所更智能、讓科研人員更專注、讓科學服務更高效“的愿景,西格生物將繼續(xù)在實驗室科研產(chǎn)品領域持續(xù)發(fā)力,更加重視本土化,建構通用性高、適應性好、模塊搭配靈活,能快速響應客戶需求的產(chǎn)品。