重組蛋白（Recombinant Protein）：

是指利用重組DNA或RNA技術(shù)，在體外人工制造的蛋白質(zhì)。

這項(xiàng)技術(shù)通過將編碼特定目標(biāo)蛋白的基因片段，插入到重組表達(dá)載體中，然后導(dǎo)入宿主細(xì)胞（如細(xì)菌、酵母、哺乳動(dòng)物細(xì)胞等），

利用宿主細(xì)胞的“蛋白質(zhì)工廠”來生產(chǎn)出大量的、具有特定生物學(xué)活性的蛋白質(zhì)。

產(chǎn)品概述：

VILIP3的核心功能與鈣離子信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)密切相關(guān)。在結(jié)合鈣離子后，其構(gòu)象會(huì)發(fā)生改變，進(jìn)而調(diào)節(jié)靶蛋白的活性，參與神經(jīng)元的信號(hào)傳遞和可塑性調(diào)控。研究表明，VILIP3在多種癌癥（如肝細(xì)胞癌）中異常表達(dá)，并與腫瘤的進(jìn)展和不良預(yù)后相關(guān)。它可能通過參與蛋白質(zhì)的肉豆蔻?；揎椀葯C(jī)制，影響細(xì)胞增殖和存活信號(hào)通路。重組人VILIP3蛋白主要用于神經(jīng)生物學(xué)、癌癥發(fā)生機(jī)制及鈣信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路等領(lǐng)域的基礎(chǔ)科學(xué)研究。

別名

BDR1, Calcium binding protein BDR1, Calcium-binding protein BDR-1, hippocalcin like 1, Hippocalcin-like protein 1, HLP2, HPCAL1, HPCAL1 protein, HPCL1_HUMAN, REM-1, VILIP-3, Visinin like protein 3, Visinin-like protein 3

宿主; E.Coli

表達(dá)區(qū)間; 1-193

分子量; 21.1 kDa

標(biāo)簽; N-terminal His Tag

純度; Greater than 95% as determined by SDS-PAGE

應(yīng)用; Western Blot, ELISA

性狀; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4

溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex

存儲(chǔ); The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.

 使用說明：

復(fù)溶方法?: 使用無菌蒸餾水或PBS緩沖液（pH 7.4）溶解凍干粉，輕輕混勻至完全溶解。

?應(yīng)用建議?:

?實(shí)驗(yàn)用途?: 適用于Western Blot、ELISA等檢測(cè)，作為抗原或標(biāo)準(zhǔn)品。

?濃度調(diào)整?: 根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求稀釋，避免高濃度導(dǎo)致非特異性結(jié)合。

?安全提示?: 操作時(shí)需佩戴手套和護(hù)目鏡，遵循實(shí)驗(yàn)室生物安全規(guī)范。

重組表達(dá)原理：

基因克隆?：從牛基因組中獲取CST3基因的編碼序列（對(duì)應(yīng)氨基酸31–148），插入含有啟動(dòng)子、篩選標(biāo)記和His標(biāo)簽序列的質(zhì)粒載體。

?宿主表達(dá)?：將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化至E. coli（如BL21菌株），在IPTG誘導(dǎo)下啟動(dòng)蛋白表達(dá)。該系統(tǒng)成本低、表達(dá)效率高，適合大規(guī)模生產(chǎn)。

?蛋白純化?：利用His標(biāo)簽與鎳柱親和層析結(jié)合，實(shí)現(xiàn)高純度（>95%）蛋白回收，再經(jīng)透析或凝膠過濾去除雜質(zhì)。

?凍干保存?：加入海藻糖作為保護(hù)劑，凍干后可長(zhǎng)期穩(wěn)定儲(chǔ)存，復(fù)溶后保持天然構(gòu)象和生物活性。

公司正在出售的產(chǎn)品：

操作要點(diǎn)：

電泳條件?：使用15% SDS-PAGE凝膠，以提高對(duì)小分子量蛋白（~13.4 kDa）的分辨率。

?轉(zhuǎn)膜參數(shù)?：采用濕轉(zhuǎn)法，100 V、60–90分鐘（4°C），使用PVDF膜（需甲醇預(yù)活化）。

?抗體選擇?：

一抗：抗CST3多克隆抗體（如兔源抗體），推薦稀釋比為1:1000。

二抗：HRP標(biāo)記的山羊抗兔IgG，稀釋比1:10,000。

?顯色方式?：ECL化學(xué)發(fā)光法，預(yù)期條帶位于?~13.4 kDa?處。

?內(nèi)參建議?：由于CST3分子量較小，可選用GAPDH（~37 kDa）或β-actin（~42 kDa）作為內(nèi)參，避免條帶重疊。

存儲(chǔ)條件：

凍干狀態(tài)?: 存儲(chǔ)于-20°C以下，可穩(wěn)定保存長(zhǎng)達(dá)12個(gè)月。

?復(fù)溶后?: 在2-8°C下可保存1個(gè)月，需保持無菌環(huán)境。

?注意事項(xiàng)?: 避免反復(fù)凍融，以防止蛋白降解或活性損失。