操作要點:

電泳條件:使用15% SDS-PAGE凝膠,以提高對小分子量蛋白(~13.4 kDa)的分辨率。
?轉(zhuǎn)膜參數(shù):采用濕轉(zhuǎn)法,100 V、60–90分鐘(4°C),使用PVDF膜(需甲醇預(yù)活化)。
?抗體選擇:
一抗:抗CST3多克隆抗體(如兔源抗體),推薦稀釋比為1:1000。
二抗:HRP標(biāo)記的山羊抗兔IgG,稀釋比1:10,000。
?顯色方式:ECL化學(xué)發(fā)光法,預(yù)期條帶位于?~13.4 kDa?處。
?內(nèi)參建議:由于CST3分子量較小,可選用GAPDH(~37 kDa)或β-actin(~42 kDa)作為內(nèi)參,避免條帶重疊。
產(chǎn)品概述:

該蛋白是一種保守的分子伴侶蛋白,其結(jié)構(gòu)特征包含三個關(guān)鍵結(jié)構(gòu)域:CS(Chaperone and SGT1)結(jié)構(gòu)域、SGT1 特異性(SGS)結(jié)構(gòu)域和 TPR(四肽重復(fù))結(jié)構(gòu)域。SUGT1 的核心功能是作為關(guān)鍵的輔助因子,通過與 HSP90(熱休克蛋白 90)等分子伴侶形成復(fù)合物,介導(dǎo)多種客戶蛋白(如激酶、泛素連接酶復(fù)合物組分)的正確折疊、組裝及穩(wěn)定性維持。它在先天免疫(NLR 受體蛋白的組裝)、細(xì)胞周期調(diào)控(SAC 紡錘體組裝檢查點)及泛素-蛋白酶體降解途徑中扮演不可或缺的角色。重組人源 SUGT1(通常
產(chǎn)品名 | Recombinant Human SUGT1 | 分子量 | 39.6 kDa |
表達區(qū)間 | 1-333 | 貨號 | XG-DB3501 |
別名
Protein 40 6 3, Protein 40-6-3, Protein SGT1 homolog, Putative 40 6 3 protein, Sgt1, SGT1 suppressor of G2 allele of SKP1, SGT1_HUMAN, SGT1B protein, sugt1, Suppressor of G2 allele of SKP1 homolog, Suppressor of G2 allele of SKP1 S. cerevisiae homolog of
宿主; E.Coli
表達區(qū)間; 1-333
分子量; 39.6 kDa
標(biāo)簽; N-terminal His Tag
純度; Greater than 90% as determined by SDS-PAGE
應(yīng)用; Western Blot, ELISA
性狀; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存儲; The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.
使用說明:

復(fù)溶方法: 使用無菌蒸餾水或PBS緩沖液(pH 7.4)溶解凍干粉,輕輕混勻至完全溶解。
?應(yīng)用建議:
?實驗用途: 適用于Western Blot、ELISA等檢測,作為抗原或標(biāo)準(zhǔn)品。
?濃度調(diào)整: 根據(jù)實驗需求稀釋,避免高濃度導(dǎo)致非特異性結(jié)合。
?安全提示: 操作時需佩戴手套和護目鏡,遵循實驗室生物安全規(guī)范。
重組表達原理:

基因克?。簭呐;蚪M中獲取CST3基因的編碼序列(對應(yīng)氨基酸31–148),插入含有啟動子、篩選標(biāo)記和His標(biāo)簽序列的質(zhì)粒載體。
?宿主表達:將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化至E. coli(如BL21菌株),在IPTG誘導(dǎo)下啟動蛋白表達。該系統(tǒng)成本低、表達效率高,適合大規(guī)模生產(chǎn)。
?蛋白純化:利用His標(biāo)簽與鎳柱親和層析結(jié)合,實現(xiàn)高純度(>95%)蛋白回收,再經(jīng)透析或凝膠過濾去除雜質(zhì)。
?凍干保存:加入海藻糖作為保護劑,凍干后可長期穩(wěn)定儲存,復(fù)溶后保持天然構(gòu)象和生物活性。
公司正在出售的產(chǎn)品:

維生素D結(jié)合蛋白 | 組織總膽汁酸酶循環(huán)比色法定量酶聯(lián)免疫試劑盒 |
FAM71A蛋白 | P16蛋白免疫共沉淀分析試劑盒 |
體外非細(xì)胞系統(tǒng)細(xì)胞色素P450亞酶1A2(PHENACETIN)活性 | 石蠟切片組織INSULIN R-ALPHA 蛋白表達熒光顯微鏡酶聯(lián)免疫試劑盒 |
體液VZV(VARICELLA ZOSTER)病毒定性pcr檢測試劑盒 | 植物亮(leucine)含量高效液相色譜法定量酶聯(lián)免疫試劑盒 |
細(xì)胞基質(zhì)金屬(MMP-2)活性比色法定量pcr檢測試劑盒 | 凝血調(diào)節(jié)蛋白/血栓調(diào)節(jié)素抗體 |
高嗜酸性粒細(xì)胞綜合癥相關(guān)蛋白FIP1L1 | 電壓門控性鉀通道蛋白Kv1.4抗體 |
細(xì)胞微管分離試劑盒 | 冰凍切片ATP酶活性染色試劑盒 |
λDNA (HINDIII)標(biāo)準(zhǔn)樣(100至2000堿基) | 組織氯乙酰轉(zhuǎn)移酶(CAT)活性熒光定量pcr檢測試劑盒 |
轉(zhuǎn)錄因子Gli4/鋅指蛋白gli4 | 乙酰化組蛋白H2B K5抗體 |
結(jié)腸直腸癌缺失基因 | APC標(biāo)記小鼠CD274單克隆抗體 |
PRP18蛋白 | 磷酸化T細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子NFAT4抗體 |
AF750標(biāo)記的巨噬細(xì)胞甘露糖受體 (CD206) | Recombinant Human SUGT1β-葡萄糖苷酶1抗體 |
6-KETO-PGF1a高效液相色譜法定量檢測試劑盒 | MAGIX蛋白抗體 |
重組蛋白生產(chǎn)流程:

通常包括以下幾個核心步驟:
基因克?。菏紫龋茖W(xué)家需要獲取編碼目標(biāo)蛋白的特定基因序列(目的基因)。
構(gòu)建載體:將目的基因插入到一個被稱為“載體”的DNA分子中,這個載體就像是一個運輸工具,
能將目的基因送入宿主細(xì)胞并指導(dǎo)其表達。
轉(zhuǎn)入宿主:將構(gòu)建好的重組載體導(dǎo)入選定的宿主細(xì)胞中,這個過程稱為“轉(zhuǎn)化”或“轉(zhuǎn)染”。
表達與培養(yǎng):宿主細(xì)胞在適宜的條件下進行大規(guī)模培養(yǎng),其自身的遺傳系統(tǒng)會讀取重組載體上的基因信息,開始大量生產(chǎn)目標(biāo)蛋白。
純化:通過一系列復(fù)雜的生物化學(xué)方法(如層析技術(shù)),將目標(biāo)重組蛋白從宿主細(xì)胞的眾多混合物中分離出來,以獲得高純度的產(chǎn)品。
關(guān)鍵字: SUGT1;39.6 kDa ; 1-333;
上海西格生物有限公司于2019年6月18日成立。
西格生物專注于實驗室和公共衛(wèi)生領(lǐng)域,利用互聯(lián)網(wǎng)、數(shù)據(jù)分析及自動化技術(shù),包括實驗室固定資產(chǎn)、儀器設(shè)備、生物樣本、化學(xué)品、試劑、配件耗材、環(huán)境、儀器自動化和高通量篩選等一體化綜合管理平臺。不斷為各行業(yè)實驗室細(xì)胞生命學(xué)產(chǎn)品、技術(shù)服務(wù)、免疫學(xué)和分子學(xué)產(chǎn)品,截止至2024年5月,西格生物已為生命科學(xué)、檢驗檢測、化工材料、科研院所、政府機構(gòu)多行業(yè)300余家知名客戶提供實驗室完整解決方案。本著幫助用戶實現(xiàn)“讓科研場所更智能、讓科研人員更專注、讓科學(xué)服務(wù)更高效“的愿景,西格生物將繼續(xù)在實驗室科研產(chǎn)品領(lǐng)域持續(xù)發(fā)力,更加重視本土化,建構(gòu)通用性高、適應(yīng)性好、模塊搭配靈活,能快速響應(yīng)客戶需求的產(chǎn)品。