重組蛋白是如何“誕生”的?
重組蛋白的生產(chǎn)過程就像是一場精密的分子手術(shù),主要分為以下幾個步驟:
基因克?。嚎茖W(xué)家先找到并復(fù)制出決定該蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的“基因藍(lán)圖”(目的基因)。
構(gòu)建載體:將這段“基因藍(lán)圖”插入到一個被稱為“載體”(通常是質(zhì)?;虿《荆┑倪\(yùn)輸工具中。
轉(zhuǎn)入宿主:把這個攜帶了新指令的載體送入“工廠”(宿主細(xì)胞,如大腸桿菌、CHO細(xì)胞等)。
表達(dá)與純化:宿主細(xì)胞根據(jù)新指令大量生產(chǎn)蛋白質(zhì),最后科學(xué)家通過復(fù)雜的工藝將這些蛋白質(zhì)分離、純化出來。
產(chǎn)品概述:
該蛋白屬于Smad家族,是轉(zhuǎn)化生長因子-β(TGF-β)和激活素(Activin)信號通路的關(guān)鍵胞內(nèi)信使。其核心功能是作為信號轉(zhuǎn)導(dǎo)子和轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)劑,在TGF-β配體與細(xì)胞表面受體結(jié)合后,被I型受體(ALK4/5/7)磷酸化激活,隨后與Smad4形成異源二聚體復(fù)合物并轉(zhuǎn)位至細(xì)胞核,通過與其他轉(zhuǎn)錄因子協(xié)同作用,調(diào)控靶基因的轉(zhuǎn)錄表達(dá),從而參與胚胎發(fā)育、細(xì)胞周期阻滯、上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化(EMT)及組織纖維化等多種生物學(xué)過程。值得注意的是,Smad2自身不直接結(jié)合DNA,而是依賴與其他DNA結(jié)合蛋白的相互作用來定位靶基因
產(chǎn)品名稱; Recombinant Human Smad2
別名; Drosophila, homolog of, MADR2, hMAD-2, HsMAD2, JV18, JV18-1, JV181, MAD, MAD homolog 2, MAD Related Protein 2, Mad-related protein 2, MADH2, MADR2, MGC22139, MGC34440, Mother against DPP homolog 2, Mothers against decapentaplegic homolog 2, Mothers against decapentaplegic, Drosophila, homolog of, 2, Mothers against DPP homolog 2, OTTHUMP00000163489, Sma and Mad related protein 2
宿主; E.Coli
表達(dá)區(qū)間; 2-467
分子量; 51.2 kDa
標(biāo)簽; N-terminal His Tag
純度; Greater than 95% as determined by SDS-PAGE
應(yīng)用; Western Blot, ELISA
性狀; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存儲; The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.
核心應(yīng)用:
重組蛋白技術(shù)是現(xiàn)代生物技術(shù)、醫(yī)學(xué)研究和制藥工業(yè)的基石,應(yīng)用極為廣泛。
生物制藥
這是重組蛋白最核心和價值最高的應(yīng)用領(lǐng)域。許多過去只能從人或動物體內(nèi)提取、來源稀少且昂貴的藥物,現(xiàn)在都可以通過重組技術(shù)大規(guī)模生產(chǎn)。例如:
細(xì)胞因子:如促紅素(治療貧血)、干擾素(抗病毒、抗腫瘤)、白細(xì)胞介素等。
激素:如重組人胰島素(治療糖尿?。?、人生長激素。
凝血因子:用于治療血友病。
單克隆抗體:已成為腫瘤、自身免疫性疾病等領(lǐng)域最重要的治療藥物之一。
疫苗開發(fā)
重組蛋白疫苗是一種重要的疫苗類型。它通過基因工程在體外細(xì)胞中表達(dá)病毒的關(guān)鍵抗原蛋白(如新冠病毒的RBD蛋白),純化后制成疫苗。這類疫苗不含活病毒,安全性高,且抗原成分精確、純度高。
科研與診斷
重組蛋白是生命科學(xué)研究中不可或缺的工具。
細(xì)胞培養(yǎng):作為生長因子、細(xì)胞因子等添加劑,用于干細(xì)胞誘導(dǎo)、細(xì)胞分化等研究。
免疫學(xué)研究:作為抗原用于開發(fā)ELISA等免疫檢測試劑盒,或用于產(chǎn)生抗體。
結(jié)構(gòu)與功能研究:幫助科學(xué)家研究蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)、功能以及細(xì)胞信號通路。
公司正在出售的產(chǎn)品:
退行性精母細(xì)胞同源物1 | 組織低密度脂蛋白(LDL-Cholesterol)酶連續(xù)循環(huán)比色法定量酶聯(lián)免疫試劑盒 |
Fas活化激酶結(jié)構(gòu)域蛋白5 | 細(xì)胞CDK3蛋白表達(dá)熒光定量酶聯(lián)免疫試劑盒 |
水中腸球菌(Enterococci)基因熒光定量pcr檢測試劑盒 | 載玻片細(xì)胞HISTONE H3蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡酶聯(lián)免疫試劑盒 |
體液HHV6-A(HUMAN HERPESVIRUS 6-A)病毒 | 體液胱(cystine)含量比色法定量酶聯(lián)免疫試劑盒 |
基質(zhì)金屬(MMP)明膠酶譜法(gelatin-zymography) | 腦型肉堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶1C抗體 |
谷氨酸受體紅藻氨酸離子1 | 凋亡相關(guān)蛋白3抗體 |
(適合與紅細(xì)胞分別;不適合人體心肌和小鼠腦組織) | 冰凍切片小膠質(zhì)細(xì)胞(MICROGLIA) |
持久型ECL化學(xué)發(fā)光顯影試劑盒 | 細(xì)菌總ATP酶(total ATPase)活性比色法定量pcr檢測試劑盒 |
轉(zhuǎn)錄抑制蛋白Sin3b | 胰島素樣生長因子2 mRNA 結(jié)合蛋白3抗體 |
脊髓小腦共濟(jì)失調(diào)蛋白BEAN1 | AF700標(biāo)記人CD11c單克隆抗體 |
PWWP域包含蛋白2 | 磷酸化p21激活激酶1/3抗體 |
AF750標(biāo)記的髓樣細(xì)胞白血病-1 | Recombinant Human Smad2ZC4H2蛋白抗體 |
純化微粒體磷脂酶D2(Phospholipase D2)活性比色法定量檢測試劑盒 | Hib乙酰輔酶A水解酶抗體 |
重組蛋白生產(chǎn)流程:
通常包括以下幾個核心步驟:
基因克隆:首先,科學(xué)家需要獲取編碼目標(biāo)蛋白的特定基因序列(目的基因)。
構(gòu)建載體:將目的基因插入到一個被稱為“載體”的DNA分子中,這個載體就像是一個運(yùn)輸工具,
能將目的基因送入宿主細(xì)胞并指導(dǎo)其表達(dá)。
轉(zhuǎn)入宿主:將構(gòu)建好的重組載體導(dǎo)入選定的宿主細(xì)胞中,這個過程稱為“轉(zhuǎn)化”或“轉(zhuǎn)染”。
表達(dá)與培養(yǎng):宿主細(xì)胞在適宜的條件下進(jìn)行大規(guī)模培養(yǎng),其自身的遺傳系統(tǒng)會讀取重組載體上的基因信息,開始大量生產(chǎn)目標(biāo)蛋白。
純化:通過一系列復(fù)雜的生物化學(xué)方法(如層析技術(shù)),將目標(biāo)重組蛋白從宿主細(xì)胞的眾多混合物中分離出來,以獲得高純度的產(chǎn)品。
關(guān)鍵字: Smad2;51.2 kDa; 2-467;
上海西格生物有限公司于2019年6月18日成立。
西格生物專注于實(shí)驗(yàn)室和公共衛(wèi)生領(lǐng)域,利用互聯(lián)網(wǎng)、數(shù)據(jù)分析及自動化技術(shù),包括實(shí)驗(yàn)室固定資產(chǎn)、儀器設(shè)備、生物樣本、化學(xué)品、試劑、配件耗材、環(huán)境、儀器自動化和高通量篩選等一體化綜合管理平臺。不斷為各行業(yè)實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞生命學(xué)產(chǎn)品、技術(shù)服務(wù)、免疫學(xué)和分子學(xué)產(chǎn)品,截止至2024年5月,西格生物已為生命科學(xué)、檢驗(yàn)檢測、化工材料、科研院所、政府機(jī)構(gòu)多行業(yè)300余家知名客戶提供實(shí)驗(yàn)室完整解決方案。本著幫助用戶實(shí)現(xiàn)“讓科研場所更智能、讓科研人員更專注、讓科學(xué)服務(wù)更高效“的愿景,西格生物將繼續(xù)在實(shí)驗(yàn)室科研產(chǎn)品領(lǐng)域持續(xù)發(fā)力,更加重視本土化,建構(gòu)通用性高、適應(yīng)性好、模塊搭配靈活,能快速響應(yīng)客戶需求的產(chǎn)品。